一、丙烯腈对大鼠肝脏的毒性（论文文献综述）
郑爱,赵粉线,石影,郑蓉,党瑜慧,李芝兰[1]（2020）在《丙烯腈亚急性染毒致大鼠肝损伤及其可能机制探讨》文中提出目的研究丙烯腈（ACN）亚急性染毒致大鼠肝组织的损伤作用。方法 60只SPF级健康成年雄性SD大鼠随机分为对照组（玉米油）、低ACN组（11. 5 mg/kg·bw ACN）、中ACN组（23. 0 mg/kg·bw ACN）、高ACN组（46. 0 mg/kg·bw ACN）、N-乙酰半胱氮酸（NAC）干预组（300. 0 mg/kg·bw NAC+46. 0 mg/kg·bw ACN）,每组12只,灌胃染毒,1次/d,6 d/周,共28 d。末次染毒结束24 h后,心脏采血,摘取肝,计算肝脏器系数,观察肝组织病理学改变,测定血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）活力,肝组织过氧化氢酶（CAT）活力、谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）含量。结果低ACN组、高ACN组、NAC干预组大鼠肝脏系数高于对照组（P<0. 05）;低ACN组、高ACN组大鼠血清ALT活力,中ACN组、高ACN组大鼠血清AST活力高于对照组（P<0. 05）;高ACN组大鼠血清ALT活力高于NAC干预组（P<0. 05）; ACN各剂量染毒组、NAC干预组大鼠肝CAT活力低于对照组（P<0. 05）,高ACN组、NAC干预组大鼠肝GSH含量低于对照组（P<0. 05）,中ACN组、高ACN组、NAC干预组大鼠肝MDA含量高于对照组（P<0. 05）;高ACN组大鼠肝MDA含量高于NAC干预组（P<0. 05）;光学显微镜下,对照组大鼠肝小叶结构清晰,肝索排列整齐,肝细胞形态正常;低ACN组与对照组相比无明显异常变化;中ACN组肝细胞轻度疏松,结构清晰;高ACN组肝细胞肿胀,胞浆疏松,核空泡变; NAC干预组较高ACN组大鼠肝组织损伤减轻。结论 ACN亚急性染毒可通过诱导氧化应激使大鼠肝组织脂质过氧化水平发生改变,产生肝损伤作用。
郑爱[2]（2019）在《PI3K/AKT信号通路在丙烯腈诱导的大鼠肝细胞凋亡中的作用》文中认为目的:通过建立丙烯腈（acrylonitrile,ACN）致雄性SD大鼠肝损伤模型,观察并研究大鼠肝损伤表现,探讨氧化应激、PI3K/AKT信号通路在ACN致大鼠肝细胞凋亡中的作用,为ACN肝毒性机制的深入研究提供可靠依据。方法:60只成年健康雄性SD大鼠,随机分为5组,每组12只,分别为:对照组（玉米油）、低ACN组（11.5 mg/kg）、中ACN组（23.0 mg/kg）、高ACN组（46.0 mg/kg）、N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine,NAC）组。灌胃染毒,灌胃容积为5.0 mL/kg,每天1次,每周6天,共28天,其中NAC组先给予300.0mg/kg NAC 30 min后,再给予高剂量ACN。末次染毒结束24 h后用乙醚麻醉大鼠,心脏采血后处死。（1）摘取大鼠肝组织,称量肝脏湿重,计算肝脏器系数;（2）制备肝组织HE病理切片,镜下观察大鼠肝组织结构的病理学改变;（3）离心血浆,测定大鼠血清中肝功能相关酶丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）水平;（4）TUNEL染色法检测大鼠肝细胞凋亡水平;（5）制备大鼠肝组织匀浆,检测氧化应激指标过氧化氢酶（catalase,CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）的活力,以及谷胱甘肽（glutathione,GSH）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）的含量;（6）qRT-PCR法检测大鼠肝组织PI3K/AKT信号通路相关基因PI3K、AKT mRNA的相对表达水平和线粒体凋亡途径相关基因Bad、Bcl-2、Cyt c、Caspase-3 mRNA的相对表达水平;（7）Western Blot法检测大鼠肝组织PI3K/AKT信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT的相对表达水平以及线粒体凋亡通路相关蛋白Bad、p-Bad、Bcl-2、Bax、Caspase-9、Cyt c、Caspase-3的相对表达水平。结果:（1）大鼠肝脏湿重及脏器系数:低ACN组肝脏湿重和脏器系数以及高ACN组脏器系数高于对照组（P<0.05）。（2）大鼠肝组织结构变化:对照组肝小叶结构清晰,肝细胞形态正常、大小均匀、核圆,肝索整齐,肝窦明显;低ACN组镜下未见明显的异常改变;中ACN组胞浆出现轻度疏松,肝细胞形态破坏,肝索界限较模糊;高ACN组肝小叶结构不清晰,肝细胞肿胀,核空泡变,脂肪滴增多,肝血窦充血;NAC组肝细胞体积变大,胞浆疏松,肝索排列较整齐,与高ACN组相比损伤较轻。（3）大鼠肝功能相关血清酶:与对照组相比,低、高ACN组ALT活力升高,中、高ACN组AST活力升高（P<0.05）;NAC组ALT活力较高ACN组降低（P<0.05）。（4）TUNEL染色:与对照组相比,低、中ACN组凋亡阳性细胞数显着增多（P<0.05）。（5）大鼠肝脏氧化应激指标:与对照组相比,低ACN组CAT活力降低,SOD、GSH-Px活力升高（P<0.05）;中ACN组CAT活力降低,MDA含量升高（P<0.05）;高ACN组CAT活力降低,SOD活力升高,GSH含量降低,MDA含量升高（P<0.05）。NAC组MDA含量较高ACN组降低（P<0.05）。（6）qRT-PCR:与对照组相比,低ACN组Bad、Caspase-3 mRNA相对表达升高,Bcl-2 mRNA相对表达降低（P<0.05）;中ACN组PI3K、Bcl-2 mRNA相对表达降低,Cyt c mRNA相对表达升高（P<0.05）;高ACN组PI3K、Bcl-2 mRNA相对表达降低,Bad mRNA相对表达升高（P<0.05）;各ACN组AKT mRNA相对表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。NAC组Bad mRNA相对表达较高ACN组降低（P<0.05）。（7）Western Blot结果:与对照组相比,低ACN组pro-Caspase-3蛋白相对表达降低,cleaved-Caspase-3蛋白相对表达升高（P<0.05）;中ACN组PI3K、p-Bad、pro-Caspase-3蛋白相对表达降低,Bad、Bax、Caspase-9、Cyt c蛋白相对表达升高,Bcl-2/Bax降低（P<0.05）;高ACN组p-PI3K、p-AKT、p-Bad、Bcl-2、pro-Caspase-3蛋白相对表达降低,Bad、Bax、Caspase-9、Cyt c、cleaved-Caspase-3蛋白相对表达升高,Bcl-2/Bax降低（P<0.05）;各ACN组AKT蛋白相对表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。与高ACN组相比,NAC组PI3K、p-Bad、pro-Caspase-3蛋白相对表达升高,Bax、Caspase-9、cleaved-Caspase-3蛋白相对表达降低（P<0.05）。结论:（1）ACN可改变大鼠肝组织结构,影响血清肝功能相关酶活力,造成肝损伤。（2）ACN诱导的氧化应激、PI3K/AKT信号通路的抑制和线粒体凋亡途径的激活是ACN致大鼠肝细胞凋亡的可能机制。
石影[3]（2019）在《芹菜素对丙烯腈致大鼠精子质量及睾丸ASK1-JNK/p38信号通路影响的干预作用》文中研究表明目的:探讨芹菜素（apigenin,AP）是否对丙烯腈（acrylonitrile,ACN）所致大鼠精子质量及睾丸损伤有干预作用及其可能机制,为ACN的生殖毒性防护和AP的利用提供一定依据。方法:选用成年雄性SD大鼠60只,随机分为对照组（玉米油）、ACN组（46 mg/kg ACN）、低AP干预组（46 mg/kg ACN+117 mg/kg AP）、中AP干预组（46 mg/kg ACN+234 mg/kg AP）和高AP干预组（46 mg/kg ACN+351 mg/kg AP）,每组12只,进行灌胃染毒,1次/d,6 d/w,28 d后处死大鼠:（1）摘取双侧睾丸和附睾,称重并计算脏器系数;（2）采用计算机辅助精子分析（computer-aided sperm analysis,CASA）系统分析精子密度、活率、活力和精子运动参数;制备精子伊红染色涂片,观察精子形态;制备精子吖啶橙染色涂片,观察精子DNA完整性;（3）制备睾丸组织病理切片,评估睾丸组织结构变化;（4）试剂盒检测睾丸组织中碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,AKP）、酸性磷酸酶（acid phosphatase,ACP）、琥珀酸脱氢酶（succinate dehydrogenase,SDH）和乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）的活力;（5）试剂盒测定睾丸组织中丙二醛（malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量,超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）、过氧化氢酶（catalase,CAT）活力及总抗氧化能力（total antioxidation capability,T-AOC）;（6）采用qRT-PCR技术测定睾丸组织中ASK1、MKK7、JNK、p38、Cyt c、Caspase-9、Caspase-3、Bax和Bcl-2 mRNA相对表达水平;（7）采用Western Blot技术测定睾丸组织中ASK1、p-ASK1、MKK7、p-MKK7、JNK、p-JNK、p38、p-p38、Cyt c、Caspase-9、Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达水平;（8）制备TUNEL染色切片,检测睾丸组织的细胞凋亡水平。结果:（1）体重和脏器系数:与对照组比较,ACN组附睾湿重和附睾脏器系数显着降低（P<0.05）;与ACN组比较,低AP干预组大鼠附睾湿重和附睾脏器系数显着升高（P<0.05）。（2）精子质量:与对照组比较,ACN组大鼠a级和b级精子所占比例显着升高,d级精子所占比例显着降低（P<0.05）;精子活率和精子活力显着升高（P<0.05）;曲线速度（curve line velocity,VCL）、直线速度（straight line velocity,VSL）、平均路径速度（average path velocity,VAP）和平均移动角度（mean angular displacement,MAD）显着升高,鞭打频率（beat-cross frequency,BCF）显着降低（P<0.05）。与对照组比较,ACN组大鼠精子畸形率、头部畸形率和尾部畸形率显着升高（P<0.05）;与ACN组比较,低、中AP干预组大鼠精子畸形率和头部畸形率显着降低（P<0.05）。与对照组比较,ACN组大鼠精子DFI指数显着升高（P<0.05）;与ACN组比较,低、中AP干预组大鼠精子DFI指数显着降低（P<0.05）。（3）睾丸组织结构:ACN组大鼠生精小管萎缩变形,管径变小、间质增宽,生精细胞层数减少、排列紊乱,管腔中成熟精子数目很少,低、中AP干预组生精小管较为完整,排列规则,管腔内可见各级生精细胞和成熟精子。（4）睾丸标志酶:与对照组比较,ACN组大鼠睾丸组织中AKP和SDH活力显着降低（P<0.05）;与ACN组比较,低、中、高AP干预组大鼠睾丸组织中LDH活力显着降低,AKP活力显着升高（P<0.05）。（5）睾丸组织氧化应激相关指标:与对照组比较,ACN组大鼠睾丸组织中GSH-Px活力和T-AOC水平显着降低（P<0.05）;与ACN组比较,低AP干预组大鼠睾丸组织中GSH含量和T-AOC水平显着升高（P<0.05）;高AP干预组大鼠睾丸组织中GSH-Px活力显着降低（P<0.05）。（6）基因检测结果:与对照组比较,ACN组大鼠睾丸组织中ASK1、MKK7、JNK、p38、Caspase-9和Bax mRNA相对表达水平升高,Bcl-2 mRNA相对表达水平降低（P<0.05）;与ACN组比较,低AP干预组大鼠睾丸组织中MKK7、JNK、p38和Bax mRNA相对表达水平降低,Bcl-2 mRNA相对表达水平升高（P<0.05）;中AP干预组大鼠睾丸组织中JNK和Bax mRNA相对表达水平降低,Bcl-2 mRNA相对表达水平升高（P<0.05）;高AP干预组Bax mRNA相对表达水平降低（P<0.05）。（7）蛋白检测结果:与对照组比较,ACN组大鼠睾丸组织中ASK1、p-ASK1、MKK7、p-MKK7、JNK、p-JNK、p38、p-p38、Cyt c、Caspase-9、Caspase-3和Bax蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达水平降低（P<0.05）,p-JNK/JNK、p-p38/p38比值升高,Bcl-2/Bax比值降低（P<0.05）;与ACN组比较,低AP干预组大鼠睾丸组织中ASK1、p-ASK1、MKK7、p-MKK7、JNK、p-JNK、p38、p-p38、Caspase-9、Caspase-3和Bax蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高（P<0.05）,p-JNK/JNK、p-p38/p38比值降低,Bcl-2/Bax比值升高（P<0.05）;中AP干预组大鼠睾丸组织中ASK1、p-ASK1、MKK7、p-MKK7、JNK、p-JNK、p38、p-p38、Bax、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高（P<0.05）,p-ASK1/ASK1、p-JNK/JNK比值降低,Bcl-2/Bax比值升高（P<0.05）;高AP干预组大鼠睾丸组织中Caspase-9、Caspase-3和Bax蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高（P<0.05）,p-ASK1/ASK1、p-JNK/JNK比值降低,Bcl-2/Bax比值升高（P<0.05）。（8）TUNEL染色切片:与对照组比较,ACN组大鼠每生精小管中TUNEL阳性细胞数增加（P<0.05）;与ACN组比较,低、中、高AP干预组大鼠每生精小管中TUNEL阳性细胞数减少（P<0.05）。结论:（1）AP对ACN诱导的精子畸形和DNA损伤有保护作用,且可以减轻ACN诱导的大鼠睾丸组织病理损伤,改善睾丸标志酶的变化。（2）AP可以通过减轻ACN诱导的睾丸氧化应激,抑制ASK1-JNK/p38信号通路的激活和线粒体介导的细胞凋亡而发挥其保护作用。
潘丽,魏倩,高霞,石影,郑爱,薛红丽,李芝兰[4]（2018）在《丙烯腈诱导的氧化应激对大鼠肝脏内质网应激信号通路的影响》文中提出为探讨丙烯腈（acrylonitrile,ACN）诱导的大鼠肝脏氧化损伤对内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）信号通路的影响,我们将50只SPF级成年雄性SD大鼠按体重随机分为5组,每组10只。各组分别以12.5、25.0、50.0 mg·kg-1ACN灌胃染毒,N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine,NAC）干预组先用300.0 mg·kg-1NAC灌胃30 min后再灌50.0 mg·kg-1ACN,对照组以0.5 mL·（100 g）-1的玉米油灌胃,1次·天-1,6天·周-1,共计13周。染毒结束后,检测肝脏组织氧化还原酶活力及丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量,GRP78、CHOP及caspase-12 mRNA及蛋白表达水平。结果显示:低、中ACN组大鼠肝脏GSH含量显着低于对照组（P<0.05）;低ACN组大鼠肝脏GSH-Px活力、SOD活力及MDA含量均显着高于对照组（P<0.05）;中、高ACN组大鼠肝脏CAT活力明显低于对照组（P<0.05）。NAC干预后可逆转ACN诱导的大鼠肝脏GSH含量、MDA含量及SOD活力的变化。RT-PCR结果显示,高ACN组大鼠肝脏GRP78、CHOP、caspase-12 mRNA表达水平与对照组比较均升高（P<0.05）。NAC干预后,CHOP、caspase-12 mRNA表达水平与高ACN组比较均降低（P<0.05）。Western Blot结果显示,高ACN组大鼠肝脏GRP78、CHOP、caspase-12蛋白表达水平与对照组比较均升高（P<0.05）,NAC干预后可逆转以上作用。结果表明,ACN慢性染毒对大鼠肝脏的氧化损伤可激活ERS信号通路,NAC可减轻氧化损伤的程度而阻断ERS信号通路,这可能是ACN产生肝脏毒性的机制之一。
董颖[5]（2018）在《苯乙基异硫氰酸酯对丙烯腈致糖尿病鼠急性毒性的影响及其机制研究》文中研究表明目的:糖尿病是一种内分泌功能紊乱的慢性疾病,可继发多种并发症。糖尿病人群是受环境毒物危害的敏感人群之一,环境毒物对糖尿病人群的心血管、神经的损害及肝、肾的损伤都比健康人群更严重。因此,保护糖尿病人群的健康使其少受环境毒物的危害是当前研究的热点之一。丙烯腈（acrylonitrile,AN）是一种高挥发性和高毒性的有机合成工业原料,细胞色素P4502E1（CYP2E1）是AN氧化代谢的关键酶。糖尿病可上调CYP2E1活性,而CYP2E1上调又能使多数环境毒物毒性增强,前期研究发现CYP2E1上调可导致A N代谢速度加快,代谢产物CN-含量增加,使AN急性毒性更强。苯乙基异硫氰酸酯（ph enethyl isothiocyanate,PEITC）是十字花科植物中硫代葡萄糖苷的酶解产物,具有抑制C YP2E1活性、抗氧化、抗癌、抗炎等多重药理作用。本实验在建立链脲佐菌素（s treptozotocin,STZ）诱导型糖尿病大鼠和购置糖尿病db/db小鼠模型的基础上,采用天然产物PEITC对AN染毒的2种糖尿病模型动物进行预处理,探讨糖尿病对以AN为代表的环境工业毒物急性毒性易感性改变的特征及其机制,以及天然产物PEITC拮抗AN致糖尿病鼠的急性毒性作用,从而为糖尿病等易感人群的防护提供指南。方法:1.采用一次性腹腔注射65mg/kg STZ建立糖尿病大鼠模型,研究STZ诱导型糖尿病大鼠对AN急性毒性易感性改变的特征及其生化机制,以及天然产物PEITC拮抗AN致STZ诱导型糖尿病大鼠的急性毒性作用:具体方法如下:在STZ诱导型糖尿病大鼠模型建立成功的14 d后,将大鼠随机分为正常空白对照组,糖尿病空白对照组,AN组,20,40,80 mg/kg PEITC+AN组,糖尿病+AN组,糖尿病+20,40,80 mg/kg PEITC+AN组。每天灌胃PEITC或橄榄油（对照组）,连续3天,最后一次灌胃PEITC 1 h后腹腔注射90mg/kg AN。观察大鼠24 h内行为变化情况和死亡情况。检测肝CYP2E1活性和肝脑细胞色素c氧化酶（CcOx）活性评价毒物代谢酶CYP2E1在STZ诱导型糖尿病大鼠易感中的作用和PEITC的保护机制。检测脑组织谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量,谷胱甘肽-S-转移酶（glutathione S-transferase,GST）活性,活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平,探讨PEITC对AN染毒的STZ诱导型糖尿病大鼠氧化应激的影响。2.研究糖尿病db/db小鼠对AN急性毒性易感性改变的特征及其生化机制,以及天然产物PEITC拮抗AN致糖尿病db/db小鼠的急性毒性作用:实验分组及处理方式,检测指标均与STZ诱导型糖尿病大鼠的实验方法相同。结果:1.STZ诱导型糖尿病大鼠:行为观察结果显示相对于正常大鼠,AN染毒后STZ诱导型糖尿病大鼠抽搐,翻正反射消失和死亡时间明显缩短,死亡率显着升高,说明STZ诱导型糖尿病大鼠对AN的急性毒性更为敏感。PEITC预处理后,可显着延长抽搐开始时间,翻正反射消失和死亡时间,降低抽搐率,翻正反射消失率和死亡率,有效缓解AN染毒的STZ诱导型糖尿病大鼠的急性毒性。与正常空白组相比,糖尿病空白组CYP2E1活性显着上升,AN染毒1 h对CYP2E1蛋白表达无显着影响,PEITC预处理AN染毒的糖尿病大鼠后,肝脏CYP2E1活性显着降低和脑ROS水平显着降低,肝和脑CcOx活性,脑组织GSH含量和GST活性显着升高,本实验的结果也进一步验证了动物行为学观察实验,说明STZ诱导型糖尿病增强AN的急性毒性是由于其上调了CYP2E1的活性,PEITC通过显着抑制CYP2E1的活性可达到有效拮抗AN染毒的STZ诱导型糖尿病大鼠急性毒性的效果。2.糖尿病db/db小鼠模型:行为观察结果显示相对于AN染毒的同窝野生型小鼠,AN染毒的糖尿病db/db小鼠死亡时间明显缩短,死亡率显着升高,说明糖尿病db/db小鼠对AN的急性毒性更为敏感。PEITC预处理后,AN染毒的糖尿病db/db小鼠死亡时间明显延长,死亡率明显降低。db/db小鼠的CYP2E1活性和蛋白表达与同窝野生型小鼠之间没有显着差异,急性暴露AN对糖尿病db/db小鼠和同窝野生型小鼠CYP2E1活性和蛋白表达均无显着影响（Fig.3-2和Fig.3-3）。这说明db/db小鼠增强AN的急性毒性可能不是通过介导CYP2E1活性而调控的,与单纯AN染毒组相比,PEITC（40 mg/kg）预处理后AN染毒的糖尿病db/db小鼠肝脏CYP2E1活性显着降低,肝和脑CcOx活性显着升高,肝和脑ROS水平显着降低,说明PEITC可有效拮抗AN染毒的糖尿病db/db小鼠的急性毒性。结论:在AN急性染毒后,比起以相同方式处理的正常鼠,STZ诱导型糖尿病大鼠和糖尿病db/db小鼠生存时间显着缩短,死亡率显着升高,说明该两种类型的糖尿病均增加了AN的急性毒性。STZ诱导型糖尿病大鼠通过上调CYP2E1活性加快AN代谢物CN-的大量生成,从而抑制组织中CcOx活性,造成糖尿病大鼠在AN急性染毒后死亡率升高,急性毒性增强。与同窝野生型对照小鼠相比,糖尿病db/db小鼠CYP2E1活性没有显着变化,这说明糖尿病db/db小鼠增强AN的急性毒性可能不是通过调控CYP2E1活性介导的。天然产物PEITC主要是通过抑制CYP2E1酶活性和降低氧化应激达到缓解AN的急性毒性,具体机制有待进一步研究。
魏倩[6]（2018）在《丙烯腈对大鼠精子质量及睾丸ASK1-JNK/p38信号通路的影响》文中认为目的:建立雄性大鼠丙烯腈（acrylonitrile,ACN）短期生殖损伤模型,分析大鼠精子质量,并从氧化应激、ASK1-JNK/p38信号通路及细胞凋亡水平探讨可能机制。方法:60只SPF级成年健康SD雄性大鼠,随机分为5组:对照组（玉米油）、染毒组（11.5、23.0、46.0mg/kg ACN）、NAC组（300.0mg/kg NAC+46.0mg/kg ACN）,每组12只。灌胃容积5.0ml/kg,NAC组给予300.0mg/kg NAC 30min后,再给予46.0mg/kg ACN。1次/d,6d/w,共28d。末次染毒后,次日乙醚麻醉大鼠,心内采血后处死大鼠:（1）分离大鼠睾丸、附睾等脏器并称重,计算脏器系数;（2）制备睾丸组织HE染色切片,观察睾丸组织结构变化;（3）制备睾丸组织匀浆,检测睾丸标志酶酸性磷酸酶（ACP）、碱性磷酸酶（AKP）、乳酸脱氢酶（LDH）、琥珀酸脱氢酶（SDH）水平;（4）游离附睾中精子,使用CASA系统分析精子运动参数,制备精子涂片行伊红染色和吖啶橙染色,观察精子形态和DNA损伤情况;（5）ELISA法测定血清睾酮（T）、卵泡刺激素（FSH）水平;（6）检测睾丸组织脂质过氧化指标超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）、总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽（GSH）水平;（7）TUNEL染色检测睾丸细胞凋亡水平;（8）RT-PCR检测睾丸组织ASK1-JNK/p38信号通路相关基因ASK1、MKK7、JNK、p38 mRNA相对表达水平以及凋亡相关基因Caspase-9、Bax、Bcl-2、Caspase-3 mRNA相对表达水平;（9）Western Blot检测睾丸组织ASK1-JNK/p38信号通路相关蛋白ASK1、p-ASK1、MKK7、JNK、p-JNK、p38、p-p38表达水平以及凋亡相关蛋白Caspase-9、Cyt c、Bax、Bcl-2、Caspase-3表达水平。结果:（1）体重及脏器系数:ACN各剂量染毒组大鼠体重、睾丸湿重及脏器系数变化差异均无统计学意义（P>0.05）,附睾湿重低于对照组（P<0.05）;（2）睾丸组织结构改变:ACN中、高剂量染毒组大鼠睾丸生精小管排列稀疏,管径变小,生精小管内各级生精细胞排列紊乱、细胞成熟度降低,管腔内精子数目减少,间质稀疏,NAC干预后生精小管较高剂量组排列紧密、管腔增大,减轻了ACN对大鼠睾丸的损伤作用;（3）睾丸标志酶:与对照组相比,ACN高剂量染毒组大鼠睾丸ACP活力升高,低、中剂量染毒组AKP活力降低,中剂量染毒组LDH活力升高（P<0.05）;（4）精子质量:与对照组相比,ACN各剂量染毒组大鼠a级精子所占比例均升高,d级精子所占比例均降低（P<0.05）,VCL、VSL、VAP、MAD均升高,BCF均降低（P<0.05）。与高剂量染毒组相比,NAC干预后降低了大鼠精子VCL、VSL、VAP以及MAD,升高了BCF（P<0.05）。ACN各剂量染毒组精子畸形部位均以头部为主,精子畸形率、头部畸形率、精子DFI指数均高于对照组（P<0.05）,与高剂量染毒组相比,NAC干预后降低了精子DFI指数（P<0.05）;（5）血清激素水平:与对照组比较,ACN各剂量染毒组大鼠血清FSH浓度均升高（P<0.05）;低、中剂量染毒组血清T浓度降低（P<0.05）;（6）睾丸脂质过氧化指标:与对照组相比,低剂量染毒组大鼠睾丸SOD、T-AOC活力降低（P<0.05）;中剂量染毒组CAT、SOD活力降低,MDA含量升高（P<0.05）;高剂量染毒组CAT、SOD活力升高,GSH-Px、T-AOC活力降低,GSH含量降低（P<0.05）。与高剂量染毒组相比,NAC干预后降低了大鼠睾丸组织CAT活力和MDA含量（P<0.05）;（7）TUNEL染色:中、高剂量染毒组大鼠睾丸TUNEL阳性细胞增多,每生精小管TUNEL阳性细胞数增多（P<0.05）;（8）RT-PCR结果:与对照组相比,低剂量染毒组大鼠睾丸p38、JNK、Bax、Caspase-9 mRNA表达上调;中剂量染毒组ASK1、MKK7、p38、JNK mRNA表达均上调;高剂量染毒组ASK1、MKK7、p38、JNK、Bax、Caspase-3 mRNA表达均上调,Bcl-2 mRNA表达下调。与高剂量染毒组相比,NAC干预后降低了ASK1、MKK7、p38、Caspase-3mRNA表达水平（P<0.05）;（9）Western Blot结果:与对照组相比,低剂量染毒组大鼠睾丸组织p-p38、Bcl-2蛋白表达水平降低,Caspase-9表达水平升高;中剂量染毒组p-ASK1、MKK7、p-JNK、p38、Cyt c、Caspase-9、Bax、cleaved-Caspase-3表达水平升高;高剂量染毒组p-ASK1、MKK7、p-JNK、p38、p-p38、Cyt c、Bax、Caspase-9、cleaved-Caspase-3表达水平升高,Bcl-2表达水平降低（P<0.05）。NAC干预后降低了大鼠睾丸组织p-ASK1、MKK7、p-JNK、Caspase-9、cleaved-Caspase-3蛋白表达水平（P<0.05）。结论:（1）ROS过量生成是ACN诱导大鼠睾丸氧化损伤的主要原因;（2）ROS介导的ASK1-JNK/p38信号通路活化和线粒体凋亡通路的激活是ACN致睾丸细胞损伤的机制之一。
白羽[7]（2017）在《外源性硫化氢对丙烯腈诱导的大鼠星形胶质细胞毒性的影响及其机制研究》文中研究说明目的:硫化氢（hydrogen sulfide,H2S）作为继CO、NO后的第三种气体信号分子,有着重要的神经保护性和神经调节作用,在保护化学物和药物的神经损伤的应用中有着广阔前景。丙烯腈（acrylonitrile,AN）是一种高毒的有机腈,易经呼吸道、皮肤和胃肠道侵入人体,主要侵害神经系统。我们前期研究已经发现AN神经毒性与硫化氢、谷胱甘肽等含硫化合物代谢密切相关,因此,本实验以大鼠原代星形胶质细胞为研究对象,硫氢化钠（NaHS）为外源性H2S供体:1.初步探索外源性H2S对AN诱导的星形胶质细胞毒性的影响;2.进一步探索外源性H2S对AN诱导的细胞毒性影响的调控机制;3.为研发新的丙烯腈预防和治疗药物提供科学依据,以期寻找新的解毒方向。方法:1.采用AN处理原代培养的星形胶质细胞,NaHS为外源性H2S供体预处理细胞1 h。MTT法检测细胞活力和LDH漏出率检测细胞毒性评价NaHS对AN诱导的细胞毒性的影响。检测GSH和ROS含量的变化评价细胞氧化应激水平的改变。2.单纯应用NaHS处理细胞,检测自噬相关蛋白Beclin1、SQSTM1/P62、Atg5表达变化,免疫荧光方法观察星形胶质细胞中自噬颗粒变化,吖啶橙染色检测细胞酸性自噬泡,自噬双标腺病毒检测自噬流等方法检测NaHS对原代星形胶质细胞自噬水平的影响。3.单独应用NaHS处理细胞,采用细胞核质蛋白分离,免疫印迹法检测Nrf2、HO-1、γ-GCS的表达以及免疫荧光标记Nrf2观察其核转位情况来综合评价NaHS对细胞Nrf2/ARE信号通路的影响。4.通过自噬抑制剂和siRNA转染的方法抑制自噬或Nrf2的表达,MTT法和LDH漏出率法检测NaHS对AN诱导的细胞毒性效应的改变,探索调控自噬或Nrf2/ARE信号通路对NaHS诱导的保护效应的影响。结果:1.采用NaHS（0、200、400、800μM）预处理细胞1 h,与AN单独处理组相比,细胞活力明显升高,LDH渗出率下降。同时,细胞抗氧化物还原性GSH含量升高,氧化应激产物ROS水平降低。2.NaHS单独处理细胞1h后,自噬相关蛋白Beclin1,Atg5表达明显升高,而SQSTM1/P62表达下降,并具有浓度依赖性。同时单独NaHS处理组星形胶质细胞内LC3绿色荧光斑点明显增多,AO染色结果显示酸性自噬泡（红色荧光斑点）也明显增多,采用自噬双标腺病毒检测结果提示自噬流增强,说明NaHS可诱导星形胶质细胞自噬。3.单纯NaHS处理细胞,与对照组相比,细胞核内Nrf2分布增多,Nrf2/ARE通路下游蛋白HO-1、γ-GCS表达升高,说明外源性NaHS可引起Nrf2发生核转位。4.分别用药理学和基因学手段抑制自噬或Nrf2信号后,NaHS对AN毒性的拮抗效应减弱。结论:1.NaHS预处理对AN诱导的星形胶质细胞毒性有拮抗效应,并可改善AN诱导的氧化应激损伤。2.单纯NaHS处理可诱导细胞自噬的活化,同时也可诱导Nrf2发生核转位,激活Nrf2/ARE信号通路。3.抑制自噬或Nrf2表达,NaHS对AN毒性的拮抗效应均减弱,说明NaHS对AN毒性的保护效应与其对自噬以及Nrf2/ARE信号通路的激活均有一定的关联。这提示H2S可能成为一种新的丙烯腈中毒治疗药物。
潘丽[8]（2017）在《内质网应激在丙烯腈诱导大鼠肝脏损伤中的作用》文中研究指明目的:研究丙烯腈（acrylonitrile,ACN）诱导的大鼠肝脏氧化损伤对内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）信号通路,以及N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine,NAC）对ACN染毒引起肝脏损伤的干预作用,探讨ACN造成肝脏损伤毒性机制。方法:将50只体重为250300g的SPF级成年健康雄性SD大鼠,随机分为5组,每组10只,以12.5、25.0、50.0mg/kg ACN灌胃染毒,NAC组先用300.0mg/kgNAC灌胃30分钟后再灌50.0mg/kgACN,对照组以0.5ml/100g的玉米油灌胃,1次/天,6天/周,共计13周。染毒结束后,采用颈椎脱臼处死大鼠,取材,实验。（1）分离大鼠的肝脏组织并称重,计算肝脏的脏器系数;（2）采用分光光度法检测肝脏组织GSH含量,SOD活力,GSH-Px活力,CAT活力及MDA含量。（3）RT-PCR检测肝脏组织ERS相关基因GRP78、PERK、CHOP及caspase12 mRNA表达情况。（4）Western Blot检测肝脏组织内质网应激相关蛋白GRP78、eif2α、p-eif2α、CHOP及caspase12表达水平。结果:（1）中、高ACN染毒组大鼠肝脏脏器系数与对照组比较升高,差异均有统计学意义（P<0.05）。（2）低、中ACN染毒组大鼠肝脏GSH含量与对照组比较显着降低,差异均有统计学意义（P<0.05）;低ACN染毒组大鼠肝脏GSH-Px活力与对照组比较升高,差异具有统计学意义（P<0.05）;低、高ACN染毒组大鼠肝脏SOD活力及MDA含量与对照组比较均升高,差异均有统计学意义（P<0.05）;中、高ACN染毒组大鼠肝脏CAT活力与对照组比较降低,差异均有统计学意义（P<0.05）。NAC组大鼠肝脏GSH含量与高ACN染毒组比较升高,差异具有统计学意义（P<0.05）;MDA含量及SOD活力与高ACN染毒组比较降低,差异均有统计学意义（P<0.05）;GSH-Px活力与CAT活力与高ACN组比较升高,但差异均无统计学意义（P>0.05）。（3）RT-PCR结果,高ACN染毒组大鼠肝脏GRP78、PERK、CHOP、caspase-12 mRNA表达水平与对照组比较均升高,差异均有统计学意义（P<0.05）。NAC组大鼠肝脏PERK、CHOP、caspase-12 mRNA表达水平与高ACN染毒组比较均降低,差异均有统计学意义（P<0.05）;NAC组大鼠肝脏GRP78 mRNA表达水平与高ACN染毒组比较降低,但差异无统计学意义（P>0.05）。（4）Western Blot结果,高ACN染毒组大鼠肝脏GRP78、p-eif2α/eif2α比值、CHOP、caspase-12蛋白表达水平与对照组比较均升高,差异均有统计学意义（P<0.05）。NAC组大鼠肝脏GRP78、p-eif2α/eif2α、CHOP、caspase-12蛋白表达水平与高ACN染毒组比较均降低,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论:ACN慢性染毒可对大鼠肝脏产生氧化损伤,进而通过上调内质网应激相关基因GRP78、PERK、CHOP、caspase-12 mRNA和GRP78、p-eif2α/eif2α、CHOP、caspase-12蛋白表达水平激活ERS信号通路,NAC可减轻氧化损伤的程度而拮抗ERS信号通路,提示ROS在ACN诱导肝脏损伤和ERS信号通路中发挥重要作用。
罗波艳[9]（2017）在《iNOS/p38 MAPK信号通路在丙烯腈诱导大鼠脑组织损伤中的作用》文中研究指明目的:探究丙烯腈（acrylonitrile,ACN）对大鼠脑组织氧化损伤和i NOS/p38MAPK信号通路的影响,为进一步研究ACN的神经系统毒性提供依据。方法:选取50只SPF级健康成年雄性SD大鼠,全程饲养于甘肃中医药大学SPF级实验室,按体重随机分为5组,分别为对照组、低、中、高剂量组和NAC组,每组10只。适应性饲养一周后,低、中、高剂量组分别以12.5、25.0、50.0mg/kg ACN灌胃,对照组给予玉米油灌胃,NAC组先给予300.0mg/kg NAC灌胃,30分钟后再灌胃50.0mg/kg ACN,1次/天,6天/周,共灌胃13周。末次灌胃结束后,次日称重并颈椎脱臼处死大鼠。（1）剥离大鼠脑组织,计算脑组织脏器系数。（2）分光光度计和酶标仪检测大鼠脑组织氧化应激生化指标:超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）。（3）分光光度计和酶标仪检测大鼠脑组织一氧化氮（NO）、总一氧化氮合酶（tNOS）。（4）Western blot检测大鼠脑组织三种NOS合酶亚型(诱导型/免疫型一氧化氮（iNOS）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、神经型一氧化氮合酶（nNOS）蛋白的表达水平。（5）Real Time PCR检测大鼠脑组织p38 mRNA表达水平,并用Western blot检测大鼠脑组织p38 MAPK信号通路的激活及p-p38和p38蛋白表达水平。结果:（1）相比于对照组,ACN各剂量组大鼠脑组织脏器系数均显着降低（P<0.05）。相比于NAC组,高剂量组大鼠脑脏器系数降低（P>0.05）。（2）随着ACN染毒剂量增加,大鼠脑组织SOD和CAT水平逐渐降低,MDA含量呈剂量依赖性升高。单因素方差分析结果显示,与对照组相比较,高剂量组GSH-Px、SOD水平显着降低（P<0.05）,MDA含量增加（P<0.05）;中剂量组GSH含量降低（P<0.05）;低剂量组CAT含量降低（P<0.05）。与NAC组相比,高剂量组GSH含量和SOD、GSH-Px和CAT水平降低（P>0.05）,MDA含量增加（P>0.05）。（3）随着ACN染毒剂量增加,大鼠脑组织NO含量和tNOS活力均呈上升趋势,且高剂量组NO含量和t NOS显着高于对照组。NAC组NO含量与高剂量组比较升高（P>0.05）,tNOS水平降低（P>0.05）。（4）Western blot结果显示,相比于对照组,ACN高剂量组大鼠脑组织iNOS和nNOS蛋白表达水平显着升高（P<0.05）,eNOS蛋白表达水平显着降低（P<0.05）。与NAC组相比较,高剂量组iNOS蛋白表达水平显着升高（P<0.05）。（5）Real Time PCR结果显示,与对照组相比较,高剂量染毒组p38 mRNA表达水平升高（P<0.05）,且高于NAC组（P<0.05）。Western blot结果显示,相比于对照组,ACN高剂量组大鼠脑组织p-p38蛋白表达水平和p-p38/p38比值显着升高（P<0.05）,且显着高于NAC组（P<0.05）。结论:ACN慢性染毒可诱导大鼠脑组织发生氧化损伤,从而激活iNOS/p38MAPK信号通路,这可能是ACN致大鼠脑组织损伤的机制之一。
郝玲妹,曹利君,钟琦珑[10]（2017）在《职业接触丙烯腈对从业人员肝肾功能及血常规的影响》文中进行了进一步梳理目的探讨丙烯腈对从业人员健康的影响,为研究丙烯腈人体毒理机制提供科学依据。方法按年龄、是否吸烟及饮酒等因素匹配,选取居住在宁波市3年以上的465名职业接触丙烯腈人员及488名非职业接触丙烯腈人员共953名。采集血样并检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、谷氨酰转肽酶（GGT）、总胆红素（STB）,血尿素（UREA）、血尿酸（UA）、血肌酐（SCr）、总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、球蛋白（Glb）及白球比（A/G）,白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血小板（PLT）及血红蛋白（Hb）指标,比较非职业接触丙烯腈人员与职业接触丙烯腈人员之间各项指标的区别,并探索职业接触丙烯腈人员从业时间对各项指标的影响。结果职业接触丙烯腈人员的ALT（t=-2.77,P=0.006）、AST（t=-5.74,P<0.001）、UREA（t=3.51,P<0.001）、UA（t=-3.51,P<0.001）及SCr（t=-7.62,P<0.001）均显着高于对照组,而ALP（t=18.87,P<0.001）、Alb（t=6.92,P<0.001）、Glb（t=7.99,P<0.001）、A/G（t=11.93,P<0.001）及WBC（t=4.48,P<0.001）均低于对照组;接触时间与ALT（r=0.564,P<0.001）及AST（r=0.493,P<0.001）正相关。结论丙烯腈对职业接触人员的肝肾功能及血常规存在一定的影响。
二、丙烯腈对大鼠肝脏的毒性（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、丙烯腈对大鼠肝脏的毒性（论文提纲范文）
（1）丙烯腈亚急性染毒致大鼠肝损伤及其可能机制探讨（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要试剂与仪器 |
| 1.2 实验动物与分组 |
| 1.3 检测指标及方法 |
| 1.3.1 脏器系数: |
| 1.3.2 肝组织病理学观察: |
| 1.3.3 血清酶测定: |
| 1.3.4肝脂质过氧化指标测定: |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 脏器系数 |
| 2.2 ACN对大鼠血清酶的影响 |
| 2.3 ACN对大鼠肝组织脂质过氧化指标的影响 |
| 2.4 ACN致大鼠肝病理损伤 |
| 3 讨论 |
（2）PI3K/AKT信号通路在丙烯腈诱导的大鼠肝细胞凋亡中的作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 ACN概述 |
| 1.2 ACN的一般毒性 |
| 1.3 ACN的致癌性、致畸性和致突变性 |
| 1.4 ACN肝毒性和作用机制 |
| 1.5 PI3K/AKT信号通路和细胞凋亡 |
| 1.6 研究目的及意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要试剂和仪器 |
| 2.3 实验设计 |
| 2.4 实验方法 |
| 2.5 统计分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 ACN对大鼠肝脏器系数的影响 |
| 3.2 ACN致大鼠肝组织病理改变 |
| 3.3 ACN对大鼠肝脏相关血清酶活力的影响 |
| 3.4 TUNEL法检测大鼠肝细胞的凋亡 |
| 3.5 ACN对大鼠肝脏氧化应激指标的影响 |
| 3.6 ACN对大鼠肝脏PI3K/AKT信号通路的影响 |
| 3.7 ACN对大鼠肝细胞凋亡的影响 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 ACN致大鼠肝脏组织结构和功能损伤 |
| 4.2 ACN致大鼠肝细胞凋亡及其机制 |
| 第五章 结论 |
| 5.1 主要结论 |
| 5.2 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在学期间的研究成果 |
| 致谢 |
（3）芹菜素对丙烯腈致大鼠精子质量及睾丸ASK1-JNK/p38信号通路影响的干预作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 ACN概述 |
| 1.2 ACN的生殖毒性 |
| 1.3 ACN致生殖损伤的机制 |
| 1.4 AP概述 |
| 1.5 AP的生物学作用 |
| 1.6 研究目的和意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 实验仪器与试剂 |
| 2.3 实验方案及技术路线 |
| 2.4 实验方法 |
| 2.4.1 动物分组及给药 |
| 2.4.2 体重及脏器系数的测定 |
| 2.4.3 精子相关实验 |
| 2.4.4 睾丸组织病理切片制备 |
| 2.4.5 睾丸组织标志酶测定 |
| 2.4.6 氧化应激相关指标测定 |
| 2.4.7 实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测相关基因表达水平 |
| 2.4.8 蛋白免疫印迹（Western Blot）检测相关蛋白表达水平 |
| 2.4.9 TUNEL法检测大鼠睾丸细胞凋亡 |
| 2.4.10 统计分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 大鼠一般情况和脏器系数变化 |
| 3.2 AP对 ACN致大鼠精子损伤的干预作用 |
| 3.2.1 大鼠精子密度的变化 |
| 3.2.2 大鼠精子活动度的变化 |
| 3.2.3 大鼠精子运动参数的变化 |
| 3.2.4 大鼠精子形态的变化 |
| 3.2.5 大鼠精子DNA完整性的变化 |
| 3.3 AP对 ACN致大鼠睾丸损伤的干预作用 |
| 3.3.1 大鼠睾丸组织形态的变化 |
| 3.3.2 大鼠睾丸标志酶的变化 |
| 3.4 AP对 ACN致大鼠睾丸损伤干预作用的机制 |
| 3.4.1 大鼠睾丸组织氧化应激相关指标的变化 |
| 3.4.2 ASK1-JNK/p38 信号通路 |
| 3.4.3 大鼠睾丸组织细胞凋亡 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 大鼠一般情况 |
| 4.2 AP对 ACN致大鼠精子质量损伤的干预作用 |
| 4.2.1 大鼠精子密度和活动度的变化 |
| 4.2.2 大鼠精子运动参数的变化 |
| 4.2.3 大鼠精子形态的变化 |
| 4.2.4 大鼠精子DNA完整性的变化 |
| 4.3 AP对 ACN致大鼠睾丸损伤的干预作用 |
| 4.3.1 大鼠睾丸组织形态的变化 |
| 4.3.2 大鼠睾丸标志酶的变化 |
| 4.4 AP对 ACN致大鼠睾丸损伤干预作用的机制 |
| 4.4.1 睾丸组织氧化应激相关指标的变化 |
| 4.4.2 ASK1-JNK/p38 信号通路相关基因和蛋白的变化 |
| 4.4.3 睾丸细胞凋亡相关指标的变化 |
| 第五章 结论 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 研究不足与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在学期间研究成果 |
| 致谢 |
（4）丙烯腈诱导的氧化应激对大鼠肝脏内质网应激信号通路的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 (Materials and methods) |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 氧化还原相关酶的测定 |
| 1.4 RT-PCR检测步骤 |
| 1.5 Western Blot检测步骤 |
| 1.6 统计分析 |
| 2 结果 (Results) |
| 2.1 ACN染毒及NAC干预对大鼠肝脏抗氧化能力及脂质过氧化的影响 |
| 2.2 ACN染毒及NAC干预对大鼠肝脏ERS相关基因表达水平的影响 |
| 2.3 ACN染毒及NAC干预对大鼠肝脏ERS相关蛋白表达水平的影响 |
| 3 讨论 (Discussion) |
（5）苯乙基异硫氰酸酯对丙烯腈致糖尿病鼠急性毒性的影响及其机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 异硫氰酸酯类天然活性产物 |
| 1.1.1 异硫氰酸酯类来源及理化性质 |
| 1.1.2 异硫氰酸酯的吸收与代谢 |
| 1.1.3 异硫氰酸酯的化学预防作用 |
| 1.1.3.1 异硫氰酸酯对重金属所致化学损伤的拮抗作用 |
| 1.1.3.2 异硫氰酸酯对肝毒物所致化学损伤的拮抗作用 |
| 1.1.3.3 异硫氰酸酯对化学毒物所致的糖代谢紊乱拮抗作用 |
| 1.1.3.4 异硫氰酸酯对其他化学毒物损伤的拮抗作用 |
| 1.1.4 异硫氰酸酯的化学预防机制 |
| 1.2 糖尿病对环境化学毒物的易感性特征改变的影响 |
| 1.2.1 糖尿病概述 |
| 1.2.2 糖尿病对环境化学毒物的易感性特征 |
| 1.2.3 糖尿病改变环境化学毒物毒性的可能机制 |
| 1.3 丙烯腈 |
| 1.3.1 丙烯腈概述 |
| 1.3.2 丙烯腈的代谢 |
| 1.3.3 丙烯腈急性毒性 |
| 1.3.4 丙烯腈其他毒性 |
| 1.3.5 丙烯腈与细胞色素c氧化酶 |
| 1.3.6 丙烯腈与脂质过氧化 |
| 1.4 CYP2E1 |
| 1.4.1 CYP2E1概述 |
| 1.4.2 糖尿病与细胞色素P4502E |
| 1.4.3 丙烯腈与细胞色素P4502E |
| 1.5 研究内容 |
| 1.5.1 研究目的及意义 |
| 1.5.2 技术路线及实验方法 |
| 第二章 天然产物PEITC对丙烯腈染毒的STZ诱导型糖尿病大鼠急性毒性的影响 |
| 2.1 实验材料和仪器 |
| 2.1.1 化学试剂 |
| 2.1.2 实验仪器及设备 |
| 2.1.3 实验室常用试剂配制 |
| 2.1.4 实验动物 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 STZ诱导型糖尿病大鼠模型建立 |
| 2.2.2 实验处理 |
| 2.2.3 对硝基苯酚法检测肝微粒体CYP2E1活性 |
| 2.2.4 紫外分光光度法检测脑和肝细胞色素c氧化酶活性 |
| 2.2.5 二硫代二硝基苯甲酸法检测脑组织GSH含量 |
| 2.2.6 分光光度法检测脑GST活性 |
| 2.2.7 二氯荧光素探针法检测脑组织ROS含量 |
| 2.2.8 BCA蛋白浓度定量 |
| 2.2.9 组织总蛋白抽提 |
| 2.2.10 蛋白质免疫印迹法 |
| 2.2.11 数据统计分析 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 PEITC对丙烯腈染毒的STZ诱导型糖尿病大鼠行为特征的影响 |
| 2.3.1.1 对抽搐率和抽搐开始时间的影响 |
| 2.3.1.2 对翻正反射消失率和翻正反射消失时间的影响 |
| 2.3.1.3 对死亡率和死亡时间的影响 |
| 2.3.2 PEITC对丙烯腈染毒的STZ诱导型糖尿病大鼠CYP2E1活性和蛋白表达的影响 |
| 2.3.3 PEITC对丙烯腈染毒的STZ诱导型糖尿病大鼠脑和肝细胞色素c氧化酶的影响 |
| 2.3.4 PEITC对丙烯腈染毒的STZ诱导型糖尿病大鼠氧化应激指标的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 PEITC对丙烯腈染毒的糖尿病db/db小鼠急性毒性的影响 |
| 3.1 实验材料和仪器 |
| 3.1.1 实验动物 |
| 3.1.2 实验试剂 |
| 3.1.3 实验仪器及设备 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 实验动物处理 |
| 3.2.2 实验动物分组 |
| 3.2.3 检测方法 |
| 3.2.4 数据统计分析 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 PEITC对丙烯腈染毒的糖尿病db/db小鼠行为特征的影响 |
| 3.3.2 PEITC对丙烯腈染毒的糖尿病db/db小鼠肝CYP2E1活性和蛋白表达的影响 |
| 3.3.3 PEITC对丙烯腈染毒的糖尿病db/db小鼠脑和肝CcOx活性的影响 |
| 3.3.4 PEITC对丙烯腈染毒的糖尿病db/db小鼠氧化应激指标的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 英文缩写索引 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文及参加的学术会议 |
（6）丙烯腈对大鼠精子质量及睾丸ASK1-JNK/p38信号通路的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 ACN概述 |
| 1.2 ACN致癌性、致畸性、致突变性 |
| 1.3 ACN生殖毒性 |
| 1.4 ACN致生殖损伤的分子机制研究 |
| 1.5 MAPK信号通路与细胞凋亡 |
| 1.6 NAC的抗氧化作用 |
| 1.7 本研究的目的及意义 |
| 技术路线图 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 第三章 结果 |
| 第一节 ACN致大鼠生殖损伤毒性表现 |
| 1.1 ACN致大鼠一般毒性 |
| 1.2 ACN致大鼠睾丸病理损伤 |
| 1.3 ACN致大鼠睾丸标志酶改变 |
| 1.4 ACN对大鼠精子质量的影响 |
| 1.5 ACN致大鼠血清性激素水平改变 |
| 第二节 ACN致大鼠生殖损伤的机制研究 |
| 2.1 ACN对大鼠睾丸脂质过氧化指标的影响 |
| 2.2 ACN激活大鼠睾丸ASK1-JNK/p38信号通路 |
| 2.3 ACN致大鼠睾丸细胞凋亡 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 ACN致雄性大鼠生殖损伤模型构建 |
| 4.2 ACN致大鼠睾丸标志酶活性变化 |
| 4.3 ACN影响大鼠精子质量 |
| 4.4 ACN致大鼠血清性激素水平变化 |
| 4.5 ACN诱导大鼠睾丸组织氧化应激 |
| 4.6 ACN诱导的氧化应激激活大鼠睾丸ASK1-JNK/p38信号通路 |
| 4.7 ACN诱导大鼠睾丸细胞凋亡及其调控机制 |
| 第五章 结论 |
| 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 在学期间研究成果 |
| 致谢 |
（7）外源性硫化氢对丙烯腈诱导的大鼠星形胶质细胞毒性的影响及其机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写索引 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 硫化氢 |
| 1.1.1 硫化氢概述 |
| 1.1.2 硫化氢的生理调节功能 |
| 1.2 丙烯腈 |
| 1.2.1 丙烯腈概述 |
| 1.2.2 丙烯腈毒性及其解毒剂 |
| 1.3 硫化氢与丙烯腈 |
| 1.3.1 硫化氢的神经保护性 |
| 1.3.2 丙烯腈与内源性H_2S代谢 |
| 1.4 硫化氢与自噬 |
| 1.4.1 硫化氢与自噬概述 |
| 1.4.2 硫化氢与神经系统自噬 |
| 1.4.3 硫化氢与心血管系统自噬 |
| 1.4.4 硫化氢与消化系统自噬 |
| 1.4.5 硫化氢与癌细胞自噬 |
| 1.4.6 硫化氢与其他组织自噬 |
| 1.5 硫化氢与Nrf2/ARE信号通路 |
| 1.6 研究内容 |
| 第二章 外源性硫化氢对丙烯腈诱导的原代星形胶质细胞毒性的影响 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验细胞 |
| 2.1.2 实验仪器及设备 |
| 2.1.3 实验药品及试剂 |
| 2.1.4 实验室常用试剂配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 原代SD大鼠星形胶质细胞培养 |
| 2.2.2 MTT法检测细胞活力 |
| 2.2.3 LDH法检测细胞毒性 |
| 2.2.4 细胞GSH检测 |
| 2.2.5 细胞ROS检测 |
| 2.2.6 数据统计分析 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 外源性硫化氢对丙烯腈诱导的星形胶质细胞活力和毒性的影响 |
| 2.3.2 外源性硫化氢对丙烯腈诱导的星形胶质细胞形态学的影响 |
| 2.3.3 外源性硫化氢对丙烯腈诱导的星形胶质细胞GSH的影响 |
| 2.3.4 外源性硫化氢对丙烯腈诱导的星形胶质细胞ROS的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 自噬在外源性H_2S拮抗AN诱导的细胞毒性中的作用研究 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 实验试剂 |
| 3.1.2 实验仪器 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 细胞全蛋白抽提 |
| 3.2.2 蛋白浓度测定 |
| 3.2.3 蛋白质免疫印迹法 |
| 3.2.4 免疫荧光检测细胞自噬 |
| 3.2.5 吖啶橙染色检测细胞自噬 |
| 3.2.6 自噬抑制剂调节细胞自噬 |
| 3.2.7 siRNA基因干扰细胞自噬 |
| 3.2.8 自噬双标腺病毒检测细胞自噬流 |
| 3.2.9 数据统计分析 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 外源性H_2S对星形胶质细胞自噬相关蛋白表达的影响 |
| 3.3.2 免疫荧光观察LC3B的表达和分布 |
| 3.3.3 吖啶橙染色检测外源性H_2S对细胞自噬的影响 |
| 3.3.4 蛋白免疫印迹法检测外源性H_2S对星形胶质细胞自噬流的影响 |
| 3.3.5 自噬LC3双标腺病毒检测外源性H_2S对细胞自噬流的影响 |
| 3.3.6 药理学抑制自噬后，外源性H_2S对AN损伤的细胞活力的影响 |
| 3.3.7 基因学干扰自噬后，外源性H_2S对AN损伤的细胞活力的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 Nrf2信号在外源性H_2S拮抗AN诱导的细胞毒性中的作用研究 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 实验试剂 |
| 4.1.2 实验仪器 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提 |
| 4.2.2 免疫荧光检测Nrf2核转位 |
| 4.2.3 siRNA基因干扰细胞Nrf2表达 |
| 4.2.4 数据统计分析 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 外源性H_2S诱导星形胶质细胞Nrf2发生核转位 |
| 4.3.2 外源性H_2S对星形胶质细胞Nrf2下游蛋白表达的影响 |
| 4.3.3 基因学干扰Nrf2后，外源性H_2S对AN损伤的细胞活力的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文及参加的学术会议 |
| 1. 发表和完成的学术论文 |
| 2. 参加的学术会议 |
（8）内质网应激在丙烯腈诱导大鼠肝脏损伤中的作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 概述 |
| 1.2 丙烯腈的一般毒性 |
| 1.3 丙烯腈的致癌性、致畸性、致突变性 |
| 1.4 丙烯腈的肝脏毒性 |
| 1.5 氧化应激、内质网应激、细胞凋亡的关系 |
| 1.5.1 氧化应激与内质网应激的关系 |
| 1.5.2 内质网应激与细胞凋亡之间的关系 |
| 1.6 NAC的抗氧化作用 |
| 1.7 本研究的目的及意义 |
| 技术路线图 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 实验动物分组及给药 |
| 2.3 实验材料及实验仪器 |
| 2.3.1 实验材料 |
| 2.3.2 实验仪器 |
| 2.4 体重、脏器称量及脏器系数计算 |
| 2.5 氧化还原相关酶的测定 |
| 2.6 RT-PCR检测步骤 |
| 2.7 Western Blot检测步骤 |
| 2.8 统计分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 大鼠体重、肝脏湿重及脏器系数的变化 |
| 3.2 ACN对大鼠肝脏抗氧化能力及脂质过氧化的影响 |
| 3.3 NAC对ACN大鼠肝脏氧化损伤的干预作用 |
| 3.4 ACN对大鼠肝脏内质网应激相关基因表达水平的影响 |
| 3.5 NAC对ACN大鼠肝脏内质网应激相关基因表达的影响 |
| 3.6 NAC对ACN大鼠肝脏内质网应激相关蛋白表达水平的影响 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 ACN对动物体重、肝脏湿重及脏器系数的影响 |
| 4.2 ACN对大鼠肝脏的氧化损伤及NAC的干预作用 |
| 4.3 ACN介导的肝脏氧化损伤对内质网应激信号通路的影响 |
| 第五章 结论 |
| 不足之处及展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在学期间研究成果 |
| 致谢 |
（9）iNOS/p38 MAPK信号通路在丙烯腈诱导大鼠脑组织损伤中的作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 概述 |
| 1.2 ACN非神经系统毒性表现及致癌性 |
| 1.3 ACN神经系统毒性表现及作用机制 |
| 1.4 本研究的目的和意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 技术路线图 |
| 2.4 体重及脏器系数的测定 |
| 2.5 氧化还原相关指标的检测 |
| 2.6 硝化应激相关指标的检测 |
| 2.7 Western blot操作步骤 |
| 2.8 Real Time PCR检测步骤 |
| 2.9 统计分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 ACN对雄性大鼠体重和脑组织湿重及脏器系数的影响 |
| 3.2 ACN对雄性大鼠脑组织GSH、GSH-Px、SOD、MDA、CAT的影响 |
| 3.3 ACN对雄性大鼠脑组织NO含量和tNOS水平的影响 |
| 3.4 ACN对雄性大鼠脑组织iNOS、nNOS和eNOS蛋白表达水平的影响 |
| 3.5 ACN对雄性大鼠脑组织p38 mRNA和蛋白及其磷酸化蛋白表达水平的影响 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 ACN对大鼠体重和脑脏器系数的影响 |
| 4.2 ACN诱导大鼠脑组织发生氧化损伤 |
| 4.3 ACN诱导的氧化应激对iNOS/p38 MAPK信号通路的影响 |
| 第五章 结论 |
| 不足之处及展望 |
| 参考文献 |
| 在学期间的研究成果 |
| 致谢 |
| 附录 |
（10）职业接触丙烯腈对从业人员肝肾功能及血常规的影响（论文提纲范文）
| 1 对象与方法 |
| 1.1 对象 |
| 1.2 研究方法 |
| 1.3 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 基线资料 |
| 2.2 接触组与对照组肝肾功能指标比较 |
| 2.3 接触组与对照组血常规指标比较 |
| 2.4 观察指标与丙烯腈接触时间的相关分析 |
| 3 讨论 |
四、丙烯腈对大鼠肝脏的毒性（论文参考文献）
- [1]丙烯腈亚急性染毒致大鼠肝损伤及其可能机制探讨[J]. 郑爱,赵粉线,石影,郑蓉,党瑜慧,李芝兰. 毒理学杂志, 2020(01)
- [2]PI3K/AKT信号通路在丙烯腈诱导的大鼠肝细胞凋亡中的作用[D]. 郑爱. 兰州大学, 2019(09)
- [3]芹菜素对丙烯腈致大鼠精子质量及睾丸ASK1-JNK/p38信号通路影响的干预作用[D]. 石影. 兰州大学, 2019(09)
- [4]丙烯腈诱导的氧化应激对大鼠肝脏内质网应激信号通路的影响[J]. 潘丽,魏倩,高霞,石影,郑爱,薛红丽,李芝兰. 生态毒理学报, 2018(02)
- [5]苯乙基异硫氰酸酯对丙烯腈致糖尿病鼠急性毒性的影响及其机制研究[D]. 董颖. 江苏大学, 2018(02)
- [6]丙烯腈对大鼠精子质量及睾丸ASK1-JNK/p38信号通路的影响[D]. 魏倩. 兰州大学, 2018(11)
- [7]外源性硫化氢对丙烯腈诱导的大鼠星形胶质细胞毒性的影响及其机制研究[D]. 白羽. 江苏大学, 2017(01)
- [8]内质网应激在丙烯腈诱导大鼠肝脏损伤中的作用[D]. 潘丽. 兰州大学, 2017(04)
- [9]iNOS/p38 MAPK信号通路在丙烯腈诱导大鼠脑组织损伤中的作用[D]. 罗波艳. 兰州大学, 2017(04)
- [10]职业接触丙烯腈对从业人员肝肾功能及血常规的影响[J]. 郝玲妹,曹利君,钟琦珑. 上海预防医学, 2017(01)