一、蛔虫卵的发生与卵壳形成（论文文献综述）
赵建国[1]（2019）在《海南地方猪蛔虫病调查、抗药性检测、抗蠕虫药杀卵试验及与宿主互作生化机制的初步研究》文中提出猪蛔虫病是危害我国乃至世界猪业生产的一种重要肠道寄生线虫病,呈世界性分布。本研究主要分为三部分:第一部分对海南“地方猪”进行猪蛔虫病流行病学调查,掌握猪蛔虫卵在环境中的土壤、水体的时空分布规律,分析养殖模式、热带气候、地域环境及社会人文等因素与海南“地方猪”感染蛔虫病的关系,建立适合海南热带气候环境的猪蛔虫病综合防控方案,为促进海南国际旅游岛乡村生态文明建设以及猪蛔虫病科学防治提供参考依据;第二部分研究抗蠕虫药杀卵活性检测方法和猪蛔虫耐药性定量检测方法,供临床筛选已知有效药剂、研制开发未知新药提供参考技术方案。第三部分研究牛胆汁及其主要成分对促进蛔虫卵孵化和提高幼虫移行活力方面的作用,初步分析胆汁中生物活性成分介导蛔虫卵孵化及提高幼虫移行活力的生化机制,为蛔类线虫宿主特异性、动物寄生线虫生物防控研究奠定基础。研究结果如下:（1）2015～2018年间共采集海南地方猪肠体、猪粪、土壤和水体样本19606份,样本源于海南18个县市（不含三沙市）,68个自然村,30个屠宰场,64个散养户,95个小型养殖户和38个中型养殖户,样本采集点基本覆盖海南岛陆域全境。结果表明,海南东部地区各县市猪粪样本蛔虫卵检出率为7.6%,中部14.8%,西部13.8%;哺乳仔猪粪便样本检出率2.5%,保育猪30.9%,生长肥育猪30.7%,种猪30.9%;各县市屠宰场育成猪肠道成虫检出率为1.2～3.6%,感染强度为1～8条,多数2～3条;田园菜地土壤样本蛔虫卵检出率7.2%,河流沿岸2.6%,田间水体1.2%,水库水体0%,洼地积水5.0%。海南“地方猪”整体蛔虫病感染率较低,表现“局部区域流行”特征。同时,猪蛔虫病流行因素较为复杂,蛔虫卵散播随干湿季节而不同,迁移范围变化较大,蛔虫病散播风险较高。（2）建立了抗蠕虫药体内外杀卵活性检测方法,并检测了阿维菌素、多拉菌素、伊维菌素和氟苯哒唑四种驱虫药剂的杀卵活性。其中,阿维菌素、多拉菌素和伊维菌素未能表现蛔虫卵发育抑制现象,与对照组比较,变化不明显（P>0.05）。用氟苯达唑处理猪排出蛔虫采集的虫卵镜检观察,发现卵胚发育受到抑制,大多数虫卵仍停留在1细胞期（85.5%）,只有6.3%的虫卵发育成幼虫。体外检测法将驱虫药（0.04ppm的多拉菌素或1.0 ppm的氟苯达唑）处理的蛔虫卵人工感染小鼠,通过观察肺脏中L3鉴定蛔虫卵的感染性。结果表明,体外驱虫药处理对蛔虫卵发育无显着影响（P>0.05）。该方法可用于筛选具有杀卵活性的药效成分或植物提取物。（3）建立了联合虫卵孵化分析法和琼脂凝胶幼虫移行试验的一种猪蛔虫耐药性定量检测方法,测试苯并咪唑和四氢嘧啶/咪唑噻唑等抗蠕虫药对蛔虫的耐药性。利用迁移到各处理孔和对照孔表面的幼虫百分比计算抑制50%幼虫迁移的药物浓度（EC50）。噻苯达唑、芬苯达唑、甲苯达唑、左旋咪唑和噻嘧啶对蛔虫卵的EC50值分别为 74～150、4.9～13.9、2.3～4.3、358～1150 和 1100～4000nM。该方法作为一种敏感的生物测定方法,既可用于检测耐药性,又可用于筛选驱虫药活性成分。（4）采用HPLC法测定了牛、猪和鸡3种动物胆汁中7种胆汁酸LCA、CA、DCA、CDCA、HC、GDCA、TCA的成分和含量。其中牛胆汁中有6种,猪胆汁中有5种,鸡胆汁中有1种。牛胆汁酸中LCA含量最高（16.08μg/mL）,猪胆汁中DCA含量最高（6.42 μg/mL）,鸡胆汁中CDCA（4.01 μg/mL）含量高于牛（0.15μg/mL）和猪（0.08μg/mL）。玻璃珠震荡虫卵孵育法联合体外幼虫移行试验结果表明,试验组1（牛胆汁）中,5%牛胆汁添加量蛔虫幼虫移出率最高,为32.51%。随着胆汁浓度的增加,幼虫移出的数量逐渐减少,当胆汁浓度达到80%时,幼虫移出率最低,为6.24%;试验组2（鸡胆汁）中,浓度变化对幼虫移出率影响效果不明显（P>0.05）,与该组对照孔比较,鸡胆汁的添加表现出抑制蛔虫幼虫（L2）移行行为的作用。试验组3（猪胆汁）中,5～10%猪胆汁的添加量有利于蛔虫幼虫的移出,随着猪胆汁浓度的增加,幼虫移出率表现出与试验组1相似的结果。7种胆汁酸对猪蛔虫幼虫移行活力的影响结果表明,随着各试验组胆汁酸浓度的递增,与对照组比较,幼虫移出率变化不明显（P>0.05）,可见,单一胆汁酸化合物不能提高蛔虫幼虫的迁移活力。为了丰富琼脂凝胶移行试验对胆汁种类的选择,试验选择牛、猪和鸡胆汁进行物理性质比较发现:牛胆汁容量最多,猪胆汁粘性最强,牛、猪和鸡胆汁均部分溶于水。三种动物胆汁溶于无水乙醇均有沉淀和浑浊表现,在丙酮中均不溶解,在DMSO中溶解性较好。这有利于生物检测试验方法的优化和检测范围的扩展。综上所述,本研究比较全面的对海南地方猪蛔虫病感染情况、流行趋势及影响猪蛔虫卵散播的气候、环境和社会人文因素进行了调查分析,提出了科学有效的综合驱虫方案。经过反复多次试验,成功建立了驱虫药杀卵试验方法和驱虫药耐药性定量检测方法。并对胆汁在蛔虫卵孵化、幼虫移行活力方面的作用进行了初步分析,为后续蛔类线虫与宿主互作化学通讯机制研究及其生物防控提供参考依据。
孙颖[2]（2017）在《西氏贝蛔虫FABP基因和GAL基因的原核表达及重组蛋白诊断价值的初步评价》文中提出西氏贝蛔虫（Baylisascaris schroederi）是危害圈养大熊猫最主要的寄生虫。大熊猫感染该蛔虫后的主要症状表现为精神沉郁,食欲减退,消瘦等,严重感染时可引起大熊猫死亡。目前对大熊猫西氏贝蛔虫病的诊断主要依靠粪便漂浮法和PCR方法检测粪样中的虫卵,但以上方法不能进行早期诊断。本研究进行了西氏贝蛔虫脂肪酸结合蛋白基因和半乳糖凝集素基因的扩增与原核表达、免疫印迹和荧光免疫组化定位分析,并评价了西氏贝蛔虫脂肪酸结合蛋白和半乳糖凝集素的诊断价值,为西氏贝蛔虫早期诊断方法的建立奠定了基础。一、西氏贝蛔虫脂肪酸结合蛋白基因的原核表达及重组蛋白诊断价值的初步评价脂肪酸结合蛋白属于胞质脂肪酸结合蛋白大家族,能够特异性地结合脂肪酸及一些疏水的配基,并转运细胞膜上的脂肪酸,促进酯化反应。本研究从西氏贝蛔虫成虫的总RNA中扩增出脂肪酸结合蛋白基因,基因的ORF框有438 bp,共编码145个氨基酸,脂肪酸结合蛋白蛋白的分子质量为16.7 KDa,其氨基酸序列与猪蛔虫的脂肪酸结合蛋白序列相似性达92%。在大肠杆菌中表达的重组脂肪酸结合蛋白分子质量大约为34 KDa。荧光免疫组化结果显示脂肪酸结合蛋白主要集中在西氏贝蛔虫成虫肠道及卵巢壁,在虫体其余部分也有分布。间接ELISA结果显示该方法具有较高的敏感性95.8%（23/24）和特异性100%（12/12）,可作为检测西氏贝蛔虫病的候选诊断抗原。二、西氏贝蛔虫半乳糖凝集素基因的原核表达及重组蛋白诊断价值的初步评价半乳糖凝集素是广泛存在于从低等原生动物到高等脊椎动物等多种生物体内的各种组织细胞中,在细胞黏附、细胞凋亡、炎症反应等许多生理及病理过程中发挥重要的作用。本试验通过转录组数据中的半乳糖凝集素基因序列设计特异性引物,从西氏贝蛔虫成虫的总RNA中扩增出半乳糖凝集素基因,其ORF框有429 bp,共编码142个氨基酸,半乳糖凝集素的分子质量为16.1 KDa,氨基酸序列与猪蛔虫该蛋白的序列相似性为76%。在大肠杆菌中原核表达出的西氏贝蛔虫重组半乳糖凝集素,其分子质量大约34 KDa。荧光免疫结果显示半乳糖凝集素在西氏贝蛔虫成虫体壁、子宫及虫卵等位置均有大量分布。间接ELISA结果显示:敏感性91.7%（22/24）,特异性 100%（12/12）。
魏元一,翁屹,张居中,樊温泉,信应君[3]（2012）在《郑州春秋时代墓葬中的寄生虫》文中认为本文是对郑州金水庙李和新郑梨河晨辉两处东周墓地部分墓葬腹土中寄生虫的研究。在两处墓地墓葬腹土中,成功提取到了5个墓葬中的34粒蛔虫卵,包括18粒受精卵和16粒未受精卵。研究表明,郑州地区早在春秋时期就有蛔虫病感染和流行,同时也反映了当时普通居民生活的自然环境和社会环境状况。此外,通过本次研究在前人的基础上成功地改进了实验方法和技术,减少了实验过程对寄生虫卵的损坏,改进后的实验方法对我国墓葬腹土寄生虫考古研究具有一定的参考价值和推动作用。
赵广英[4]（2002）在《东北虎狮弓蛔虫感染的综合防制及曼氏迭宫绦虫的形态学观测》文中指出本研究的目的，一是对东北虎危害严重的狮弓蛔虫（T.L.）病进行感染情况调查，制定综合防制措施并帮助实施，最大限度减轻T.L.对东北虎的危害，同时为他种动物蛔虫病的防制提供有效的参考资料；二是观测源自东北虎的曼氏迭宫绦虫（S.M，在我国东北三省境内野生动物体中首次被发现）较源自他种宿主和地域的S.M.在形态学上的异同点。用改良斯陶尔氏法和饱和食盐水浮集法最先测得33只东北虎狮弓蛔虫的感染率为63.46％，感染强度最高达11900e.p.g.，平均为8740，比较检测虫卵的4种方法，结果是饱和食盐水浮集法最适用，且敏感、简便易行而经济。比较选出盐酸左旋咪唑为主要驱虫药，具安全、高效且经济，最初用药量为3mg／kg体重，虫卵转阴率达100％，驱虫6个月后感染率又明显回升，故单纯药物驱虫难以达到理想的防制效果。为此制定了综合防制措施并帮助加以实施。多种驱虫药物交替使用，防止虫体产生耐药性；定期驱虫，粪便合理化处理；生活环境定期和随时消毒，消毒方法有灯火焰消毒法，烧荒法、翻土法、表层砂土覆盖法、热碱水笼舍地面消毒法等。长期坚持实施上述综合防制措施，感染率由原来的65％左右下降到15％左右，且感染强度由原来的平均8500左右下了降到150左右，后期驱虫时一次群体验出虫体的总数量由最初的4千多条下降到几十条，不足原来一只虎驱出的虫体数。 对源自东北虎的2条S.M.虫体进行宏观观测、解剖镜观测、光镜压片染色标本和组织切片染色标本的观测及扫描电镜观测、摄影和分析，并与亲缘关系颇近的阔节裂头绦虫体进行了形态学比较，结果和结论如下：在我国东北三省境内首次发现野生动物感染曼氏迭宫绦虫成虫；所获2条虫体的长度分别是157.24cm和221.75cm，远远大于一般资料所述可达100cm的长度；虫体后部节片长：宽最大可达2.37:1，远远超过一般资料所述最大不超过1:1的比例，虫体最先老化的部分末端节片的梅氏腺特制发达；扫描电镜下虫体表面具有大同不小与形状的突起和孔隙，其排列规律与生理功能相吻合，而非单一的绒毛状和小孔道结构；拍摄了许多珍贵的照片，如孕节节片腹面突起伸出体表的雄茎、雌性生殖孔及正在排出虫卵的子宫口。对形态学较全面的观测和分机为该虫生理、致病作用和其他方面的研究都能提供很有意义的基础资料。
苏天成,陈孝龄,廖荣中[5]（1986）在《战国楚墓古尸体内寄生虫卵的扫描电镜观察》文中研究表明 1982年在湖北江陵县发掘一古墓,经考证为战国中期楚墓。墓内有一女尸遗骸,收集其残存附着物,经寄生虫学鉴定,共发现有三种寄生虫卵:华枝睾吸虫卵、鞭虫卵和未受精蛔虫卵（雷森等,1984）。这三种寄生虫卵较迄今已报道的古尸内同种卵提早约200到1800多年,是我国目前已知的年代最早的,也是世界上最早的记录。
孟宪钦,王松山,周文琴,王伯霞,应国华,李向印,赵玉珍[6]（1982）在《二甲亚砜（DMSO）冷冻断裂猪蛔虫卵的扫描电镜观察》文中研究指明 观察蛔虫卵的膜构造及卵细胞的发育有助于细胞生物学的研究,过去报导以光镜观察和化学分析为主。Rogers（1956）首先用透射电镜观察了猪蛔虫卵,并提出卵壁分三层,即蛋白质膜、几丁质壳和类脂质层。Inatomi（1962）着重研究了几丁质壳。Ishiiet al.（1974）冷冻断裂了成虫子宫,用扫描电镜观察了蛔虫卵的断面。Ubelaker et al.（1975）作表面扫描观察,详细地描述了蛔虫卵的特征,并提出具有卵盖的理论,已引起人们的重视。Foor（1967）研究了蛔虫卵的卵细胞发育和卵壳的形成,对屈光小体作了形态观察,认为在其匀浆基质内可能含有蛔甙酯,为构成蛔甙层的元素。
孟宪钦,王松山,周文琴,王伯霞,应国华,李向印,张玉英,王亚飞[7]（1982）在《蛔虫卵的发生与卵壳形成》文中研究说明 本文是用DMSO冷冻割断法断裂了人蛔虫的雌性生殖器官,包括卵巢的生殖区、生长区;输卵管近段（近卵巢段）、远段（近子宫段）;子宫近段（近输卵管段）中段及远段（近阴门段）;经临界点干燥,离子镀膜仪镀金,用扫描电镜25—30KV进行观察。 卵巢是两个实体的细胞索,内含生殖细胞及上皮细胞,生殖区产生卵原细胞尚未见到轴索形成。生长区内含初级卵母细胞,由细胞质间桥与轴索连接,该细胞排列于
孟宪钦,王松山,周文琴,王伯霞,应国华,李向印,张玉英,王亚飞[8]（1982）在《蛔虫卵的发生与卵壳形成》文中提出 关于蛔虫卵的发生,最早研究多使用马副蛔虫,关于狐蛔虫、猪蛔虫和鸡蛔虫等也分别由Nelson（1852）（1）、Ishii（1954）（2）和Le-(1971（3）等人作过详细描述,此外Prestage（1960）（4）又着重观察了猪蛔虫的卵巢,特别分析了轴索（Rachis）的形态与功能,Foor（1967）（5）用透射电镜观察人蛔虫卵的发育与卵壳的形成,特别指出屈光小体（Refringentbody）与卵壳形成的关系。首先用电镜研究
二、蛔虫卵的发生与卵壳形成（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、蛔虫卵的发生与卵壳形成（论文提纲范文）
（1）海南地方猪蛔虫病调查、抗药性检测、抗蠕虫药杀卵试验及与宿主互作生化机制的初步研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 猪蛔虫与猪蛔虫病 |
| 1.1.1 猪蛔虫的起源、分类及生物学特性 |
| 1.1.2 猪蛔虫病危害与流行 |
| 1.2 猪蛔虫卵的结构与发育 |
| 1.2.1 猪蛔虫(雌)生殖结构与功能 |
| 1.2.2 猪蛔虫卵的结构及化学组成 |
| 1.2.3 猪蛔虫卵的发育 |
| 1.2.4 猪蛔虫幼虫发育与蛔蚴移行症 |
| 1.3 猪蛔虫卵环境行为影响因素与生态防控 |
| 1.3.1 自然因素 |
| 1.3.2 社会与人文因素 |
| 1.4 猪蛔虫驱虫药研究进展 |
| 1.4.1 常见驱蛔药及其发展历程 |
| 1.4.2 驱蛔药耐药性 |
| 1.4.3 模型动物与实验动物 |
| 1.4.4 驱蛔药残留与食品安全 |
| 1.4.5 驱蛔药环境行为及生态毒理 |
| 1.5 研究目的和意义 |
| 1.6 研究技术路线 |
| 2 海南地方猪蛔虫病调查及蛔虫卵环境分布规律研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 调研区域与规划 |
| 2.1.2 布点原则与方案 |
| 2.1.3 调研内容 |
| 2.1.4 采样方法与保存 |
| 2.1.5 试剂耗材 |
| 2.1.6 样品处理与检验 |
| 2.1.7 数据整理与分析 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 采集点及样本的数量和地理分布 |
| 2.2.2 海南各区域县市地方猪粪便样本检测结果 |
| 2.2.3 海南地方猪不同生长阶段粪便样本蛔虫卵检测结果 |
| 2.2.4 海南各县市屠宰场采样点成虫检出结果 |
| 2.2.5 海南地方猪类群粪便样本蛔虫卵检测结果 |
| 2.2.6 养殖环境土壤中蛔虫卵时空分布规律 |
| 2.2.7 海南地方猪养殖环境周边水体中蛔虫卵时空分布规律 |
| 2.2.8 驱虫对海南地方猪蛔虫感染率的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 3 抗蠕虫药抑制虫卵发育及对小鼠感染性的研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验药品 |
| 3.1.2 仪器设备 |
| 3.1.3 试验动物 |
| 3.1.4 试验设计 |
| 3.1.5 试验方法 |
| 3.1.6 数据处理与分析 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 抗蠕虫药药效评价 |
| 3.2.2 抗蠕虫药体内处理对蛔虫卵发育的影响 |
| 3.2.3 抗蠕虫药体外处理对猪蛔虫卵发育和小鼠经口感染性的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 抗蠕虫药药效及其抑制蛔虫卵发育活性评价 |
| 3.3.2 抗蠕虫药的浓度、作用时间与抑制蛔虫卵发育的关系 |
| 3.4 小结 |
| 4 猪蛔虫耐药性定量检测方法的研究 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 蛔虫来源与数量 |
| 4.1.2 虫卵孵化与幼虫分离 |
| 4.1.3 试验药物配制 |
| 4.1.4 琼脂凝胶幼虫迁移试验 |
| 4.1.5 数据分析 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 虫卵孵化 |
| 4.2.2 幼虫体外移行试验的优化 |
| 4.2.3 不同虫株的EC_(50) |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 体外幼虫移行试验用于蛔虫耐药性检测的可行性 |
| 4.3.2 体外幼虫移行试验用于蛔虫耐药性检测的影响因素 |
| 4.3.3 体外幼虫移行试验用于蛔虫耐药性检测的局限性 |
| 4.4 小结 |
| 5 胆汁促进猪感染性蛔虫卵破壳逸出的试验研究 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 蛔虫卵的采集与孵化 |
| 5.1.2 胆汁和培养液 |
| 5.1.3 胆汁酸粗提物及溶液配制 |
| 5.1.4 胆红素的提取及溶液配制 |
| 5.1.5 试验方法 |
| 5.1.6 数据整理与分析 |
| 5.2 结果 |
| 5.3 分析与讨论 |
| 5.3.1 感染性猪蛔虫卵破壳逸出机制的分析 |
| 5.3.2 胆汁酸促进感染性蛔虫卵破壳逸出的机制 |
| 5.3.3 低浓度(5%)牛胆汁有助于蛔虫卵孵化 |
| 5.4 小结 |
| 6 胆汁提高猪蛔虫幼虫(L_2)迁移活力的影响试验 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 试验材料 |
| 6.1.2 试验方法 |
| 6.1.5 数据整理与分析 |
| 6.2 结果与分析 |
| 6.2.1 牛、猪和鸡胆汁物理性质比较 |
| 6.2.2 牛、猪和鸡三种动物常见胆汁酸种类与含量的测定 |
| 6.2.3 胆汁提高蛔虫幼虫移行活力的影响试验 |
| 6.2.4 七种胆汁酸化合物对猪蛔虫幼虫迁移活力的影响 |
| 6.3 分析与讨论 |
| 6.3.1 胆汁提高蛔虫幼虫移行活力的原因 |
| 6.3.2 宿主特异性与胆汁酸浓度的关系 |
| 6.3.3 体外幼虫迁移试验对动物胆汁的选择 |
| 6.4 小结 |
| 7 总结、问题与展望 |
| 7.1 主要结论 |
| 7.1.1 海南地方猪蛔虫病流行因素复杂,表现局部区域流行特征,湿季散播风险高 |
| 7.1.2 建立了抗蠕虫药对猪蛔虫卵体内外杀卵试验方法 |
| 7.1.3 建立了抗蠕虫药耐药性定量检测方法 |
| 7.1.4 天然牛胆汁(5%)有促进蛔虫卵孵化的作用,随着浓度逐渐升高,其孵化率逐渐降低 |
| 7.1.5 验证了不同动物胆汁酸化合物对猪蛔虫幼虫移行活力的影响。 |
| 7.2 创新点 |
| 7.2.1 对我国热带海岛地方猪蛔虫病流行病学进行了全面系统的调查研究 |
| 7.2.2 建立了抗蠕虫药杀卵活性体内外检测方法 |
| 7.2.3 建立了猪蛔虫耐药性定量检测方法 |
| 7.2.4 对胆汁成分中具有促进猪蛔虫卵孵化逸出和提高幼虫(L2)移行活力的化学信息物质进行了初步生物测定 |
| 7.3 建议与展望 |
| 参考文献 |
| 缩略语表 |
| 附录 |
| 附件1 海南地方猪养殖户样品采集点数量与行政分布 |
| 附件2 海南各县市屠宰场采样点名称与地址 |
| 附件3 作者简介 |
| 致谢 |
（2）西氏贝蛔虫FABP基因和GAL基因的原核表达及重组蛋白诊断价值的初步评价（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 文献综述 |
| 1. 大熊猫西氏贝蛔虫病 |
| 1.1 大熊猫与其寄生虫现状 |
| 1.2 西氏贝蛔虫生活史 |
| 1.3 病理变化和临床症状 |
| 1.4 流行病学 |
| 1.5 西氏贝蛔虫病的诊断 |
| 2. 寄生虫的脂肪酸结合蛋白 |
| 2.1 脂肪酸结合蛋白概述 |
| 2.2 寄生性蠕虫脂肪酸结合蛋白 |
| 2.2.1 吸虫和绦虫脂肪酸结合蛋白 |
| 2.2.2 线虫脂肪酸结合蛋白 |
| 3. 寄生虫的半乳糖凝集素 |
| 3.1 半乳糖凝集素概述 |
| 3.2 寄生虫半乳糖凝集素相关研究 |
| 4. 研究目的及意义 |
| 第二部分 研究内容 |
| 第一章 西氏贝蛔虫脂肪酸结合蛋白基因的原核表达及诊断价值的初步评价 |
| 1 材料与试剂 |
| 1.1 试验动物 |
| 1.2 虫体及血清样品 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 1.5 常用缓冲溶液和培养基的配制 |
| 1.6 主要的生物信息数据库和计算机软件 |
| 2 方法 |
| 2.1 西氏贝虫总RNA的提取 |
| 2.2 第一链cDNA的合成 |
| 2.3 Bs-FABP基因的扩增 |
| 2.4 PCR产物的回收 |
| 2.5 Bs-FABP基因克隆、鉴定及转化 |
| 2.5.1 Bs-FABP基因克隆测序 |
| 2.5.2 序列比对与生物信息学分析 |
| 2.5.3 质粒提取 |
| 2.5.4 质粒酶切回收 |
| 2.5.5 目的片段连接表达载体 |
| 2.5.6 pET32a-Bs-FABP重组质粒双酶切鉴定 |
| 2.6 重组Bs-FABP在大肠杆菌中的表达 |
| 2.6.1 重组蛋白的表达 |
| 2.6.2.1 重组蛋白的可溶性分析 |
| 2.6.2.2 SDS-PAGE电泳检测 |
| 2.7 重组蛋白的纯化 |
| 2.8 重组蛋白免疫原性分析 |
| 2.8.1 兔抗rBs-FABP-IgG的制备 |
| 2.8.2 免疫印迹 |
| 2.9 免疫荧光定位 |
| 2.9.1 兔抗rBs-FABP总IgG制备 |
| 2.9.2 虫体蜡块的制作 |
| 2.9.3 间接免疫荧光定位 |
| 2.10 间接ELISA方法的建立 |
| 2.10.1 间接ELISA操作步骤 |
| 2.10.2 确定最佳条件 |
| 2.10.3 临界值的确定 |
| 2.10.4 批内重复性试验 |
| 2.10.5 批间重复性试验 |
| 2.10.6 敏感性试验 |
| 2.10.7 特异性试验 |
| 2.11 小鼠间接ELISA方法 |
| 2.11.1 感染性西氏贝蛔虫卵的培养 |
| 2.11.2 小鼠攻虫试验 |
| 2.11.3 临界值的确定 |
| 2.11.4 敏感性试验 |
| 3 结果 |
| 3.1 Bs-FABP基因的克隆 |
| 3.1.1 Bs-FABP基因的PCR扩增 |
| 3.1.2 重组克隆质粒PCR鉴定 |
| 3.1.3 重组克隆质粒序列鉴定 |
| 3.2 Bs-FABP基因的生物信息学分析 |
| 3.2.1 Bs-FABP基因的序列分析 |
| 3.2.3 Bs-FABP信号肽及跨膜区预测 |
| 3.2.4 Bs-FABP亲/疏水性预测 |
| 3.2.5 Bs-FABP蛋白的氨基酸序列同源性分析及分子进化树构建 |
| 3.2.6 Bs-FABP蛋白的二级和三级结构预测 |
| 3.3 重组pET32a(+)-Tm-FABP的表达 |
| 3.4 表达条件优化 |
| 3.4.1 IPTG浓度的优化 |
| 3.4.2 诱导时间的优化 |
| 3.4.3 诱导温度的优化 |
| 3.5 重组蛋白的纯化 |
| 3.6 重组蛋白的免疫印迹 |
| 3.7 Bs-FABP蛋白的免疫荧光定位 |
| 3.8 间接ELISA结果 |
| 3.8.1 抗原与血清最佳工作浓度的确定 |
| 3.8.2 酶标二抗最佳稀释度的确定 |
| 3.8.3 封闭液的选择 |
| 3.8.4 间接ELISA阴阳性判断标准的确定 |
| 3.8.5 重复性检测结果 |
| 3.8.6 间接ELISA方法的敏感性和特异性 |
| 3.9 小鼠血清间接ELISA结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 Bs-FABP基因生物信息学分析 |
| 4.2 Bs-FABP的表达与免疫印迹 |
| 4.3 Bs-FABP的荧光免疫 |
| 4.4 Bs-FABP间接ELISA |
| 第二章 西氏贝蛔虫半乳糖凝集素基因的原核表达及重组蛋白诊断价值的初步评价 |
| 1 材料与试剂 |
| 1.1 试验动物 |
| 1.2 虫体及血清样品 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 1.5 常用缓冲溶液和培养基的配制 |
| 1.6 主要生物信息数据库和计算机软件 |
| 2 方法 |
| 2.1 西氏贝虫总RNA的提取 |
| 2.2 第一链cDNA的合成 |
| 2.3 Bs-GAL基因的扩增 |
| 2.4 PCR产物的回收 |
| 2.5 Bs-GAL基因鉴定及转化 |
| 2.6 重组Bs-FABP在大肠杆菌中的表达 |
| 2.7 重组蛋白的纯化 |
| 2.8 重组蛋白免疫原性分析 |
| 2.9 免疫荧光定位 |
| 2.10 间接ELISA方法的建立 |
| 2.10.1 间接ELISA操作步骤 |
| 2.10.2 确定最佳条件 |
| 2.10.3 临界值的确定 |
| 2.10.4 批内重复性试验 |
| 2.10.5 批间重复性试验 |
| 2.10.6 敏感性试验 |
| 2.10.7 特异性试验 |
| 2.11 小鼠间接ELISA方法 |
| 2.11.1 感染性西氏贝蛔虫卵的培养 |
| 2.11.2 小鼠攻虫试验 |
| 2.11.3 临界值的确定 |
| 2.11.4 敏感性试验 |
| 3 结果 |
| 3.1 Bs-GAL基因的克隆 |
| 3.1.1 Bs-GAL基因的PCR扩增 |
| 3.1.2 重组克隆质粒PCR鉴定 |
| 3.1.3 重组克隆质粒序列鉴定 |
| 3.2 Bs-GAL基因的生物信息学分析 |
| 3.2.1 Bs-GAL基因的序列分析 |
| 3.2.3 Bs-GAL信号肽及跨膜区预测 |
| 3.2.4 Bs-GAL亲/疏水性预测 |
| 3.2.5 Bs-GAL蛋白的氨基酸序列同源性分析及分子进化树构建 |
| 3.2.6 Bs-GAL蛋白的二级和三级结构预测 |
| 3.3 重组pET32a(+)-Bs-GAL的表达 |
| 3.4 表达条件优化 |
| 3.4.1 IPTG浓度的优化 |
| 3.4.2 诱导时间的优化 |
| 3.4.3 诱导温度的优化 |
| 3.5 重组蛋白的纯化 |
| 3.6 重组蛋白的免疫印迹 |
| 3.7 Bs-GAL蛋白的免疫荧光定位 |
| 3.8 间接ELISA结果 |
| 3.8.1 抗原与血清最佳工作浓度的确定 |
| 3.8.2 酶标二抗最佳稀释度的确定 |
| 3.8.3 封闭液的选择 |
| 3.8.4 间接ELISA阴阳性判断标准的确定 |
| 3.8.5 重复性检测结果 |
| 3.8.6 间接ELISA方法的敏感性和特异性 |
| 3.9 小鼠血清间接ELISA结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 Bs-GAL基因生物信息学分析 |
| 4.2 Bs-GAL表达和间接免疫荧光定位 |
| 4.3 Bs-GAL间接ELISA |
| 第三部分 结论与创新点 |
| 1. 结论 |
| 2. 创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
（3）郑州春秋时代墓葬中的寄生虫（论文提纲范文）
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料与背景 |
| 2.2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 分析与讨论 |
| 4.1 实验结果分析 |
| 4.2 古虫卵的保存 |
| 4.2.1 埋藏环境 |
| 4.2.2 蛔虫卵结构特征 |
| 4.3 古寄生虫病的流行 |
| 4.3.1 社会因素 |
| 4.3.2 自然因素 |
| 4.3.3 蛔虫生活史及其他因素 |
| 5 结论 |
| 5.1 古代寄生虫病的流行 |
| 5.2 墓葬腹土寄生虫考古的实验方法 |
| 5.3 古气候环境 |
| 5.4 人口流动和社会卫生环境等 |
（4）东北虎狮弓蛔虫感染的综合防制及曼氏迭宫绦虫的形态学观测（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 1. 综述 |
| 1.1 极危级的东北虎 |
| 1.2 圈养东北虎寄生虫感染的研究概况 |
| 1.3 东北虎狮弓蛔虫感染综合防制研究现状 |
| 1.4 曼氏迭宫绦虫的研究现状 |
| 1.5 本项研究的立题依据、目的和意义 |
| 2. 材料和方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.2 所用主要器材和药品 |
| 2.3 东北虎狮弓蛔虫感染的综合防制 |
| 2.3.1 合理处理粪便 |
| 2.3.2 药物驱虫 |
| 2.3.3 药物种类、服用剂量及其变化和虎体重的估算 |
| 2.3.4 平时消毒与定期消毒相结合 |
| 2.3.5 烧荒法、翻土法及覆盖法 |
| 2.3.6 综合防制效果的检查 |
| 2.4 东北虎曼氏迭宫绦虫形态结构观测 |
| 2.4.1 虫体测量 |
| 2.4.2 虫体固定 |
| 2.4.3 解剖镜下观测虫体 |
| 2.4.4 虫体压片染色标本的制备及观测和摄像 |
| 2.4.5 虫体成节和孕节组织切片标本的制备、观测和摄像 |
| 2.4.6 子宫内虫卵光学显微镜、扫描电镜下的观测及摄像 |
| 2.4.7 扫描电镜样品的制备、观测及摄像 |
| 3. 结果和分析 |
| 3.1 东北虎狮弓蛔虫综合防制实施结果 |
| 3.1.1 驱虫前对虎的临床观察结果 |
| 3.1.2 驱虫前东北虎狮弓蛔虫虫卵检测结果 |
| 3.1.3 驱虫试验结果 |
| 3.1.4 重复感染的检测结果 |
| 3.1.5 综合防制后的检测结果 |
| 3.1.6 虫体颜色新发现 |
| 3.2 曼氏迭宫绦虫形态观测结果 |
| 3.2.1 宏观观测结果 |
| 3.2.2 用光学显微镜对玻片染色标本的观察结果 |
| 3.2.3 扫描电子显微镜的观察结果 |
| 3.2.4 虫体组织切片光镜观测结果 |
| 3.2.5 曼氏迭宫绦虫与阔节裂头绦虫的比较 |
| 4. 结果与讨论 |
| 4.1 东北虎狮弓蛔虫感染综合防制的结论与讨论 |
| 4.2 东北虎曼氏迭宫绦虫形态观测的结果与讨论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（5）战国楚墓古尸体内寄生虫卵的扫描电镜观察（论文提纲范文）
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
（6）二甲亚砜（DMSO）冷冻断裂猪蛔虫卵的扫描电镜观察（论文提纲范文）
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
四、蛔虫卵的发生与卵壳形成（论文参考文献）
- [1]海南地方猪蛔虫病调查、抗药性检测、抗蠕虫药杀卵试验及与宿主互作生化机制的初步研究[D]. 赵建国. 海南大学, 2019(06)
- [2]西氏贝蛔虫FABP基因和GAL基因的原核表达及重组蛋白诊断价值的初步评价[D]. 孙颖. 四川农业大学, 2017(01)
- [3]郑州春秋时代墓葬中的寄生虫[J]. 魏元一,翁屹,张居中,樊温泉,信应君. 人类学学报, 2012(04)
- [4]东北虎狮弓蛔虫感染的综合防制及曼氏迭宫绦虫的形态学观测[D]. 赵广英. 东北林业大学, 2002(02)
- [5]战国楚墓古尸体内寄生虫卵的扫描电镜观察[J]. 苏天成,陈孝龄,廖荣中. 动物学报, 1986(03)
- [6]二甲亚砜（DMSO）冷冻断裂猪蛔虫卵的扫描电镜观察[J]. 孟宪钦,王松山,周文琴,王伯霞,应国华,李向印,赵玉珍. 动物学研究, 1982(S2)
- [7]蛔虫卵的发生与卵壳形成[J]. 孟宪钦,王松山,周文琴,王伯霞,应国华,李向印,张玉英,王亚飞. 动物学研究, 1982(S1)
- [8]蛔虫卵的发生与卵壳形成[J]. 孟宪钦,王松山,周文琴,王伯霞,应国华,李向印,张玉英,王亚飞. 河北医学院学报, 1982(03)