一、分子印迹技术在药物分离中的应用(论文文献综述)
刘显银,邱模昌[1](2021)在《基于分子印迹技术的中药成分绿色分离研究进展》文中认为分子印迹聚合物(MIPs)是含有与待分离目标化合物结构相同或相似空腔的主客体复合物,具有对目标化合物选择性识别、特异性结合、高效率富集等特点。与传统的提取分离技术相比,MIPs制备工艺简单、提取分离快速并可重复使用。根据制备原理不同,MIPs的制备方法包括本体聚合法、悬浮聚合法、乳液聚合法、沉淀聚合法、溶胶-凝胶法、表面分子印迹等方法等。随着分子印迹技术与化学合成及现代分析检测等多学科交叉技术的不断发展,MIPs在中药有效成分分离与筛选、有毒成分去除及代谢成分的分离等领域有良好的应用前景和研究价值。
黄徐胜[2](2021)在《分子印迹固相萃取分离纯化白果内酯及抗抑郁作用研究》文中研究说明白果内酯(Bilobalide,BB)是药食同源银杏中的特有成分之一,具有保护神经系统、降血压、抗疲劳等作用,其抗抑郁活性研究报道较少;制备高纯度BB,可用于其抗抑郁活性研究,提高保健、治疗等方面的应用价值;关于BB的分离纯化方法报道较多,但都存在一定不足,目前关于BB分离纯化的高选择性和高分离效率是研究热点。本研究以BB为模板分子,基于计算机模拟技术的理论指导,通过本体聚合方法制备白果内酯分子印迹聚合物(BBMIPs),对BBMIPs进行了系统的表征并从多方面考察了BBMIPs的吸附性能;以多壁碳纳米管和金属有机框架复合材料(MWCNTs/ZIF-67)为基质,通过表面分子印迹技术(SMIT)在基材表面成功接枝聚合物,从而改善聚合物对BB的选择性和吸附量;将两种方法制备的聚合物分别作为吸附剂,采用分子印迹固相萃取技术(MISPE)从实际样品中分离纯化BB;同时以慢性不可预见性温和刺激(CUMS)法构建小鼠抑郁模型,初步探讨BB对小鼠抑郁行为的减缓作用。主要研究结果或结论汇总如下:(1)以高斯软件模拟技术获得较佳功能单体甲基丙烯酰胺(MAM);单因素实验优化制备工艺:MAM为功能单体,三羟甲基丙烷三丙烯酸酯(TMPTA)为交联剂,乙腈为溶剂,BB:MAM:TMPTA=1:4:15(摩尔比);FTIR,SEM,TGA等分析手段表明聚合物的成功制备;BBMIPs的平衡吸附浓度为0.6 mg/m L,吸附时间为5 h,其静态吸附和动态吸附行为分别符合Langmuir等温吸附模型和准二级动力学模型;BBMIPs对BB的印迹因子达到1.95,选择性较好;BBMIPs重复使用5次后仍保持较高回收率,约74.3%。(2)以MWCNTs/ZIF-67复合材料为载体制备新型聚合物MWCNTs/ZIF-67@MIPs;工艺优化结果:MAM和4-乙烯基苯甲酸(4-VBA)为双功能单体,乙腈与1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([BMIM]BF4)为混合溶剂,TMPTA为交联剂,模板、功能单体及交联剂的摩尔比为1:4:20;SEM、FTIR、XRD、TGA等表征手段表明聚合物被成功接枝,MWCNTs/ZIF-67@MIPs的平衡吸附浓度和时间分别为0.8 mg/m L和4 h,其静态吸附和动态吸附行为分别符合Freundlich等温吸附模型和准二级动力学模型,聚合物对BB的印迹因子达到2.83,相比BBMIPs,MWCNTs/ZIF-67@MIPs的特异性与吸附量均有显着提高。(3)优化MISPE萃取条件,将两种聚合物分别作为固相萃取柱的吸附剂对实际样品中BB进行分离纯化,实验结果表明在银杏叶提取物和BB粗提物中,MWCNTs/ZIF-67@MIPs对BB的分离作用要优于BBMIPs。(4)采取CUMS法构造小鼠抑郁模型,探究BB对抑郁行为的减缓作用;行为学指标、脑内单胺递质含量变化等实验结果表明抑郁模型被成功构造,且当BB的给药剂量为14mg/kg时可显着减缓小鼠的抑郁行为。
陈子龙[3](2020)在《磁性表面虚拟模板分子印迹聚合物的合成及其对窄叶鲜卑花单萜类成分分离富集的研究》文中研究指明窄叶鲜卑花是藏族民间的常用药物,现代药理学研究表明,窄叶鲜卑花具有降血脂、降血糖、抗氧化、抗肿瘤、调节免疫系统和抗肝损伤等多种功效,其中萜类成分是其降脂作用的主要活性成分。本文基于表面分子印迹技术,结合虚拟模板分子,成功制备具有核-壳结构的磁性表面功能化虚拟模板分子印迹聚合物,并进行一系列结构表征和相关吸附实验,从窄叶鲜卑花粗提物中成功分离富集目标化合物。本文主要研究内容和结论如下:(1)目标化合物Sibiskoside的分离及鉴定:采用连续热回流乙醇溶液提取法、系统溶剂分离法、正相硅胶柱色谱、ODS反相柱色谱和制备液相色谱等分离纯化方法以及核磁和质谱技术,从窄叶鲜卑花地上部分的95%乙醇粗提物中,分离并鉴定得到目标化合物Sibiskoside1.1 g,纯度达到92.21%。(2)磁性表面功能化虚拟模板分子印迹聚合物(DMIPs)的制备:采用水热法合成磁性Fe3O4纳米颗粒,进一步接枝改性后合成具有超顺磁性的Fe3O4@Si O2@C=C微球,并以此为载体,京尼平苷为虚拟模板分子,4-VP为功能单体,EGDMA为交联剂,AIBN为引发剂,在乙腈溶液中合成DMIPs。(3)聚合物材料的结构表征:采用SEM、FT-IR、接触角、TGA、VSM和XRD等方法,对磁性纳米材料和印迹材料进行一系列表征测试,分析聚合物材料的表面形貌、粒径大小、官能团结构、亲水性、热稳定性、磁饱和强度及晶型稳定性,证明在聚合反应过程中,成功制备得到Fe3O4纳米颗粒、Fe3O4@Si O2微球、Fe3O4@Si O2@C=C微球、DMIPs和DNIPs,并且都具有较好的尺寸大小、规则球形和超顺磁性,印迹材料的热稳定性良好,DMIPs还表现出较好的晶型稳定性。(4)印迹过程提取条件的优化:对磁性表面功能化虚拟模板分子印迹聚合物在印迹吸附过程中的提取条件进行优化,包括温度、p H值和溶剂环境。实验结果表明,当温度为35℃、p H值为弱碱性、溶剂为甲醇时,DMIPs对目标化合物Sibiskoside具有最佳的吸附效果。(5)吸附性能实验和机理的研究:吸附动力学实验和模型研究结果表明,印迹吸附材料在40 min左右可以达到吸附平衡,与DNIPs相比,DMIPs对目标化合物Sibiskoside的吸附速度更快,二级动力学模型对印迹材料的吸附过程具有更高的拟合相关系数,因此占主导地位。等温吸附实验和模型研究表明,DMIPs对Sibiskoside的最大吸附量能达到14.67 mg/g,Freundlich模型的拟合结果更贴近印迹材料的吸附过程,说明吸附过程较容易进行,印迹吸附材料以表面不均匀、多分子层吸附为主。选择性吸附实验表明,与竞争性化合物穿心莲内酯、虎杖苷、熊果苷、咖啡酸、新橙皮苷二氢查耳酮和槲皮素相比,DMIPs的印迹因子最高,达到2.08,选择性分离系数分别为1.73、1.23、1.50、1.49,3.73和8.91,说明DMIPs对Sibiskoside有较好的选择性识别能力。DMIPs的重复利用性较好,在实际应用中,DMIPs对Sibiskoside的吸附要高于对窄叶鲜卑花粗提物中其他组分的吸附,纯度达到78%,可以初步用于窄叶鲜卑花中单萜类成分的分离与纯化。
李在譞[4](2020)在《大分子拥挤试剂与低共熔溶剂的协同效应对毛细管电泳手性分离的研究》文中进行了进一步梳理佐匹克隆是手性药物,其右旋体可以有效治疗睡眠紊乱,目前光学纯的佐匹克隆在市场上具有很大的临床应用需求。因此,建立快速、简便、有效的对映体分离方法,具有重要的理论和现实意义。本课题的目标是发展新型毛细管电泳法(CE)对佐匹克隆对映体进行拆分。我们在传统β-环糊精分离体系中添加大分子拥挤试剂葡聚糖(Dextran),结果显示,葡聚糖的引入可以提高分离体系的分离效率,缩短分离时间。当葡聚糖浓度为5.8 mg/mL时,佐匹克隆对映体分离度由1.66提高至3.26,柱效可达到 61,200 plates/m。胆碱类低共熔溶剂是绿色溶剂的代表,由于其具有制备过程简易、毒性低、可回收、对环境友好等特点,在各研究领域中展现出卓越的性能。因此,本实验在β-环糊精分离体系中添加胆碱类低共熔溶剂,以期优化传统拆分体系。在实验中,我们考察了低共熔溶剂(DESs)对拆分体系的影响,实验证明,氯化胆碱与乙二醇组成的DESs可以使柱效达到151,000 plates/m,使佐匹克隆对映体分离度达到4.86,分离体系的拆分性能大幅提升。我们进而考察了大分子拥挤试剂和低共熔溶剂的协同作用对β-环糊精分离体系手性拆分的影响。在实验中,我们考察了大分子拥挤试剂浓度以及低共熔溶剂成分、配比等因素对佐匹克隆对映体分离的影响。在葡聚糖浓度为0.25 mg/mL和0.5 mg/mL时,分别添加摩尔比为1:3的氯化胆碱与甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、乙二醇、丙二醇、丁二醇等溶剂组成的低共熔溶剂,由结果可知,选取乙二醇与氯化胆碱组成低共熔溶剂,佐匹克隆对映体分离度最高,分别达到5.19和5.06,柱效最高可达157,000 plates/m。在葡聚糖浓度以及低共熔溶剂种类固定的条件下,调整低共熔溶剂的摩尔比,考察摩尔比为1:2、1:3、1:4、1:5的氯化胆碱/乙二醇对拆分结果的影响。由实验结果可知,添加浓度为0.25 mg/mL的葡聚糖、摩尔比为1:4的氯化胆碱/乙二醇时,柱效达到234,000 plates/m,分离度为5.48,达到最佳拆分条件。总之,我们将生命科学领域的热门研究课题“大分子拥挤环境”概念引进到毛细管电泳领域,发现“大分子体积排斥效应”明显改进β-环糊精分离体系手性拆分,大分子拥挤试剂与新型绿色溶剂低共熔溶剂的协同效应能进一步改进手性分离。
李玲[5](2020)在《分子印迹聚合法制备辛弗林纯度标准物质及其手性分离研究》文中认为辛弗林(Synephrine)是柑橘中主要功能成分之一,具有抗氧化、抑菌、收缩血管、升高血压等多种作用,自2004美国颁布了禁止在膳食补充剂中添加麻黄碱的规定后,辛弗林由于结构和药理活性与麻黄碱相似,不仅作为麻黄碱的替代品被广泛应用于医药、食品、饮料、饲料和化妆品等行业中。本研究首先进行了辛弗林分子印迹聚合物的合成,然后利用合成的印迹聚合物对枳实中的辛弗林进行了提取和纯化,制备得到辛弗林纯度标准物质,最后对纯化出的辛弗林纯度标准物质进行手性拆分,为辛弗林的提取、纯化以及手性分离提供了新的方法和思路。以辛弗林为模板分子,丙烯酸和丙烯酸羟乙酯为双功能单体,偶氮二异丁腈作为引发剂,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,通过沉淀聚合法制备辛弗林分子印迹聚合物,用静态吸附法探究不同模板分子、功能单体、引发剂比例条件下辛弗林分子印迹聚合物的特异性吸附能力,通过扫描电子显微镜对制备的印迹聚合材料进行表征,利用合成的分子印迹聚合物作为固相萃取填料,对枳实中的辛弗林进行萃取。以辛弗林提取率为参考条件,优化了淋洗液和洗脱液的种类和比例,得到了制备辛弗林分子印迹聚合物的最佳条件。按照国家标准物质的制备方法对提取出的辛弗林进行纯度标准物质的研制。首先利用核磁共振氢谱法和红外光谱法对提取出的辛弗林进行初步定性,定性后通过反溶剂重结晶法对辛弗林标准物质候选物进一步纯化达到纯度为99.78%。辛弗林纯度标准物质的定值方法为质量平衡法和核磁定量法,采用卡尔费休库伦滴定法测定水分,无机元素的含量分别采用微波消解-电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-OES)和微波消解-电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定,有机挥发性杂质含量的测定方法为顶空进样气相色谱法。然后利用高效液相色谱法进行辛弗林纯度标准物质的均匀性和稳定性检验,最后对辛弗林纯度标准物质研制过程中引入的不确定度进行计算。制备的辛弗林纯度标准物质为外消旋体,没有旋光度,由于辛弗林左旋和右旋体具有不同的生理和药理活性,所以本研究利用高效液相色谱法对辛弗林消旋体进行手性分离研究,探讨了手性柱类型、流动相种类和比例、柱温和流速对辛弗林对映体分离的影响。本研究的主要成果:1.以辛弗林为模板分子,丙烯酸和丙烯酸羟乙酯为双功能单体,偶氮二异丁腈作为引发剂,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,通过沉淀聚合法制备辛弗林分子印迹聚合物。实验结果表明在10 mL乙腈中,当模板分子与功能单体、引发剂、交联剂的物质的量比为1∶4∶2:20时,聚合物形貌和特异识别性良好,且吸附效果最佳,最大吸附量为228.82μmol/g。利用分子印迹固相萃取技术(MISPE)对枳实粗粉中的辛弗林进行提取和纯化,乙腈:乙酸乙酯=6:4(V/V)为淋洗液,甲醇:乙酸=8:2(V/V)为洗脱剂,辛弗林提取物中辛弗林的质量分数由1.93%提高到93.34%,提取率为73.90%。2.利用反溶剂重结晶法对提取出的辛弗林进一步纯化,辛弗林纯度从93.34%提高到99.78%,提取率为73.84%。基于探究出来的纯化方法,制备得到了一批高纯度的辛弗林纯度标准物质。先后采用红外光谱法和核磁定性氢谱法进行辛弗林的定性研究,通过定量核磁法和质量平衡法对辛弗林纯度标准物质进行定值,在定值过程中对检测波长,色谱柱,样品浓度,流动相比例等影响因素进行了优化,建立了辛弗林高效液相色谱法定量分析检测方法。使用高效液相色谱法对辛弗林进行检测的最佳分析条件为:色谱柱:Waters SCX柱子(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈:水(含50 mmol磷酸二氢钾)=10:90;流速:1 mL/min;柱温:25℃;进样量:10μL;检测波长:275 nm,等度洗脱。实验结果:测得辛弗林纯度标准物质中主成分含量为99.78%,水分含量0.2501,有机挥发性杂质含量0.015%,无机杂质含量0.0302%,质量平衡法定值结果为99.53%。核磁定量定值结果为99.52%,所以辛弗林纯度标准物质最终定值结果为99.52%,容量因子k为2时的扩展不确定度为0.32%,在六个月内均匀性和稳定性良好。制备的辛弗林符合我国标准物质的相关要求,已申报国家二级标准物质。3.利用高效液相色谱法对辛弗林外消旋体进行分离,筛选出最适合辛弗林消旋体分离的手性柱是Chiralpak ZWIX(+),在此基础上考察了流动相组成、柱温、流速等因素对拆分效果的影响,得到了最优分离条件:流动相为2氨基-1-丁醇:四氢呋喃:甲醇:水=0.1:49:49:2(体积比),流速为0.5 mL/min,柱温为25℃,检测波长为275 nm,在该条件下得到的辛弗林对映异构的分离度为4.41。该法操作简便、快捷、分离度高,是辛弗林消旋体拆分的首选方法。
朱亚伟[6](2020)在《多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合物的制备、表征及初步应用研究》文中研究说明本研究以脱脂棉为原料制备多孔纤维素微球,经硅烷化改性后接枝分子印迹聚合物,制备了多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合材料并进行了系统表征,获得了制备400μm硅烷化多孔纤维素微球和该印迹材料的制备方法。在初步的应用研究中,优化了印迹材料的吸附条件,研究了该印迹材料的选择性吸附和循环使用性能,最后将该印迹材料用于从槐米萃取物中进行靶向分离槲皮素,纯化后的槲皮素纯度为68.79%,较常规溶剂提取法提高4.37倍。本研究制备的多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合物克服了传统分子印迹聚合材料粒径过小,难于分离的问题,解决了天然产物选择性提取分离中有机试剂消耗量大,耗能较高,操作较繁琐的缺点,达到了利用多孔纤维素基分子印迹聚合物对天然产物选择性靶向分离的目的。本研究的主要研究内容及研究结果如下:1.优化了硅烷化多孔纤维素微球的制备方法本研究以脱脂棉为原料进行碱化、老化、磺化后采用反相悬浮技术同时结合热熔胶转化法制备得到了多孔纤维素微球,然后经0.1 mol/L稀盐酸致孔后,在60℃下采用硅烷化试剂进行改性修饰,得到粒径为400 μm的硅烷化多孔纤维素微球载体,红外图谱中可见硅烷化试剂的特征峰,扫描电镜图中可见硅烷化修饰后的多孔纤维素微球表面变得更加粗糙,微孔直径变小。经研究得到的400 μm纤维素微球的优化条件为:表面活性剂用量:0.05 g/g CM变压器油用量:50mL/g CM搅拌速度:560 r/min反应温度:80℃反应时间:3h在优化条件下,纤维素微球的百分产率为78.7%,其形貌规整,粒度均匀。纤维素微球经0.1 mol/L的盐酸致孔后采用过量的3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷在冰醋酸的乙醇水溶液中进行改性。最终得到的硅烷化多孔纤维素微球,红外可见硅烷化试剂的特征性基团,微孔结构明显,而且该载体可以使稀KMnO4溶液褪色,生成褐色沉淀。2.获得了多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合物的制备方法本研究以硅烷化多孔纤维素为载体,以槲皮素为模板,以4-乙烯基吡啶为功能单体,以乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,以偶氮二异丁腈为引发剂,结合传无载体分子印迹聚合物的制备方法,制得了高吸附容量的多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合材料。并对该印迹材料进行了系统表征,红外表征中聚合物的特征峰明显,扫描电镜可见微孔内部接枝大量印迹聚合物微球,热重分析显示该印迹材料热稳定想良好,X射线衍射表明接枝分子印迹聚合物后纤维素仍保持纤维素Ⅱ的晶型结构。制备多孔纤维素微球的优化条件为:功能单体:4-乙烯基吡啶乙二醇二甲基丙烯酸酯用量:396.44 mg硅烷化多孔纤维素微球/乙二醇二甲基丙烯酸酯=3/4(W/W)聚合溶剂:乙腈/N,N-二甲基甲酰胺=20/1(V/V)聚合温度:60℃洗脱剂:15%乙酸甲醇溶液超声洗脱时间:15 min在此优化条件下制备的多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合物的印迹因子为1.96,吸附容量为11.73-12.25 mg/g。该制备方法稳定可靠,制得的印迹材料形貌规整,特征明显,热稳定性良好。3.完成了多孔纤维素基槲皮素分子印迹材料的初步应用研究本研究对多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合材料的吸附条件,选择性吸附能力,循环吸附性能,以及对印迹材料从真实样品中靶向分离槲皮素的能力进行了研究。在浓度为0.5 mg/mL的槲皮素溶液中,通过单因素优化对吸附条件进行了优化,优化条件如下:吸附方法:洗脱摇床晃动混匀(30 r/min)吸附溶剂:乙腈/N,N-二甲基甲酰胺=20/1(V/V)吸附温度:15℃时间:8h在优化条件下测得多孔纤维素基槲皮素分子印迹材料对槲皮素的吸附容量为13.19 mg/g。在选择性吸附实验中该印迹材料对槲皮素选择性吸附良好,对槲皮素的吸附容量是柚皮素的3.63倍;该印迹材料进行4次循环吸附后其吸附性能仍可保留83.05%,解吸附率为98.6%。在从槐米中靶向分离槲皮素研究中,使用该印迹聚合材料分离得到的槲皮素纯度为68.79%,较常规溶剂提取法提高了 4.37倍。综上所述,本研究成功制备了多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合材料,用于从天然产物中靶向分离槲皮素,同时获得了硅烷化多孔纤维素微球载体和多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合物的制备方法,建立了该印迹材料吸附槲皮素的最佳条件,然后对其选择性吸附性能、循环使用性能研究,最终将该印记材料应用于从真实样品靶向分离槲皮素,获得极好的效果。本研究制备的多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合材料具有选择性吸附性能好、易回收、可循环使用的优势,为天然产物的靶向分离开拓了新材料,为生物基靶向分离材料在药学领域中的应用提供了研究基础。
孙红,陈素娥,赵龙山[7](2019)在《分子印迹技术在手性药物分离中的研究进展》文中指出分子印迹技术是一种在高度交联且具有一定刚性的聚合物母体中引入待分离分子特异性结合位点的新型分离技术。这种聚合物对特定的化合物具有高度选择性与亲和力,因此,分子印迹技术在药物分析尤其是手性药物分离中的应用发展极为迅速。本文介绍了分子印迹技术的基本原理,又从分子印迹聚合物的制备方法及不同制备方法的特点,综述了分子印迹技术在在手性药物分离中的最新研究进展,以期为分子印迹技术在手性药物分离中的应用提供一定的参考,并对分子印迹技术在手性药物分离中的发展趋势进行了展望。
安晓娇[8](2019)在《中药水提液杂质絮凝机理及模拟研究》文中研究表明絮凝技术在中药水提液除杂纯化中具有重要的应用价值,但由于中药液种类繁多、成分复杂,药液中杂质与絮凝剂的相互作用及絮凝机理尚不明确,导致杂质絮凝效果和絮凝效率难以大幅提高。本文针对中药水提液中的淀粉和鞣酸杂质进行絮凝实验和量子化学模拟研究,从分子层面揭示杂质絮凝发生的推动力、杂质和絮凝剂相互作用的活性点位以及不同官能团对絮凝相互作用的贡献,为提高中药水提液絮凝除杂效率和开发新型高效絮凝剂提供理论和实践指导。在杂质絮凝实验方面,分别研究了三种不同电荷密度的聚丙烯酰胺絮凝淀粉以及三种壳聚糖及其衍生物絮凝鞣酸的效果,考察了絮凝剂类型、用量和电荷密度等因素对絮凝效果的影响并确定了最佳工艺条件。通过对絮凝剂、杂质及絮体性质表征,分析了两种杂质的絮凝机理。研究结果表明,合适的电荷密度有助于得到较好的絮凝效果,淀粉和鞣酸的分子结构在絮体中未发生改变,氢键、电中和与架桥作用是杂质絮凝的主要推动力,絮体中氢键作用越强,絮凝效果越好。在杂质絮凝模拟方面,分别建立了淀粉与非离子型和阳离子型聚丙烯酰胺以及鞣酸与壳聚糖、质子化壳聚糖和羟丙基化壳聚糖五种絮凝模拟体系。利用分子动力学退火模拟、半经验方法和密度泛函理论对各絮凝体系进行了模拟计算。通过热力学参数和絮体复合物构型分析,发现范德华力(含诱导、色散等)和氢键作用是絮体形成的主要推动力。絮体复合物几何构型的Boltzmann分布表明,絮体以一种最稳定复合物结构为主多种复合物共存的形式存在。通过对杂质和絮凝剂进行分子范德华表面定量分析,给出了各分子表面静电势大小和极值点分布情况。淀粉二聚体分子静电势极小值点主要集中于氧原子附近,静电势极大值点主要在羟基中氢原子附近,各羟基静电活性不同。非离子型聚丙烯酰胺五聚体的静电势极值点随其分子结构呈现周期性变化,酰胺基CONH2是静电活性点位,该基团中氧原子的亲核活性大于氮原子,靠近氧原子一侧的氢原子比另一侧的氢原子静电势更小。阳离子聚丙烯酰胺五聚体分子表面正静电势区域面积占总分子表面积的89.9%,静电势极大值较非离子型聚丙烯酰胺明显提高。鞣酸单体分子中三个羟基的氢原子静电活性不同,静电势最大值在C5-OH的H15附近,最小值出现在羰基中的氧原子附近。壳聚糖二聚体分子上羟基静电活性比氨基大。质子化壳聚糖二聚体中,静电势正值区域面积约占分子范德华表面的99.5%。羟丙基壳聚糖二聚体静电势极值分布与壳聚糖二聚体静电势分布相似,但增加了活性羟基基团。对五个絮凝体系中絮体复合物构型以及最稳定絮体复合物的约化密度梯度函数(RDG)和独立密度梯度模型(IGM)分析结果表明,杂质和絮凝剂分子上多个静电势极值点参与了絮体复合物的形成,淀粉与聚丙烯酰胺类絮凝剂相互作用以氢键、范德华和位阻作用为主,鞣酸与壳聚糖类絮凝剂作用以氢键、T型π-π、范德华和位阻为主。絮体复合物内杂质与絮凝剂分子间相互作用贡献较大的原子和原子对均不同程度参与了分子间氢键和范德华作用,其中氢键数量越多、强度越大,越有利于形成最稳定的絮体复合物。对上述五种絮凝体系中最稳态絮体复合物进行了对称适配微扰理论(SAPT)能量分解,杂质与絮凝剂之间的相互作用可解构为静电作用、交换互斥作用、诱导作用和色散作用,其中,静电作用是最主要的相互作用,在总吸引能中占比依次为53.21、49.58、52.77、54.48和57.50%。诱导和色散作用也是不可忽略的重要组成部分。
高璇[9](2019)在《石杉碱甲分子印迹水凝胶微球的制备及药物释放行为研究》文中研究表明石杉碱甲(Huperzine A)是一种高效、高选择性的中枢乙酰胆碱酯酶(acetycholinesterase,AChE)抑制剂,是目前治疗老年痴呆症(又称阿尔茨海默病,AD)具有较好前景的药物。此外,HupA对血管性痴呆(VD)及智力低下、缺血性卒中等疾病也具有一定的疗效。目前上市的石杉碱甲剂型主要为口服或注射的普通制剂,总体临床安全性良好,但是20%~30%的患者服用石杉碱甲后会出现轻中度的胃肠道反应。为了降低副作用对患者的影响,剂型改良已成为热门的研究方向。近年来,分子印迹技术发展迅速,分子印迹聚合物具有特异性识别及专一性选择的特点,在许多领域得到了很大的发展,同时也为剂型改良提供了一种新的研究思路。运用该技术结合水凝胶良好生物相容性的特点,制备适合口服的分子印迹水凝胶微球药物载体,该剂型可提高载药量,增强药物的缓释性。论文基于以上理论做如下研究:第一章:水凝胶微球的制备及性能研究。以羟丙基甲基纤维素(HPMC)为原料,二乙烯基砜(DVS)为交联剂,采用反相悬浮聚合法制备水凝胶微球。采用透射电子显微镜及纳米粒度仪对微球的粒径、形态进行表征。采用超滤离心法收集载药微球,透析袋法考察体外释放度。结果表明,制备的水凝胶微球粒径分布较均匀,分散性较好,载药量为3.66%。石杉碱甲水凝胶微球能够缓释石杉碱甲约6 h,具有一定的缓释作用。第二章:石杉碱甲分子印迹水凝胶微球的制备及性能研究。以HupA为模板分子,HPMC为功能单体,四甲基乙二胺(TEMED)为催化剂,DVS为交联剂,采用反向悬浮聚合法制备石杉碱甲分子印迹水凝胶微球。采用透射电子显微镜及纳米粒度仪考察其表征;采用紫外分光光度计及红外光谱仪研究其识别机理;考察催化剂种类、模板分子与功能单体比例。测定吸附性能、载药量,对其体外释放行为进行研究。结果表明,制备的石杉碱甲分子印迹聚合物粒径分布较均匀,分散性好。模板分子与功能单体主要通过氢键作用力形成分子印迹聚合物。分子印迹聚合物对石杉碱甲的选择吸附性明显高于苍术素。载药量能达到7.95%。石杉碱甲印迹聚合物能够缓释石杉碱甲约8 h。相比水凝胶微球,分子印迹水凝胶微球载药量更高,对石杉碱甲的缓释效果更好。第三章:分子印迹水凝胶微球药代动力学研究。建立大鼠体内血药浓度的LC-MS测定方法。色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为甲醇-1mmol/L醋酸铵(65:35),以石杉碱乙为内标,定量分析离子为m/z 243.20(石杉碱甲)和m/z 257.50(石杉碱乙),石杉碱甲与内标分离度好,内源性物质不干扰测定,血浆样品的线性范围是5~500μg/L,定量限为0.37μg/L,提取回收率范围为93.82%~94.48%,日内日间精密度RSD小于1.96%,基质效应范围为93.60%~96.77%,样品在24h内稳定。该方法可用于大鼠体内血药浓度测定。样品测定结果显示,分子印迹聚合物及水凝胶微球对石杉碱甲均具有缓释作用,且分子印迹聚合物缓释效果更好。
范浩然[10](2019)在《选择性分离不同结构环糊精的分子印迹聚合物合成、表征及应用研究》文中研究表明本文对基于分子印迹技术分离纯化不同结构环糊精进行了研究。目前,母体环糊精和分支环糊精多为酶法生产,该方法不仅得到的产物复杂,而且从酶转化产物中分离纯化单一环糊精的工艺复杂且耗时,因此大大增加了母体环糊精及分支环糊精的生产成本。分子印迹聚合物是一种新型的、高效的分子识别材料,分子印迹聚合物具有构效预定性和识别专一性等特点,且具有生产成本低、生产工艺简单、稳定性好、可重复利用等优点,在分离纯化、食品检测、固相萃取等领域具有良好的应用前景。本论文从分子印迹聚合物的设计出发,制备了具有不同结构的光响应型分子印迹聚合物,为实现分子印迹聚合物在母体环糊精及分支环糊精的分离纯化中的应用奠定了基础。论文的具体研究内容如下:1.以4-甲基丙烯酰氧偶氮苯(MAA)为功能单体,分支环糊精6-O-α-D-麦芽糖基-β-环糊精(Mal-β-CD)为模板分子,以偶氮二异腈(AIBN)为引发剂,以二甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDMA)为交联剂,制备光响应型分子印迹聚合物(PMIPs)。对功能单体的光响应特性进行了研究,同时采用扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)和热重分析仪对PMIPs的形貌、结构及稳定性等理化性质进行了表征,并对PMIPs分离得到的Mal-β-CD的安全性进行了评估。结果表明,功能单体具有较强的光学稳定性;制备的PMIPs颗粒呈现出球形结构,颗粒粒径为1.5~2μm。同时,通过选择性吸附实验、平衡吸附实验、动力学吸附实验、静态吸附实验和光控吸收与释放实验考察了 PMIPs对Mal-β-CD的吸附特性。结果表明,PMIPs对模板分子Mal-β-CD具有较好的识别性能和较高的吸附性能,结合位点的结合常数(Ka)和表观最大结合位点(Nmax)分别为1.72×104 M-1和7.93μmol/g,经PMIPs分离纯化得到的Mal-β-CD的纯度可达90.8%。通过亚急性和亚慢性试验结果可知,PMIPs分离得到的Mal-β-CD没有对实验动物引起毒理学作用。2.通过γ-(2,3-环氧丙氧基)丙基三甲氧基硅烷(GOTMS)对载体纳米二氧化硅进行表面修饰,制备二氧化硅核壳型光响应型表面分子印迹聚合物(PSMIPs)。用FTIR、SEM、TEM等仪器表征PSMIPs的形态和结构。结果表明,PSMIPs是规则的球形核壳结构,尽管表面粗糙不平,但分散性较好,颗粒直径约为0.8μm,二氧化硅表面的分子印迹聚合物厚度大约为35 nm。通过选择性吸附实验,比较了 PSMIPs对Mal-β-CD、β-CD、麦芽糖的选择吸附性能,同时通过计算分配系数和选择性系数,验证了 PSMIPs对Mal-β-CD具有较好的吸附选择性。通过静态吸附实验、平衡吸附实验和动力学吸附实验分析,PSMIPs在2 h内可以达到吸附平衡,吸附容量为72.8%;PSMIPs具有特异性结合位点和非特异性结合位点两种不同类型的结合位点。用高效液相色谱法(HPLC)检测PSMIPs对Mal-β-CD光控吸收与释放,其吸收率与释放率分别为100.0%和80.27%。3.通过改变模板分子、功能单体、交联剂和引发剂的添加量,制备了分子印迹聚合物厚度可控的PSMIPs。PSMIPs的分子印迹层厚度可调控在10 nm~60 nm范围内,此时,PSMIPs是单分散的纳米球,表面分子印迹聚合物包裹完整,PSMIPs的表面积为275.3~391.6 m2/g,平均孔径约为3.1~3.5 nm。同时,研究不同厚度分子印迹层对Mal-β-CD的吸附-脱附特性的影响。结果表明,PSMIPs对Mal-β-CD的吸附容量、脱附性质、吸附选择性和重复使用等性质与其分子印迹层厚度密切相关。PSMIPs的吸附行为较好的符合了 Langmuir等温吸附模型和拟二阶动力学模型。0.64 g改性二氧化硅纳米球,0.5 mmol Mal-β-CD,4.0 mmol EGDMA,0.16 g AIBN 聚合时,得到分子印迹层厚度约为30 nm,此时PSMIPs具有最大结合容量和释放容量。4.以二氧化硅为载体,结合表面印迹技术,制备了光响应型表面分子印迹材料,再利用20%HF溶液刻蚀去除二氧化硅载体,制备了光响应型中空核壳结构分子印迹聚合物(PHSMIPs)。比较了 PHSMIPs和PSMIPs的形态、结构和吸附性能。结果表明,PHSMIPs的平均直径约为480 nm,分子印迹层厚度约为40 nm。PHSMIPs的BET表面积、孔隙体积和平均孔隙直径分别为273.4 m2/g、0.333 cm3/g和4.3 nm。与SMIPs相比,PHSMIPs表现出较强的结合能力,更好的识别能力,更快的质量转移率,具有在复杂环境中分离纯化环糊精及分支环糊精的应用潜力。5.以α-CD和β-CD作为模板分子,添加不同摩尔比的α-CD和β-CD合成了双模板光响应型中空核壳结构分子印迹聚合物(DPHSMIPs),研究了 DPHSMIPs对α-CD和β-CD的选择性、吸附附能和脱附性能,并以酶法制备γ-CD的反应体系为研究对象,探究DPHSMIPs对y-CD纯化效果的实际应用。结果表明,不同摩尔比双模板制备的DPHSMIPs都具有较好的中空核壳结构,载体二氧化硅已被完全刻蚀去除。不同摩尔比双模板制备的DPHSMIPs的BET表面积、BJH孔的平均直径和孔体积数值之间没有显着差异。同时,不同摩尔比双模板制备的DPHSMIPs都对γ-CD几乎没有吸附性,当添加相同量的DPHSMIPs到γ-CD酶制液中时,摩尔比α-CD:β-CD=3:7制备的DPHSMIPs可以从发酵液中将α-CD和β-CD几乎完全吸附吸附出来,实现一步法去除发酵液中α-CD和β-CD。
二、分子印迹技术在药物分离中的应用(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、分子印迹技术在药物分离中的应用(论文提纲范文)
(1)基于分子印迹技术的中药成分绿色分离研究进展(论文提纲范文)
1 分子印迹技术概述 |
1.1 技术原理 |
1.2 常用材料 |
1.3 制备方法 |
2 在中药成分分离中的应用 |
2.1 有效成分的分离 |
2.2 有效成分的筛选 |
2.3 有毒成分的分离 |
2.4 代谢成分分离 |
3 展望 |
(2)分子印迹固相萃取分离纯化白果内酯及抗抑郁作用研究(论文提纲范文)
致谢 |
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 绪论 |
1.1 白果内酯概述 |
1.1.1 白果内酯的来源及活性作用 |
1.1.2 白果内酯提取分离研究现状 |
1.2 分子印迹技术 |
1.2.1 分子印迹技术简介 |
1.2.2 分子印迹技术的起源与发展 |
1.2.3 分子印迹技术的原理和分类 |
1.2.4 分子印迹技术的应用 |
1.2.5 分子印迹聚合物的制备影响因素 |
1.2.6 分子印迹聚合物的合成方法 |
1.2.7 表面分子印迹技术 |
1.3 碳纳米管@金属有机框架复合材料简介 |
1.3.1 碳纳米管概述 |
1.3.2 金属有机框架材料概述 |
1.3.3 碳纳米管 |
1.4 分子印迹固相萃取技术在分离天然活性成分中的应用 |
1.4.1 固相萃取技术 |
1.4.2 分子印迹固相萃取技术 |
1.4.3 分子印迹固相萃取技术的分离应用现状 |
1.5 本研究主要目的、具体内容 |
1.5.1 主要目的 |
1.5.2 具体内容 |
第二章 计算机模拟辅助白果内酯分子印迹聚合物制备 |
2.1 实验耗材及设备 |
2.1.1 主要原料与试剂 |
2.1.2 主要仪器 |
2.2 实验方法 |
2.2.1 高斯模拟初筛功能单体 |
2.2.2 BBMIPs的制备及工艺优化 |
2.2.3 BBMIPs表征 |
2.2.4 BBMIPs的静态与动态吸附研究 |
2.2.5 BBMIPs的选择性吸附研究 |
2.2.6 BBMIPs的重复吸附-解吸附研究 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 功能单体初筛结果 |
2.3.2 合成工艺优化结果 |
2.3.3 BBMIPs表征 |
2.3.4 BBMIPs的静态与动态吸附效果评价 |
2.3.5 BBMIPs的选择性与可重复性评价 |
2.4 本章总结 |
第三章 基于MWCNTs/ZIF-67复合材料为载体的新型印迹聚合物的制备 |
3.1 实验材料与仪器 |
3.1.1 原料与试剂 |
3.1.2 主要设备 |
3.2 实验步骤 |
3.2.1 MWCNTs/ZIF-67 复合材料的合成 |
3.2.2 MWCNTs/ZIF-67@MIPs的制备及工艺优化 |
3.2.3 MWCNTs/ZIF-67@MIPs的表征 |
3.2.4 MWCNTs/ZIF-67@MIPs的吸附性能研究 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 MWCNTs/ZIF-67@MIPs的制备工艺优化 |
3.3.2 MWCNTs/ZIF-67@MIPs的表征评价 |
3.3.3 MWCNTs/ZIF-67@MIPs的吸附研究 |
3.4 本章总结 |
第四章 分子印迹固相萃取分离纯化白果内酯 |
4.1 实验耗材与仪器 |
4.1.1 材料及试剂 |
4.1.2 主要仪器 |
4.2 实验部分 |
4.2.1 四种内酯化合物的HPLC-ELSD检测条件以及方法学验证 |
4.2.2 白果内酯分子印迹固相萃取柱的制备 |
4.2.3 MISPE萃取条件的优化 |
4.2.4 MISPE用于实际样品中白果内酯的分离纯化 |
4.3 实验结果 |
4.3.1 白果内酯及银杏内酯A、B、C的HPLC方法学验证 |
4.3.2 MISPE萃取条件的优化 |
4.3.3 实际样品中白果内酯的分离纯化 |
4.4 本章小结 |
第五章 白果内酯减缓小鼠抑郁行为的初步研究 |
5.1 实验部分 |
5.1.1 实验动物 |
5.1.2 主要药物试剂 |
5.1.3 实验方法 |
5.2 实验结果 |
5.2.1 糖水偏爱实验 |
5.2.2 悬尾实验 |
5.2.3 强迫游泳实验 |
5.2.4 小鼠脑内单胺递质含量测定实验 |
5.3 本章小结 |
第六章 结论与展望 |
6.1 结论 |
6.2 展望 |
参考文献 |
攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 |
(3)磁性表面虚拟模板分子印迹聚合物的合成及其对窄叶鲜卑花单萜类成分分离富集的研究(论文提纲范文)
致谢 |
中文摘要 |
abstract |
注释表 |
引言 |
文献综述 虚拟模板分子印迹聚合物在天然产物分离中的研究进展 |
参考文献 |
第一章 绪论 |
1.1 窄叶鲜卑花的化学成分及药理活性 |
1.1.1 窄叶鲜卑花概述 |
1.1.2 化学成分研究 |
1.1.3 药理活性研究 |
1.1.4 总结与思考 |
1.2 分子印迹技术 |
1.2.1 分子印迹技术的概述 |
1.2.2 分子印迹的聚合方法 |
1.3 磁性纳米材料 |
1.3.1 磁性纳米材料的概述 |
1.3.2 磁性Fe_3O_4纳米颗粒的制备方法 |
1.4 磁性Fe_3O_4纳米颗粒在天然产物分离中的应用 |
第二章 窄叶鲜卑花中单萜苷Sibiskoside的提取、分离及鉴定 |
2.1 材料 |
2.1.1 原料与试剂 |
2.1.2 仪器与设备 |
2.2 方法 |
2.2.1 目标化合物 Sibiskoside 的选取 |
2.2.2 目标化合物Sibiskoside的提取与分离 |
2.2.3 目标化合物Sibiskoside的分析与鉴定 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 化合物纯度 |
2.3.2 目标化合物Sibiskoside的结构 |
2.4 本章小结 |
第三章 磁性表面功能化虚拟模板分子印迹聚合物的制备和表征 |
3.1 材料 |
3.1.1 药品与试剂 |
3.1.2 仪器与设备 |
3.2 磁性表面功能化载体的制备 |
3.2.1 磁性Fe_3O_4纳米粒子的制备 |
3.2.2 磁性Fe_3O_4@SiO_2 微球的制备 |
3.2.3 磁性Fe_3O_4@SiO_2@C=C载体的制备 |
3.3 磁性表面功能化虚拟模板分子印迹聚合物的制备 |
3.3.1 虚拟模板分子的选取 |
3.3.2 功能单体的筛选 |
3.3.3 虚拟模板分子与功能单体配比的选取 |
3.3.4 交联剂用量的选取 |
3.3.5 磁性表面功能化虚拟模板分子印迹聚合物的制备 |
3.4 磁性表面功能化虚拟模板分子印迹聚合物的表征 |
3.4.1 扫描电子显微镜分析 |
3.4.2 红外分析 |
3.4.3 接触角分析 |
3.4.4 热重分析 |
3.4.5 磁化曲线分析 |
3.4.6 X射线衍射分析 |
3.5 结果与讨论 |
3.5.1 功能单体种类及用量配比筛选结果 |
3.5.2 交联剂用量的选取结果 |
3.5.3 表征结果 |
3.6 本章小结 |
第四章 印迹提取条件的优化和吸附实验 |
4.1 材料 |
4.1.1 药品与试剂 |
4.1.2 仪器与设备 |
4.2 印迹吸附过程最佳提取条件的优化 |
4.2.1 温度的影响 |
4.2.2 pH的影响 |
4.2.3 溶剂的影响 |
4.3 吸附实验及机理的探索 |
4.3.1 动力学吸附实验 |
4.3.2 等温吸附实验 |
4.3.3 选择性吸附实验 |
4.3.4 重复利用实验 |
4.3.5 实际应用 |
4.4 结果与讨论 |
4.4.1 最佳提取条件的优化结果 |
4.4.2 吸附性能及机理研究结果 |
4.5 本章小结 |
第五章 结论与展望 |
5.1 结论 |
5.2 展望 |
参考文献 |
附录 目标化合物Sibiskoside核磁H谱和C谱图 |
个人简历 |
(4)大分子拥挤试剂与低共熔溶剂的协同效应对毛细管电泳手性分离的研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
缩略语说明 |
前言 |
1.1 手性拆分技术 |
1.1.1 高效液相色谱法 |
1.1.2 超临界流体色谱法 |
1.1.3 气相色谱法 |
1.1.4 毛细管电泳法 |
1.2 手性选择剂 |
1.2.1 蛋白质 |
1.2.2 环糊精类及其衍生物 |
1.2.3 非环化糖类化合物 |
1.2.4 大环类抗生素 |
1.2.5 冠醚及其它手性选择剂 |
1.2.6 毛细管电泳手性分离中的协同效应 |
1.3 离子液体与低共熔溶剂 |
1.3.1 离子液体及其应用 |
1.3.2 低共熔溶剂 |
1.3.3 低共熔溶剂的应用 |
1.4 大分子拥挤理论 |
1.4.1 大分子拥挤效应热力学、动力学分析 |
1.4.2 大分子拥挤试剂的应用 |
1.5 手性药物佐匹克隆 |
1.6 选题意义及研究内容 |
实验部分 |
2.1 试剂及仪器 |
2.1.1 仪器 |
2.1.2 试剂 |
2.2 试剂的配制 |
2.2.1 外消旋体样品的配制 |
2.2.2 缓冲溶液的配制 |
2.2.3 DESs的配制 |
2.2.4 电泳条件 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 葡聚糖浓度对佐匹克隆对映体分离的影响 |
2.3.2 DESs环境下葡聚糖浓度对佐匹克隆对映体分离的影响 |
2.3.3 大分子拥挤环境下DESs种类对佐匹克隆对映体分离的影响 |
2.3.4 DESs配比对佐匹克隆对映体分离的影响 |
2.3.5 重复性实验 |
结论 |
参考文献 |
综述 毛细管电泳法手性分离技术概述 |
综述参考文献 |
致谢 |
个人简历 |
(5)分子印迹聚合法制备辛弗林纯度标准物质及其手性分离研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第1章 绪论 |
1.1 辛弗林概述 |
1.1.1 辛弗林简介 |
1.1.2 辛弗林应用现状 |
1.1.3 分子印迹技术 |
1.2 标准物质 |
1.2.1 标准物质简介 |
1.2.2 标准物质技术规范 |
1.2.3 标准物质研究现状 |
1.3 手性分离 |
1.3.1 研究背景 |
1.3.2 液相色谱固定相基质研究 |
1.3.3 液相色谱手性固定相类型 |
1.4 本研究的研究意义及内容 |
1.4.1 本研究的研究意义 |
1.4.2 研究内容及设计思路 |
1.4.3 研究的创新点和技术路线 |
第2章 辛弗林分子印迹聚合物的合成及其在固相萃取中的应用 |
2.1 引言 |
2.2 主要仪器与试剂 |
2.2.1 主要仪器 |
2.2.2 主要试剂 |
2.3 实验部分 |
2.3.1 辛弗林分子印迹聚合物的制备 |
2.3.2 MIPs形态表征 |
2.3.3 吸附实验 |
2.3.4 吸附动力学 |
2.3.5 高效液相色谱条件 |
2.3.6 选择性吸附 |
2.3.7 分子印迹固相萃取 |
2.4 结果与讨论 |
2.4.1 印迹聚合物制备条件的优化 |
2.4.2 聚合物静态吸附 |
2.5 分子印迹固相萃取 |
2.5.1 枳实样品前处理优化 |
2.5.2 固相萃取条件优化 |
2.6 小结 |
第3章 辛弗林纯度标准物质的制备 |
3.1 引言 |
3.2 主要仪器及试剂 |
3.2.1 主要仪器 |
3.2.2 主要试剂 |
3.3 实验部分 |
3.3.1 候选物定性分析 |
3.3.2 标准物质的制备 |
3.3.3 辛弗林纯品的分装 |
3.3.4 均匀性检验 |
3.3.5 稳定性检验 |
3.3.6 定值 |
3.3.6.1 质量平衡法定值 |
3.3.6.2 定量核磁法 |
3.3.7 不确定度的计算 |
3.4 结果讨论 |
3.4.1 候选物定性分析 |
3.4.2 标准物质的制备 |
3.4.3 均匀性检验 |
3.4.4 稳定性考察 |
3.4.5 标准物质定值 |
3.4.6 定值分析 |
3.4.7 纯度定值结果 |
3.5 不确定度评定 |
3.5.1 均匀性引入的不确定度 |
3.5.2 稳定性引入的不确定度 |
3.5.3 定值分析引入的不确定度 |
3.6 小结 |
第4章 辛弗林对映体拆分 |
4.1 引言 |
4.2 实验仪器和试剂 |
4.2.1 实验仪器 |
4.2.2 实验试剂 |
4.3 实验部分 |
4.4 结果与讨论 |
4.4.1 色谱柱的选择 |
4.4.2 流动相组成的优化 |
4.4.3 流速对分离度的影响 |
4.4.4 柱温对分离度的影响 |
4.4.5 样品及分离条件的稳定性 |
4.5 小结 |
第5章 总结与展望 |
5.1 总结 |
5.2 展望 |
参考文献 |
致谢 |
在校期间发表论文 |
A.发表论文 |
B.参研课题 |
(6)多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合物的制备、表征及初步应用研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
中英文缩写词对照表 |
1 绪论 |
1.1 分子印迹技术 |
1.1.1 分子印迹的基本原理 |
1.1.2 分子印迹的分类 |
1.1.3 分子印迹聚合物制备的基本要素 |
1.1.4 分子印迹聚合物的制备方法 |
1.1.5 分子印迹基质的研究进展 |
1.2 纤维素的简介及应用 |
1.2.1 纤维素概述 |
1.2.2 纤维素的应用 |
1.3 天然药物的分类及分子印迹材料在天然产物分离中的应用 |
1.3.1 天然药物的分类 |
1.3.2 天然产物的选择性提取分离 |
1.3.3 分子印迹材料在天然产物中的选择性提取分离 |
1.4 研究的目的和意义 |
2 硅烷化多孔纤维素微球载体的制备 |
2.1 实验仪器与药品 |
2.1.1 实验仪器及设备 |
2.1.2 实验药品 |
2.2 实验方法 |
2.2.1 纤维素微球的制备及条件优化 |
2.2.2 硅烷化多孔纤维素微球载体的制备 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 变压器油用量对纤维素微球粒径的影响 |
2.3.2 反应温度对纤维素微球粒径的影响 |
2.3.3 搅拌速度对纤维素微球粒径的影响 |
2.3.4 搅拌时间对纤维素微球粒径的影响 |
2.3.5 表面活性剂用量对纤维素微球粒径的影响 |
2.3.6 硅烷化多孔纤维素微球的制备 |
2.4 本章小结 |
3 多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合物的制备及表征 |
3.1 实验仪器与材料 |
3.1.1 实验仪器 |
3.1.2 实验装置 |
3.1.3 实验材料与试剂 |
3.2 实验方法 |
3.2.1 槲皮素检测方法的建立 |
3.2.2 多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合物的制备 |
3.2.3 多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合物制备方法稳定性的考察 |
3.2.4 印迹材料各制备阶段的吸附容量 |
3.2.5 多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合物的表征 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 槲皮素的标准曲线 |
3.3.2 多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合物的制备 |
3.3.3 红外光谱分析结果 |
3.3.4 扫描电镜分析结果 |
3.3.5 热重分析结果 |
3.3.6 X单晶衍射分析 |
3.4 本章小结 |
4 多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合物的初步应用研究 |
4.1 实验仪器与药品 |
4.1.1 实验仪器及设备 |
4.1.2 实验药品 |
4.2 实验方法 |
4.2.1 吸附条件的优化 |
4.2.2 多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合物的选择性吸附性能研究 |
4.2.3 多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合物的循环吸附性能研究 |
4.2.4 槐米中槲皮素的提取 |
4.3 结果与讨论 |
4.3.1 吸附条件的优化 |
4.3.2 多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合物的选择性吸附性能 |
4.3.3 多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合物的循环吸附性能 |
4.3.4 槐米中槲皮素的提取 |
4.4 本章小结 |
结论 |
参考文献 |
攻读学位期间发表的学术论文 |
致谢 |
(7)分子印迹技术在手性药物分离中的研究进展(论文提纲范文)
1 分子印迹技术的原理 |
2 分子印迹聚合物的分类及其在手性药物分离中的应用 |
2.1 基于聚合法的MIPs制备方法用于手性药物分离 |
2.2 基于相转化法的MIPs制备方法用于手性药物分离 |
2.3 基于表面印迹法的MIPs制备方法用于手性药物分离 |
2.4 基于溶胶凝胶法的MIPs制备方法用于手性药物分离 |
2.5 基于涂覆法的MIPs制备方法用于手性药物分离 |
3 展望 |
(8)中药水提液杂质絮凝机理及模拟研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
代号及物理意义对照表 |
第1章 绪论 |
1.1 概述 |
1.2 中药分离纯化技术的研究进展 |
1.2.1 分子蒸馏技术 |
1.2.2 大孔树脂吸附技术 |
1.2.3 分子印迹技术 |
1.2.4 膜分离技术 |
1.2.5 离心分离技术 |
1.2.6 絮凝技术 |
1.3 絮凝技术在中药水提液除杂纯化中的应用研究 |
1.3.1 絮凝工艺的应用与优化 |
1.3.2 新型絮凝剂的开发及应用研究 |
1.4 絮凝机理的研究现状 |
1.4.1 电中和絮凝机理 |
1.4.2 架桥絮凝机理 |
1.4.3 静电簇絮凝机理 |
1.4.4 网捕卷扫絮凝机理 |
1.5 絮凝过程中分子间相互作用研究进展 |
1.5.1 分子间相互作用的分类 |
1.5.2 絮凝过程中分子间相互作用研究现状 |
1.5.3 分子间相互作用的研究方法 |
1.6 论文的研究目的和内容 |
1.6.1 研究目的和意义 |
1.6.2 研究内容 |
第2章 中药水提液杂质的絮凝实验研究 |
2.1 实验材料及设备 |
2.1.1 实验材料及试剂 |
2.1.2 实验仪器及设备 |
2.2 糊化淀粉絮凝实验方案 |
2.2.1 糊化淀粉溶液制备 |
2.2.2 直链淀粉的纯化与制备 |
2.2.3 絮凝剂的选择与配制 |
2.2.4 淀粉絮凝实验方案及步骤 |
2.3 实验指标与分析方法 |
2.3.1 电荷密度测定 |
2.3.2 淀粉含量测定 |
2.3.3 絮体表征与分析 |
2.4 糊化淀粉絮凝实验结果与讨论 |
2.4.1 絮凝剂用量及电荷密度对糊化淀粉絮凝效果的影响 |
2.4.2 絮凝剂种类对糊化淀粉絮体沉降效果的影响 |
2.4.3 絮体表征及絮凝机理分析 |
2.5 鞣酸絮凝实验结果与絮凝机理分析 |
2.5.1 鞣酸絮凝研究的实验基础 |
2.5.2 鞣酸絮凝实验方案 |
2.5.3 电荷密度对鞣酸去除效果的影响 |
2.5.4 鞣酸絮凝机理分析 |
2.6 本章小结 |
第3章 中药水提液杂质絮凝模拟的流程及方法 |
3.1 中药水提液絮凝除杂模拟研究内容及基本流程 |
3.2 中药水提液杂质絮凝模拟的主要计算方法 |
3.2.1 几何优化 |
3.2.2 基组的选择和基组重叠误差的校正 |
3.2.3 色散修正 |
3.2.4 溶剂效应 |
3.2.5 退火模拟 |
3.2.6 絮体复合物构型筛选 |
3.3 中药水提液杂质絮凝模拟中的分析方法 |
3.3.1 热力学分析 |
3.3.2 玻尔兹曼絮体复合构型分布 |
3.3.3 静电势分析 |
3.3.4 约化密度梯度函数分析 |
3.3.5 独立密度梯度模型分析 |
3.4 杂质与絮凝剂分子相互作用能量的分解方法 |
3.5 本章小结 |
第4章 中药水提液杂质淀粉絮凝的量子化学模拟研究 |
4.1 淀粉絮凝模拟体系的选择与建立 |
4.2 淀粉絮凝模拟体系计算方法 |
4.3 淀粉-非离子型聚丙烯酰胺絮凝体系模拟结果与分析 |
4.3.1 单体几何构型与静电势分析 |
4.3.2 M2-NPAM5 复合物形成过程的热力学参数分析 |
4.3.3 M2-NPAM5 复合物结构分析 |
4.3.4 M2-NPAM5-1的RDG分析 |
4.3.5 M2-NPAM5-1的IGM分析 |
4.4 淀粉-阳离子聚丙烯酰胺絮凝体系模拟结果与分析 |
4.4.1 CPAM5 的几何构型选择及静电势分析 |
4.4.2 M2-CPAM5 复合物形成过程的热力学参数分析 |
4.4.3 M2-CPAM5 复合物构型分析 |
4.4.4 M2-CPAM5-1的RDG分析 |
4.4.5 M2-CPAM5-1的IGM分析 |
4.5 淀粉与聚丙烯酰胺类絮凝剂絮凝体系的能量分析 |
4.6 本章小结 |
第5章 中药水提液杂质鞣酸絮凝的量子化学模拟研究 |
5.1 鞣酸絮凝模拟体系的建立与计算方法 |
5.2 鞣酸-壳聚糖絮凝体系模拟结果与分析 |
5.2.1 GA与CH2 分子几何构型及静电势分析 |
5.2.2 GA-CH2 复合物形成过程的热力学参数分析 |
5.2.3 GA-CH2 复合物结构分析 |
5.2.4 GA-CH2-1的RDG分析 |
5.2.5 CH2-GA1的IGM分析 |
5.3 鞣酸-质子化壳聚糖体系模拟结果与分析 |
5.3.1 PCH2 分子表面静电势分析 |
5.3.2 GA-PCH2 复合物形成过程的热力学参数分析 |
5.3.3 GA-PCH2 复合物结构分析 |
5.3.4 GA-PCH2-1 复合物的RDG分析 |
5.3.5 GA-PCH2-1 复合物的IGM分析 |
5.4 鞣酸-羟基化壳聚糖絮凝体系模拟结果与分析 |
5.4.1 HPCH2 的几何结构及分子表面静电势分析 |
5.4.2 GA-HPCH2 复合物形成过程的热力学分析 |
5.4.3 GA-HPCH2 絮体复合物构型分析 |
5.4.4 GA-HPCH2-1的RDG分析 |
5.4.5 GA-HPCH2-1的IGM分析 |
5.5 鞣酸与壳聚糖及其衍生物絮凝体系的能量分析 |
5.6 本章小结 |
第6章 总结与展望 |
6.1 结论 |
6.2 创新点 |
6.3 展望 |
参考文献 |
发表论文和参加科研情况说明 |
致谢 |
(9)石杉碱甲分子印迹水凝胶微球的制备及药物释放行为研究(论文提纲范文)
缩略语词汇表 |
中文摘要 |
Abstract |
引言 |
水凝胶微球的制备及性能研究 |
1 前言 |
2 实验部分 |
2.1 主要仪器与试剂 |
2.2 水凝胶微球的制备方法 |
2.3 水凝胶微球的制备工艺考察 |
2.3.1 分散剂种类考察 |
2.3.2 搅拌速度考察 |
2.3.3 吐温-80 与司盘-80 质量比考察 |
2.3.4 水相与油相的体积比考察 |
2.3.5 制备温度考察 |
2.3.6 纤维素用量考察 |
2.3.7 交联剂用量考察 |
2.4 水凝胶微球的表征 |
2.4.1 水凝胶微球的粒径测定 |
2.4.2 水凝胶微球的形态观察 |
2.4.3 水凝胶微球的孔隙率测定 |
2.5 水凝胶微球的载药及体外释放度测定 |
2.5.1 石杉碱甲浓度测定方法 |
2.5.2 载药方法 |
2.5.3 载药水凝胶微球的收集方法 |
2.5.4 石杉碱甲载药微球的体外释放度测定 |
3 结果与讨论 |
3.1 水凝胶微球的形貌表征及粒径测定 |
3.2 制备工艺考察 |
3.3 水凝胶微球的载药及体外释放度测定 |
4 小结 |
石杉碱甲分子印迹水凝胶微球的制备及性能研究 |
1 前言 |
2 实验部分 |
2.1 主要仪器与试剂 |
2.2 石杉碱甲分子印迹水凝胶微球的制备方法 |
2.3 分子印迹水凝胶微球的制备工艺考察 |
2.3.1 催化剂种类考察 |
2.3.2 模板分子与功能单体的比例考察 |
2.4 石杉碱甲分子印迹水凝胶微球的表征及粒径测定 |
2.5 石杉碱甲分子印迹水凝胶微球的光谱分析 |
2.6 石杉碱甲分子印迹水凝胶微球的吸附性能研究 |
2.6.1 等温吸附线 |
2.6.2 吸附选择性 |
2.6.3 苍术素浓度测定方法 |
2.7 石杉碱甲分子印迹水凝胶微球的载药及体外释放度测定 |
2.7.1 载药方法 |
2.7.2 石杉碱甲载药分子印迹水凝胶微球的体外释放度测定 |
3 结果与讨论 |
3.1 石杉碱甲分子印迹水凝胶微球的形貌表征及粒径测定 |
3.2 石杉碱甲分子印迹水凝胶微球的识别机理推测 |
3.3 模板分子与功能单体间相互作用的紫外光谱分析 |
3.4 石杉碱甲分子印迹水凝胶微球的红外光谱分析 |
3.5 分子印迹聚合物的影响因素 |
3.5.1 催化剂种类对分子印迹聚合物的影响 |
3.5.2 模板分子与功能单体比例对分子印迹聚合物的影响 |
3.6 石杉碱甲分子印迹水凝胶微球的吸附性能 |
3.7 分子印迹水凝胶微球的载药量及体外释放度测定结果 |
4 小结 |
石杉碱甲分子印迹水凝胶微球药代动力学研究 |
1 前言 |
2 实验部分 |
2.1 主要仪器与试剂 |
2.2 样品处理及测定 |
2.2.1 碱化液配制 |
2.2.2 取样及血浆样品处理方法 |
2.3 血浆中HupA浓度测定方法 |
2.3.1 色谱条件 |
2.3.2 质谱条件 |
2.3.3 专属性试验 |
2.3.4 标准曲线的制备 |
2.3.5 精密度 |
2.3.6 稳定性 |
2.3.7 基质效应与提取回收率 |
3 结果与讨论 |
3.1 方法专属性考察 |
3.2 标准曲线的制备 |
3.3 精密度 |
3.4 稳定性 |
3.5 基质效应与提取回收率 |
3.6 大鼠给药后血中药物浓度时间曲线图 |
4 小结 |
结论 |
参考文献 |
文献综述 |
参考文献 |
致谢 |
作者简历 |
(10)选择性分离不同结构环糊精的分子印迹聚合物合成、表征及应用研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
符号缩写说明 |
第一章 绪论 |
1.1 环糊精概述 |
1.1.1 概念 |
1.1.2 结构与性质 |
1.1.3 制备 |
1.1.4 分支环糊精 |
1.1.5 应用 |
1.2 分离纯化 |
1.2.1 非溶剂法 |
1.2.2 溶剂法 |
1.3 分子印迹概述 |
1.3.1 概念 |
1.3.2 发展历史 |
1.3.3 制备方法 |
1.3.4 原理 |
1.3.5 应用 |
1.4 光响应型分子印迹聚合物 |
1.5 立题背景与意义 |
1.6 研究思路与内容 |
第二章 光响应型分子印迹聚合物在麦芽糖基-β-环糊精分离中的应用及其安全性评估 |
2.1 引言 |
2.2 试验材料、试剂与仪器 |
2.2.1 试验材料与试剂 |
2.2.2 试验仪器 |
2.2.3 实验动物 |
2.3 试验方法 |
2.3.1 4-羟基偶氮苯的合成 |
2.3.2 4-甲基丙烯酰氧偶氮苯的合成 |
2.3.3 光响应分子印迹聚合物(PMIPs)的制备 |
2.3.4 偶氮苯衍生物光响应性分析 |
2.3.5 结构表征 |
2.3.6 PMIPs吸附性能研究 |
2.3.7 PMIPs光控吸收和释放实验 |
2.3.8 Mal-β-CD安全性分析 |
2.3.9 数据分析 |
2.4 结果与讨论 |
2.4.1 PDP和MAA的结构分析 |
2.4.2 功能单体MAA的光响应性分析 |
2.4.3 PMIPs结构分析 |
2.4.4 PMIPs吸附性能分析 |
2.4.5 PMIPs和PNIPs对Mal-β-CD、β-CD和麦芽糖的光控吸收和释放 |
2.4.6 Mal-β-CD亚急性毒性分析 |
2.4.7 Mal-β-CD亚慢性毒性分析 |
2.5 本章小结 |
第三章 光响应型表面分子印迹聚合物的制备及其对麦芽糖基-β-环糊精识别特性的研究 |
3.1 引言 |
3.2 试验材料、试剂与仪器 |
3.2.1 试验材料与试剂 |
3.2.2 试验仪器 |
3.3 试验方法 |
3.3.1 二氧化硅的制备 |
3.3.2 功能化二氧化硅的制备 |
3.3.3 光响应型表面分子印迹聚合物(PSMIPs)的制备 |
3.3.4 结构表征 |
3.3.5 PSMIPs吸附性能研究 |
3.3.6 PSMIPs光控吸收和释放实验 |
3.3.7 PSMIPs稳定性和重复利用性 |
3.3.8 数据分析 |
3.4 结果与讨论 |
3.4.1 PSMIPs结构分析 |
3.4.2 PSMIPs吸附性能分析 |
3.4.3 PSMIPs和PSNIPs对Mal-β-CD、β-CD和麦芽糖的光控吸收和释放 |
3.4.4 PSMIPs稳定性和重复利用性分析 |
3.5 本章小结 |
第四章 光响应型表面分子印迹聚合物厚度对麦芽糖基-β-环糊精识别特性的影响 |
4.1 引言 |
4.2 试验材料、试剂与仪器 |
4.2.1 试验材料与试剂 |
4.2.2 试验仪器 |
4.3 试验方法 |
4.3.1 二氧化硅的制备 |
4.3.2 功能化二氧化硅的制备 |
4.3.3 不同印迹聚合物厚度的PSMIPs的制备 |
4.3.4 结构表征 |
4.3.5 吸附性能研究 |
4.3.6 光控释放实验 |
4.3.7 稳定性和重复利用性 |
4.3.8 数据分析 |
4.4 结果与讨论 |
4.4.1 表面印迹聚合物厚度对聚合物形貌的影响 |
4.4.2 表面印迹聚合物厚度对表面基团的影响 |
4.4.3 N_2吸附-脱附分析 |
4.4.4 表面印迹聚合物厚度对PSMIPs吸附性能的影响 |
4.4.5 表面印迹聚合物厚度对PSMIPs光控释放的影响 |
4.4.6 表面印迹聚合物厚度对PSMIPs稳定性和重复利用性的影响 |
4.5 本章小结 |
第五章 光响应型中空核壳结构分子印迹聚合物的制备及其对α-环糊精识别特性的研究 |
5.1 引言 |
5.2 试验材料、试剂与仪器 |
5.2.1 试验材料与试剂 |
5.2.2 试验仪器 |
5.3 试验方法 |
5.3.1 二氧化硅的制备 |
5.3.2 功能化二氧化硅的制备 |
5.3.3 光响应型中空核壳结构分子印迹聚合物(PHSMIPs)的制备 |
5.3.4 结构表征 |
5.3.5 PHSMIPs吸附性能研究 |
5.3.6 PHSMIPs光控吸收和释放实验 |
5.3.7 PHSMIPs稳定性和重复利用性 |
5.3.8 数据分析 |
5.4 结果与讨论 |
5.4.1 表面基团分析 |
5.4.2 热降解分析 |
5.4.3 N_2吸附-脱附分析 |
5.4.4 形貌分析 |
5.4.5 PHSMIPs吸附性能分析 |
5.4.6 PSMIPs和PHSMIPs对α-CD的分离效果分析 |
5.4.7 PHSMIPs稳定性和重复利用性分析 |
5.5 本章小结 |
第六章 双模板光响应型中空核壳结构分子印迹聚合物在γ-环糊精纯化中的应用 |
6.1 引言 |
6.2 试验材料、试剂与仪器 |
6.2.1 试验材料与试剂 |
6.2.2 试验仪器 |
6.3 试验方法 |
6.3.1 活化二氧化硅的制备 |
6.3.2 功能化二氧化硅的制备 |
6.3.3 双模板光响应中空核壳结构分子印迹聚合物(DPHSMIPs)的制备 |
6.3.4 结构表征 |
6.3.5 DPHSMIPs吸附性能研究 |
6.3.6 DPHSMIPs稳定性和重复利用性 |
6.3.7 数据分析 |
6.4 结果与讨论 |
6.4.1 结构表征 |
6.4.2 DPHSMIPs分子印迹聚合物吸附性能分析 |
6.4.3 DPHSMIPs稳定性和重复利用性分析 |
6.5 本章小结 |
主要结论与展望 |
主要结论 |
展望 |
论文创新点 |
参考文献 |
致谢 |
附录: 作者在攻读博士学位期间发表的论文 |
四、分子印迹技术在药物分离中的应用(论文参考文献)
- [1]基于分子印迹技术的中药成分绿色分离研究进展[J]. 刘显银,邱模昌. 亚太传统医药, 2021(10)
- [2]分子印迹固相萃取分离纯化白果内酯及抗抑郁作用研究[D]. 黄徐胜. 合肥工业大学, 2021(02)
- [3]磁性表面虚拟模板分子印迹聚合物的合成及其对窄叶鲜卑花单萜类成分分离富集的研究[D]. 陈子龙. 江西中医药大学, 2020
- [4]大分子拥挤试剂与低共熔溶剂的协同效应对毛细管电泳手性分离的研究[D]. 李在譞. 天津医科大学, 2020(06)
- [5]分子印迹聚合法制备辛弗林纯度标准物质及其手性分离研究[D]. 李玲. 西南大学, 2020(01)
- [6]多孔纤维素基槲皮素分子印迹聚合物的制备、表征及初步应用研究[D]. 朱亚伟. 东北林业大学, 2020
- [7]分子印迹技术在手性药物分离中的研究进展[J]. 孙红,陈素娥,赵龙山. 海峡药学, 2019(10)
- [8]中药水提液杂质絮凝机理及模拟研究[D]. 安晓娇. 天津大学, 2019(01)
- [9]石杉碱甲分子印迹水凝胶微球的制备及药物释放行为研究[D]. 高璇. 福建中医药大学, 2019(06)
- [10]选择性分离不同结构环糊精的分子印迹聚合物合成、表征及应用研究[D]. 范浩然. 江南大学, 2019(03)