一、制备复合生长因子的缓释微球并考察其对细胞的影响（论文文献综述）
刘良乐[1]（2021）在《新型复合释氧支架的构建及促进大鼠脊髓损伤修复的实验研究》文中研究表明研究背景:脊髓损伤后复杂的微环境变化,使得内源性修复再生的能力非常有限。虽然组织工程材料的植入在治疗脊髓损伤实验中取得了一定的进展,然而,局部损伤部位的缺氧、缺血影响了细胞的存活,也严重制约了组织工程材料的植入修复效果。因此,如何改善局部缺氧,减轻局部继发性组织损害,促进神经修复已成为学者关注的焦点。目的:本研究旨在前期研究基础上构建一种新型复合释氧支架,测定其释氧特性、对细胞存活增殖的影响,同时将其植入大鼠脊髓损伤部位,探究其对脊髓功能修复的效果,为新型释氧支架的研发与临床转化提供一定的实验基础。方法:1.构建新型复合释氧支架:首先采用双乳化法以CPO和PLGA为原材料制备缓释微球,然后搭建自组装多肽水凝胶,接着将释氧微球按比例均匀混入凝胶中,即可获得新型复合释氧支架。通过扫描电镜观察支架的微观形态,测定其释氧曲线。2.释氧支架对细胞存活与增殖的影响:在1%低培养氧箱中,培养含GFP-MSCs的释氧支架材料,观察细胞的存活情况;CCK法测定细胞的活性、增殖情况。3.释氧支架对大鼠脊髓损伤的修复作用:首先建立大鼠急性脊髓损伤模型,在缺损处植入释氧支架,于术后12内周行大鼠运动功能BBB评分,并取材行组织学和免疫学检测。结果:1.释氧微球直径约275μm～600μm,平均329.5±35.2μm,在光镜下呈圆形、不透明和淡黄色形态,在扫描电镜下呈球形、多孔的形态,通过显微切割,可见CPO均匀分布于PLGA中。在扫描电镜下,可见大小不一的微球均匀分布于多肽水凝胶中,构成复合释氧支架。2.新型释氧支架释氧持久而稳定,时间超过3周,约在12天后达到一个平台期。3.低氧培养下,可见GFP-MSCs黏附并分布于支架的各个层面,生长良好。在7、14、21天,支架组细胞增殖活性显着优于低氧凝胶组和低氧细胞组（P<0.05）。4.支架材料植入脊髓损伤区域12周后,大鼠BBB评分达到11.8±1.26,优于SCI组和凝胶组（P<0.05）;支架组HE染色显示材料空腔显着缩小;免疫荧光染色显示支架组NF增加,GFAP下降;vwf染色显示支架组新生血管增加,均优于其他两组（P<0.01）。结论:1.本实验通过双乳化法制备了 PLGA-CPO释氧微球,并进一步复合自组装多肽水凝胶,构建了新型复合释氧支架。2.新型复合释氧支架具有良好的释氧性能,释氧时间超过3周,能满足细胞低氧存活、增殖的要求。3.新型复合释氧支架能够缓解局部组织缺氧状态,促进神经纤维和血管再生,从而改善脊髓损伤后大鼠后肢运动功能。
李勋[2]（2019）在《局麻药罗哌卡因缓释微球的制备和应用研究》文中提出局部麻醉药罗哌卡因广泛用于外科手术中区域阻滞、术后镇痛以及慢性疼痛控制等适应症。但由于其半衰期短,单次注射难以达到期望的镇痛时间,临床上常通过频繁多次给药以及导管植入等方式来延长局部镇痛效果,这会造成患者顺应性差以及感染等风险。针对此问题,科学工作者对罗哌卡因缓释微球做了大量的研究工作,仍然存在以下问题难以解决:微球粒径不均一,载药率偏低;释放行为不理想等。为了克服这些关键问题,本论文通过快速膜乳化技术结合单乳法,优化了制备过程的处方工艺参数,并研究了其内在的科学规律与原理,制备了粒径均一性好、载药率和包埋率高、药物释放速率可控的载罗哌卡因缓释微球。具体研究内容分为以下四个部分。（1）针对传统技术制备局麻药缓释微球粒径不均一的问题,采用快速膜乳化技术结合单乳法,考察了过膜压力、过膜次数、聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）浓度、PLGA分子量、外水相pH值、乳液制备方式、固化方式等因素对微球性质的影响,最终制备得到了粒径均一、包埋率高、低突释的载罗哌卡因微球。（2）在上述工艺优化的基础上,系统地探讨了不同固化方法（真空负压与常温常压）对微球性质的影响。研究表明,常温常压条件制备的微球内部呈“蜂窝状”结构,突释较高,包埋率偏低。这是由于固化时间较长,乳滴内部的罗哌卡因逐渐形成晶体并逃逸至外水相引起的。在真空负压条件下制备的微球,突释较低,包埋率高,体外释放可以保持匀速释放。这是由于固化时间短,乳滴快速形成微球。罗哌卡因来不及形成晶体逃逸,与PLGA共同形成微球骨架。（3）系统地考察了使用不同端基的PLGA（端羟基、端羧基、端酯基）对于制备罗哌卡因微球的包埋率、体外释放、药代动力学、药效学等的影响。结果表明端羧基PLGA制备的载罗哌卡因微球包埋率高于端羟基与端酯基制备的微球,突释要低于端羟基与端酯基制备的微球。进一步在微观水平上,通过石英晶体微天平、原子力显微镜、pH探针等进行分析,研究表明PLGA的端基与罗哌卡因之间产生的吸附作用力的差异是导致微球性质不同的原因。随后在分子水平上,通过密度泛函计算与前线分子轨道理论确定了分子间反应活化中心,佐证了以上结论。（4）针对临床潜在的应用适应症,建立了 SD大鼠神经阻滞麻醉模型和豚鼠局部浸润麻醉模型。对上述最优处方工艺下制备得到的罗哌卡因载药微球进行了药效行为学的评价。研究表明罗哌卡因载药微球可以显着延长局部镇痛时间。随后在体外细胞水平以及体内组织、血液生化水平上进行了载罗哌卡因微球的安全性评价。结果表明载罗哌卡因微球不会引起神经损伤以及局部组织炎症,对主要脏器也不会产生毒性。本文通过快速膜乳化技术结合单乳法,使罗哌卡因参与微球骨架的形成,制备了高载药率、粒径均一、释放行为趋近于零级释放的载罗哌卡因缓释微球,延长了局部镇痛效果。通过分析处方工艺参数、研究不同固化方法、PLGA端基的呈球机理,为小分子药物的包埋提供了理论基础。
孙迪[3]（2019）在《20（S）-原人参二醇纳米脂质载体凝胶的制备及其用于糖尿病溃疡有序化恢复的研究》文中研究说明目的:针对目前用于促进创面修复和无瘢痕愈合研究的治疗机制单一,无法满足糖尿病溃疡愈合中四个复杂的生物学过程,本研究提出有序化恢复理念并设计20（s）-原人参二醇纳米脂质载体凝胶递药系统,利用载体分别在炎症期,增殖期以及重塑期的协同作用,实现创面有序化恢复,最终达到无瘢痕的愈合效果。方法:通过粒径仪,差式热量扫描仪、扫描电镜,冷冻扫描电镜等考察载体的粒径,载药能力及在硅酮弹性体中的分布状态;通过体外释放模拟载体在创面部位的药物释放行为;通过体外细胞实验检测其对炎症细胞、血管内皮细胞生物学功能的影响,同时建立糖尿病小鼠（db/db）全层伤口模型,借助组织病理学方法评估载体对伤口炎症期炎症细胞浸润,增殖期血管生成及重塑期胶原沉积的影响。结果:相对于PPD溶液组来说,PPD-N（p<0.01）和PPD-NS（p<0.05）中NO含量显着性降低;在细胞迁移实验中,PPD-N和PPD-NS处理组面积缩小的程度更加明显。在48h时,PPD-NS组的划痕面积已经基本愈合,而PPD溶液组的闭合率仅达到56.89±5.81%;PPD-N组的血管节点数显着性增多,尤其是PPD-NS组,其血管节点数最多;体内组织切片结果显示,相对于PPD溶液组,PPD-NS组炎症期炎症细胞数量显着性减少,增殖期血管新生密度显着增加,重塑期胶原围绕着皮肤附属器环状排列。结论:PPD-NS具有良好的体外抗炎和促血管生成能力,且由于PPD纳米脂质载体和硅酮弹性体的协同作用,共同减少了体内炎症期炎症细胞浸润密度,促进增殖期血管再生和调节重塑期胶原沉积,使创面的炎症期、增殖期和重塑期均顺利进行,实现了糖尿病溃疡的有序化恢复,最终达到了无瘢痕的愈合效果,这为临床上糖尿病溃疡的治疗提供了新的思路。
陈顺玉[4]（2018）在《可作为药物载体的改性聚乳酸微球支架的制备及性能研究》文中指出聚乳酸是一种人工合成的脂肪族聚酯类物质,由于具有较低的细胞毒性,良好的生物相容性和生物可降解性等优点而被美国食品药品监督管理局（FDA）认定为最有前途的高分子材料之一并在生物医学领域得到了广泛的应用。聚乳酸微球是理想的药物和细胞的微载体,可用于负载药物和组织修复。载药微球作为组织工程支架的优势在于可通过简单的注射方式直接将其植入体内而无须进行手术治疗,大大降低手术难度,减少手术创伤,且药物在病灶部位的持续缓慢释放不仅可促进组织的修复而且还可避免药物所带来的毒副作用,在不规则形状或微小骨缺损的修复和再生方面具有很大的应用潜能。但是,聚乳酸是一种高疏水性物质,表面缺乏细胞特异性识别位点,生物活性低,降解周期难以控制,降解过程中生成的酸性产物会使植入部分出现非感染性炎症反应,且缺乏能与药物相互作用的活性官能团,对亲水性药物负载率低,这些性能上的缺陷使得聚乳酸微球作为细胞和药物的载体在组织工程领域的进一步应用受到一定的限制,因此必须通过适当的改性来提高其性能。本篇论文主要研究聚乳酸微球支架的改性方法及改性对其生物医学性能（如生物活性、载药性能和药物缓释性能）的影响,开展的研究工作的主要内容和结果如下:（1）根据聚乳酸分子富含酯基的结构特点及经典的酯类氨解反应的机理,以分子结构中带有多个氨基的乙二胺为改性剂。乙二胺分子可通过其含有的其中一个氨基与聚乳酸分子链中的酯基发生氨解反应形成酰胺键而固定在聚乳酸分子链上,同时保留其另一个氨基以游离的形式存在,从而在聚乳酸分子中引入亲水性的氨基基团,得到生物活性提高的氨基化改性聚乳酸（EPLA）。核磁共振波谱、红外吸收光谱、X射线光电子能谱及凝胶渗透色谱等方法的表征结果验证了聚乳酸与乙二胺之间氨解反应的进行。以EPLA为原料,1,4-二氧六环为溶剂,得到的溶液在甘油的分散作用下形成稳定的乳液,将乳化体系置于-15℃下进行相分离最终可获得整体得到改性的EPLA微球。扫描电子显微镜和静态水接触角测定仪对微球的表征结果表明氨解时间、乙二胺溶液的浓度及用量等因素均会对微球的表观形貌、结构和表面亲水性能产生影响,在适宜的条件下可制备出具有网状纳米纤维结构的微球。通过体外模拟矿化实验的研究发现,EPLA纳米纤维微球由于实现了从结构和化学组成两个方面对天然细胞外基质的模拟,因此生物活性与表面光滑未经改性的聚乳酸微球相比有了很大程度的提高。（2）基于EPLA纳米纤维微球高孔隙率、大比表面积的结构特点和强的吸附性能,以及含有可与药物相互作用的氨基活性基团,以亲水性的阿仑膦酸钠（AL）为模型药物,采用简单易行的浸渍吸附法来制备EPLA/AL载药微球,并采用扫描电子显微镜、红外吸收光谱、X-射线粉末衍射分析和热重分析法对载药微球进行表征,结果表明EPLA微球实现了对阿仑膦酸钠药物的有效负载。应用紫外分光光度计对载药前后药物溶液浓度的测定来计算微球的载药量,系统地研究了载药的温度、时间、微球的用量以及阿仑膦酸钠药物溶液的初始浓度、pH值等因素对微球载药量的影响并确定了最佳的载药条件。通过对在最佳载药条件下制备的载药微球进行体外药物释放实验研究发现,由于EPLA纳米纤维微球具有强吸附性能,且纤维表面的氨基与阿仑膦酸钠药物分子之间存在氢键及静电相互作用,因此其载药能力和对药物的缓释性能相对于表面光滑未经改性的聚乳酸微球有了很大程度的提高。（3）以EPLA微球表面的氨基为活性位点吸附溶液中的Ca2+,通过原位仿生矿化沉积的方法在微球的表面生长一层纳米羟基磷灰石晶体（nHA）来制备EPLA/nHA复合微球,分析了羟基磷灰石晶体在微球表面的形成机理并详细探讨了其形成条件。研究发现,硝酸钙与磷酸氢二钾溶液的浓度、pH值以及微球在溶液中的浸渍时间等因素均能影响羟基磷灰石的形成及其形貌和结构。以AL为模型药物制备了EPLA/nHA/AL载药微球并研究了药物溶液的初始浓度、载药时间等因素对载药量的影响。体外药物释放实验的研究表明由于HA与AL药物分子之间存在强的键合作用,因此EPLA/nHA复合微球对AL药物具有极强的负载能力和优异的缓释性能。（4）以表面氨基作为进一步反应的活性位点,通过戊二醛交联剂的作用将明胶生物大分子物质固定在EPLA微球的表面制备了 Gelatin-g-EPLA复合微球。采用扫描电子显微镜、红外吸收光谱、X射线光电子能谱等方法来验证明胶在EPLA微球表面的接枝改性。利用EPLA纳米纤维微球具有的强吸附性能及微球表面的氨基基团与布洛芬（IBU）分子中的羧基间存在的相互作用,通过简单的浸渍吸附法来制备EPLA/IBU载药微球,并在其表面包裹一层明胶得到Gelatin-g-EPLA/IBU缓释微球。研究发现,Gelatin-g-EPLA复合微球与EPLA微球相比具有更好的生物活性和药物缓释性能。
金政,刘美华,刘振梅,赵东宇,白续铎,赵凯[5]（2015）在《壳聚糖缓释体系研究进展》文中指出综述了壳聚糖在缓释系统方面的最新研究进展。包括壳聚糖衍生物缓释体系的研究、壳聚糖缓释体系在医药系统的应用和吸附-控释复合体系的研究,重点介绍了壳聚糖衍生物缓释体系的研究,壳聚糖衍生物缓释体系分为壳聚糖衍生物缓释微球、壳聚糖纳米粒、壳聚糖缓释片、壳聚糖缓释微囊、壳聚糖缓释膜和壳聚糖水凝胶缓释体的研究等六个部分。壳聚糖缓释体系作为一项新技术在医药体系具有广泛的应用前景。
任玮[6]（2014）在《VEGFF-P（HBHO）NPs缓释微球的制备、性能及生物学活性检测》文中研究表明关节软骨的损伤修复一直是困扰着医学的一大难题。而组织工程的出现及发展使关节软骨的修复成为可能。目前在骨组织工程中，载体支架、种子细胞和生物活性因子已成为公认的三个最重要因素。生物活性因子大多属于蛋白质，极易被体内的蛋白酶所降解，短时间内就会被机体所代谢，因而不能充分满足自身组织修复的需要，研究生长因子缓释微球，为组织工程技术修复软骨损伤提供动力。研究聚羟基丁酸与羟基辛酸（PHBHOx）载血管内皮生长因子（VEGF）微球的三种制备技术，超声乳化法制备聚羟基丁酸与羟基辛酸（PHBHOx）载血管内皮生长因子（VEGF）纳米微球、并检测其体外性能及生物学活性。采用静电纺丝法、溶剂挥发法、W1/O/W2超声乳化法分别制备PHBHOx微球并加以比较，W1/O/W2超声乳化法制备PHBHOx载VEGF纳米微球并测其载药量、包封率，以pH7.4磷酸盐缓冲液为释放介质考察了微球的体外释放性能。采用浸泡（或滴加）方法将纳米微球胶体液运用于组织工程支架。采用三步梯度筛网法培养并分离纯化的肾微血管内皮细胞，得到较高纯度及足够数量的种子细胞并与缓释纳米微球共培养,MTT法检测细胞增殖状况,实验按照培养液中所含成分不同分为三组：培养液中加入单纯VEGF（A组）、加入VEGF-P（HBHO）NPs（B组）、对照组（C组）。其中前两组的有效浓度分别设为10、20、50ng/ml，并且每组在每个浓度分别设5个时间点进行检测，采用SPSS13.0统计学软件分析。结果显示,静电纺丝法易使VEGF变性且微球较大,粘连形成膜;溶剂挥发法容易微球粘连;超声乳化法微球呈球形，外观较圆整，颗粒分布较均匀，分散性较好;超声乳化法制备的纳米微球平均粒径为524.75±67.46nm，载药量为（1.257±0.024）10-3%，包封率为90.77±1.67%，体外释药率13天可达87.89%;微球运用于组织工程支架可见微球粘附于支架上，且分布较均匀;VEGF-P（HBHO）NPs具有良好的生物学活性,能显着促进肾微血管内皮增殖;VEFGF-P（HBHO）NPs对生长因子具有良好缓释作用,比单纯VEGF对肾微血管内皮细胞有更为明显的生物学效应,可以持续促进其增殖。
叶漫文[7]（2014）在《丝素蛋白—壳聚糖缓释微球的制备与表征》文中提出微球和微囊被广泛运用于生物材料和药剂学中,微球和微囊可以作为药物或者细胞生长因子的包裹材料,使药物或生长因子能够长时有效地缓慢释放,从而延长药物的作用时间,使药物能够靶向作用于细胞和组织。近些年来,缓释微球或者微囊的研究很多,许多研究者做了大量的工作,目前的研究重点在于选用毒副作用更小的生物材料,如何减少初期爆释和延长缓释周期等。丝素蛋白是由蚕丝脱胶而得到的天然高分子纤维蛋白,含量约占蚕丝的70%-80%,富含丙氨酸、丝氨酸、甘氨酸等18种氨基酸,具有良好的生物相容性、生物降解性、能够支持细胞的黏附、迁移和增殖。丝素蛋白有Silk Ⅰ和SilkⅡ两种构象,Silk Ⅰ=包括无序卷曲状和α螺旋状,Silk Ⅱ是反平行的β折叠状,p结构的增加使丝素蛋白构成的复合物更加稳定。丝素蛋白因其独特的加工成型性、生物相容性和生物降解性,广泛被用于组织工程中的支架材料和控释系统的载体中。但是以单一的丝素蛋白作为微球或微囊材料,没有克服初期爆释包载物,丝素蛋白较脆以及机械性能不佳等缺点。壳聚糖是由甲壳素脱乙酰得来,是天然中存在的唯一的碱性亲水多糖,壳聚糖的来源广泛,无毒性无不良反应,有良好的生物相容性、可降解性、良好的可塑性和抑菌性,抗凝血及促进伤口愈合的能力,被广泛的用于药剂学或者生物材料中作为缓释材料。单纯的壳聚糖作为载体时,其药物的装载率较低,为了克服这一缺点,有研究就将其它材料与壳聚糖复合,进行改性,对比单壳聚糖微球,复合微球的载药率更高以及其释放效率更佳。因此,我们猜想以丝素蛋白和壳聚糖复合相互改性,使得丝素蛋白和壳聚糖的理化性能更佳,能够减少包载物的初期爆释,微球的释放效率更佳。京尼平是一种天然交联剂,是从栀子中提取出来的,一种白色晶体,溶于水的具有双官能团的交联剂。当它与具有氨基的聚合物反应时,会从白色变成深蓝色,京尼平这种天然的交联剂比常用的交联剂,如戊二醛,毒性要小了近10000倍[12],H.C.Liang[13]等将壳聚糖微球注入到大鼠模型中发现以京尼平交联的微球比戊二醛交联的微球有更好的组织愈合性和更为缓慢的降解性,在药物缓释方面,以戊二醛交联白蛋白,多糖或者明胶制备的微球其生物相容性比京尼平交联制备的这些微球要差较多。并且有报道认为京尼平作为交联剂能有效地改进材料的机械性能,如以京尼平交联制备的丝素蛋白/壳聚糖海绵,其稳定性有了明显的提升而且具有较好的生物相容性。以京尼平交联制备的丝素蛋白/壳聚糖缓释微球并没有报道过。本课题以丝素蛋白,壳聚糖和京尼平作为合成微球的生物材料,研制新颖的缓释微球,并以牛血清白蛋白作为模型药物包载,对其表观,理化性能和缓释效能进行评价,为包载其它药物模型,细胞及动物实验提供实验数据。第一部分以京尼平交联的丝素蛋白-壳聚糖微球的制备与表征目的制备丝素蛋白-壳聚糖微球,考察微球的表观形态、粒径、溶胀率和表征微球特性,探索制备微球时,丝素蛋白与壳聚糖最佳的比例及交联剂京尼平最佳的量。方法1.以乳化交联法,京尼平为交联剂,按丝素蛋白和壳聚糖不同的比例（比例为壳聚糖：丝素蛋白=1：1,1：0.5,1：2）以及不同的京尼平质量（0.01g,0.05g,0.1g,0.5g,1g）进行交叉组合,制备丝素蛋白-壳聚糖微球；2.通过扫描电镜筛观察制备得出的微球形态,选出形态最佳的微球；3.以激光粒径分析仪分析微球的粒径；4.取干燥的质量Wd=0.1g的丝素蛋白-壳聚糖微球悬浮于装有5m1的去离子水离心管中,在摇床上以100r/min中温和地震动,然后每隔一段时间（0.5h,1h,2h,4h,6h,8h,10h）离心后,用滤纸擦拭溶胀微球表面的水分,立即称重质量为Ws,溶胀率公式如下：Esw（%）=[（Ws-Wd）/Wd]*100%平衡水含量公式如下：EWC（%）:[（Wc-Wd）/Wc]*100%Wc为溶胀的微球在平衡水含量时的质量,试验重复三次。5.X-射线衍射及傅里叶红外光谱对微球的物理化学性质进行表征分析。结果1.以京尼平1g,CS:SF=1:1；京尼平0.05g,CS:SF=1:1；京尼平0.5g,CS:SF=1:2；京尼平0.5g,CS:SF=1:0.5；京尼平0.1g,CS:SF=1:0.5,这五种比例制备出的微球,形态较为规则,表面较光滑,粒径分布均匀,其中以京尼平0.05g,CS:SF=1:1制备出微球,其表面形态最为平滑,规则,各个微球最为均一,单从形态学来看,推测可能以此种比例制备的微球最佳。2.激光粒径分析仪示五组微球粒径分别为（71.13±0.85μm）,（146.60±3.46μm）,（74.09±1.07μm）,（89.00±1.08μm）和（109.83±2.28μm）。3.所有制备出来的微球,在浸入去离子水6小时以后,其溶胀率都达到了平衡。五组微球的平衡水含量分别为60.10±0.48%,63.34±1.29%,58.33±0.35%,58.67±1.45%和59.60±2.19%,其中京尼平0.05g,CS:SF=1:1制备出的微球平衡水含量与其余四组微球平衡水含量有显着性差异（P<0.05）。4.傅里叶红外光谱分析证实,京尼平将丝素蛋白和壳聚糖的酰胺基Ⅱ（NH2）交联,证明了丝素蛋白和壳聚糖并不是简单的混合,而是以交联氨基的形式复合。此外,丝素蛋白与壳聚糖相互改性,丝素蛋白的结构从α螺旋状或者无序卷曲状改变为β折叠状。5.X-射线衍射分析证实结果与FTIR的检测结果一致,说明,丝素蛋白和壳聚糖不是简单的物理混合,它们通过京尼平的交联,发生一定上的结构变化,丝素蛋白从无序卷曲状或者α螺旋状转化为稳定的β折叠状,其结晶度和规整度得到了一定程度上的提高；丝素蛋白和壳聚糖之间发生了一些化学键的结合。结论以合适的比例混合丝素蛋白和壳聚糖,并加入一定剂量的京尼平,通过无机乳化交联法能够制备出物理化学性质较佳的丝素蛋白-壳聚糖微球。第二部分以京尼平交联包载牛血清白蛋白的丝素蛋白-壳聚糖微球的制备与表征目的以京尼平交联制备丝素蛋白-壳聚糖微球,BSA作为模型蛋白,评价丝素蛋白/壳聚糖微球的物理化学性质及缓释能力。方法1.以乳化交联法,京尼平为交联剂,加入不同质量的BSA（10mg,20mg,50mg）,制备缓释BSA的丝素蛋白-壳聚糖微球；2.通过扫描电镜观察微球表面形态并在有标尺的扫描电镜视野下,随机选择有代表性的区域,计算200个微球粒径,以统计学处理得出微球粒径；3.X-射线衍射,傅里叶红外光谱以及热重分析对微球表征分析;4.以BCA法测定三组微球的包封率,载药率：取适量制备微球时的离心液及洗涤液,用BCA微量蛋白测定法测定离心液及洗涤液中的BSA含量,按照如下公式计算微球的包封率和载药率。包封率=（投入BSA的量-离心液及洗涤液中BSA的量）/投入BSA的量*100%；载药率=（投入BSA的量-离心液及洗涤液中BSA的量）/微球质量*100%5.以BCA法测定三组微球21天的累积缓释率：称取含BSA1.5mg的微球粉末,悬于15m1离心管中,加入10mlPH值为7.4的PBS缓冲液,将离心管置于摇床中,摇床以水平式100r·min-1摇动,在第1,2,4,8,14和21天,取上清液20μl,以BCA微量蛋白测定法测定上清液中的BSA含量。累积释放率=上清液中BSA的释放量/微球中的含药量*100%结果1.以京尼平交联制备的丝素蛋白-壳聚糖微球,表面较光滑,为规则的球形大小均匀,微球稍有粘连,其中投入10mg的牛血清白蛋白合成的微球形态最为规则光滑。三组微球的粒径分别为7.84±0.97μm,7.53±1.15μm和6.52±0.92μm2.傅里叶红外光谱分析证实,京尼平将丝素蛋白和壳聚糖的酰胺基Ⅱ（NH2）交联,证明了丝素蛋白和壳聚糖并不是简单的混合,而是以交联氨基的形式复合,说明丝素蛋白与壳聚糖相互改性,丝素蛋白的结构从α螺旋状或者无序卷曲状改变为β折叠状。BSA与壳聚糖,丝素蛋白和京尼平间没有发生反应,BSA被包载进微球中。3.X-射线衍射分析证实,丝素蛋白和壳聚糖不是简单的物理混合,它们通过京尼平的交联,发生一定上的结构变化,丝素蛋白从无序卷曲状或者α螺旋状转化为稳定的β折叠状,其结晶度和规整度得到了一定程度上的提高；10mg组的BSA的特征峰消失,说明了BSA是以非晶状形态包载于微球中的,而50mg和20mg组有部分BSA特征峰未消失,可能是因为投药量较大,BSA没有完全包载进微球中并有大部分的BSA粘附于微球表面。4.热重分析证实,BSA被包载进丝素蛋白/壳聚糖微球中,BSA与壳聚糖,丝素蛋白和京尼平间没有发生反应。5.BCA微量蛋白测定,10mg,20mg和50mg微球组的包封率分别为50.16±4.32%,56.58±3.58%和42.19±7.47%,载药率分别为1.25±0.11%,2.83±0.18%和5.27±0.93%。21天的累积释放率分别为79.16±4.31%,75.2±2.53%和89.04%±4.68%。结论以京尼平交联制备的丝素蛋白-壳聚糖微球,随着BSA的投入量增加,包封率下降,当投入BSA的量过大时,会有较多的BSA粘附于微球表面。微球的缓释能力显着,缓释复合Higuchi方程。第三部分包载BSA的丝素蛋白-壳聚糖微球与纯壳聚糖微球的缓释效能对比研究目的对比包载BSA的丝素蛋白-壳聚糖微球和纯壳聚糖微球的缓释效能。方法1.以乳化交联法制备空白丝素蛋白-壳聚糖微球,包载10mg BSA的丝素蛋白-壳聚糖微球和纯壳聚糖微球；2.通过扫描电镜观察微球表面形态；3.以BCA法测定该两组载药微球的包封率,载药率和21天的累积缓释率。结果1.包载BSA丝素蛋白-壳聚糖和单纯壳聚糖微球比空白微球更加光滑完整,为规则的球形大小均匀,而空白微球稍有凹陷。2.以BCA法测得包载BSA的丝素蛋白-壳聚糖微球的包封率为50.16±4.32%,载药率为1.25±0.11%；纯壳聚糖微球的包封率为52.77±1.26%,载药率为2.64±0.06%。3.包载BSA的丝素蛋白-壳聚糖微球,在第一天爆释了总量的30.79±3.43%,而纯壳聚糖微球释放了39.53±1.76%。在第二十一天,丝素蛋白/壳聚糖微球总共释放了总量的75.20±2.52%,纯壳聚糖微球释放了83.57±2.33%。结论丝素蛋白-壳聚糖微球比单纯的壳聚糖微球的包封率和载药率要低一些,但是微球初期包载物的爆释量比单纯壳聚糖微球要低,丝素蛋白/壳聚糖微球的缓释性能比单纯的壳聚糖微球要更加平稳。
马立坤,叶鹏,黄文良,田仁元,邓江[8]（2014）在《骨形态发生蛋白2/聚乳酸缓释微球的制备及表征》文中研究指明背景:聚乳酸具有良好的生物相容性,是优良的药物缓释载体。目的:制备重组人骨形态发生蛋白2/聚乳酸缓释微球,考察其理化特性。方法:采用复乳溶剂挥发法制备重组人骨形态发生蛋白2/聚乳酸缓释微球,进行扫描电镜、激光粒度、Zeta电位、溶胀性能检测及采用ELISA试剂盒检测包封率、载药率及体外释药率。结果与结论:扫描电镜见重组人骨形态发生蛋白2/聚乳酸缓释微球微球近似圆形,形态较规则,分散性较好,表面光滑。激光粒度分析重组人骨形态发生蛋白2/聚乳酸缓释微球微平均粒径839.6 nm,Zeta电位（-32.93±3.74）mV,微球溶胀系数1.157±0.059,包封率及载药率分别为（88.943±2.878）%,（0.026±0.001）%;微球在第1天释药约10.199%,随后释药较恒定,至第19天累计释药率为54.643%。说明制备出的重组人骨形态发生蛋白2/聚乳酸缓释微球的粒径达到中华人民共和国药典第10版二部关于亚微球的定义标准及包封率不低于80%的要求,并且在体外具有很好的缓释功能。
柴雪[9]（2013）在《rhBMP2缓释微球的制备及其用于盖髓剂的实验研究》文中研究指明牙髓疾病治疗中活髓保存治疗是最符合生物学观点的方法，在其治疗中盖髓剂的作用至关重要，因此，盖髓剂的不断改进非常重要[1-2]。在目前所用的众多盖髓材料中，骨形态发生蛋白（Bone Morphogenetic Protein,BMP）是一直普遍关注的材料之一，尤其是BMP2因其与牙本质形成和牙齿发育形成关系最为密切而备受关注[3-4]。有报道认为BMP2用做盖髓治疗，短时期内便可形成大量修复性牙本质封闭露髓孔，有利于牙髓的恢复[5]。但是当BMP2单独在体内应用时，很快就会被稀释或是被蛋白酶破坏，对牙髓细胞的作用时间短，不能有效的发挥其应有的生物性能；而且不能为牙本质形成提供支架，使其在临床应用中受到很大的限制。近年来，随着以生物可降解聚合材料为载体制备微球技术的发展，对蛋白和多肽类运载系统的研究越来越多。其中聚乳酸-羟基乙酸共聚物〔poly（lactic-co-glycolicacid），PLGA〕因其生物相容性较好、可生物降解、无毒性；材料本身及其降解产物均对多肽类、蛋白等无明显的不良反应，而得到美国FDA的批准用于临床。以PLGA为载体包载BMP2制备缓释微球可以解决BMP2在应用时的不足，既能起到缓释作用；又可以保护相关因子的活性。本研究以牛血清白蛋白（Bovine SerumAlbumin,BSA）为模型蛋白，PLGA为载体材料，采用W/O/W复乳溶剂挥发法制备BSA-PLGA微球；通过改变影响微球制备的相关因素，结合对微球包封率，24h突释量和表观形态的观察，得出在BSA投药量为10mg，外水相PVA浓度为10g/L，NaCl浓度为50g/L，复乳的匀质速度为10000r/min时制备的微球24h突释量小，微球形态圆整粒径均匀，表面光滑，无粘连。实验二用实验一探索出的微球优化制备条件制备出rhBMP2-PLGA缓释微球，通过扫描电镜观察微球的表观形态并用马尔文激光粒度分析仪测定其粒径，通过ELISA法测定微球的包封率、载药量及体外释放第1d，3d，7d，14d，28d微球释放量。结果表明：优化工艺下制备的rhBMP2-PLGA微球冻干后呈白色粉末状，无塌陷现象；微球形态圆整均匀，表面光滑，无粘连；微球粒径分布呈正态分布，分布范围集中，大部分微球粒径分布在3um4um之间。rhBMP2-PLGA微球的包封率72.5%±4.17%，微球的载药率为0.38%±0.24%。rhBMP2-PLGA缓释微球体外释放1d时载有rhBMP2的微球释放量为19.36%±1.83%，表现为突释性，这主要是由于微球表面的药物释放所致，随后释放比较缓慢，但累计释放量持续增加，到28d时达到52.76%±3.7%。采用W/O/W复乳溶剂挥发法能够制备出粒径适宜，形态均匀完整的rhBMP2-PLGA缓释微球。rhBMP2-PLGA微球具有良好的缓释作用和生物活性，能够长时间的缓慢释放生长因子，是一种理想的生长因子载体和缓释系统。实验三以2条健康比格犬为实验对象，选取42颗牙齿，将42颗牙按随机数字表法随机分成7组（rhBMP2组，rhBMP2-PLGA微球组，胶原组，牙科专用抗生素组，抗生素﹢rhBMP2-PLGA微球混合组，胶原﹢rhBMP2-PLGA微球混合组，空白对照组），每组6颗牙。在实验牙的咬合面机械暴露牙髓1mm，并经过处理后将材料覆盖在露髓处，三个月后用MicroCT观察新形成的牙本质。结果表明：单纯使用rhBMP2可以观察到有完整的牙本质钙化桥生成，但量相对于其他组来说较少；单纯使用胶原也可生成完整的牙本质桥，表明胶原可以诱导牙髓细胞的分化和牙本质的生成；单独使用牙科专用抗生素时，生成牙本质的效果并不佳，说明抗生素对牙髓细胞无诱导作用；rhBMP2-PLGA单独用于盖髓时虽然没有复合牙科专用抗生素或胶原时生成的牙本质桥厚，但相对于单纯使用胶原生成的牙本质桥较厚。HE染色切片结果显示rhBMP2组、rhBMP2-PLGA组和胶原组的牙本质桥以骨样牙本质为主；而抗生素和rhBMP2-PLGA混合组与胶原和rhBMP2-PLGA混合组的牙本质桥以管样牙本质为主。所以复合牙科专用抗生素和rhBMP2-PLGA进行盖髓术后对牙髓细胞的诱导分化作用较其它组强，在相同时间内形成较厚且完整牙本质桥，具有良好的盖髓效果，为其用于临床提供可行性。
王世寿,武刚[10]（2013）在《肺部缓释微球治疗肺部疾病的性能及评价》文中研究表明背景:肺部因其特殊的生理结构而适合作为局部或全身用药的给药部位,而肺部缓释微球在肺部局部疾病治疗乃至全身疾病治疗方面的优越性尚缺乏更多的报道。目的:评价肺部缓释微球载体材料的释药性能以及临床给药途径的安全性,对比肺部缓释微球与其他肺部给药剂型的差异。方法:观察微球在肺部的分布及降解情况、肺组织的病理变化和连续给药对肺功能的影响。结果与结论:肺部缓释微球常用的材料有淀粉、聚乳酸等,具有生物可降解性、生物相容性和生物黏附性,并且缓释微球制备简单,对正常组织无损伤,安全性高,肺部缓释微球在体内有良好的肺靶向性,可提高药物的疗效,降低药物毒副作用,对肺组织无病理性损伤。
二、制备复合生长因子的缓释微球并考察其对细胞的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、制备复合生长因子的缓释微球并考察其对细胞的影响（论文提纲范文）
（1）新型复合释氧支架的构建及促进大鼠脊髓损伤修复的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 研究背景及意义 |
| 1.2 立项依据 |
| 1.3 前期研究基础 |
| 1.4 研究目的与内容 |
| 第二章 新型复合释氧支架的构建与释氧性能 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6 结论 |
| 第三章 新型复合释氧支架对细胞存活、增殖影响的实验研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.5 讨论 |
| 3.6 结论 |
| 第四章 新型复合释氧支架对大鼠脊髓损伤修复作用的实验研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.4 结果 |
| 4.5 讨论 |
| 4.6 结论 |
| 第五章 全文总结与展望 |
| 5.1 全文总结 |
| 5.2 展望 |
| 参考文献 |
| 综述 神经组织工程技术在脊髄损伤修复中的研究进展与展望 |
| 参考文献 |
| 附录一 中英文缩略词表 |
| 附录二 大鼠后肢BBB运动功能评分表 |
| 攻读博士期间主要成果 |
| 致谢 |
（2）局麻药罗哌卡因缓释微球的制备和应用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 引言 |
| 1.1 局部麻醉药罗哌卡因概述 |
| 1.1.1 疼痛与麻醉 |
| 1.1.2 局部麻醉药以及罗哌卡因的应用现状 |
| 1.2 局麻药缓释制剂的研究现状 |
| 1.2.1 缓释局麻药手术缝合线 |
| 1.2.2 缓释局麻药原位凝胶 |
| 1.2.3 缓释局麻药脂肪乳剂 |
| 1.2.4 缓释局麻药脂质体 |
| 1.2.5 缓释局麻药微球 |
| 1.3 缓释微球制剂的研究现状 |
| 1.3.1 制备微球制剂膜材的选择 |
| 1.3.2 缓释微球制剂的制备方法 |
| 1.3.3 微球的质量评价 |
| 1.4 立题依据 |
| 1.5 研究目标 |
| 第2章 快速膜乳化技术制备载罗哌卡因微球 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 实验材料与药品 |
| 2.2.2 实验仪器 |
| 2.2.3 载罗哌卡因缓释微球的制备 |
| 2.2.4 微球形貌的观察 |
| 2.2.5 微球粒径及其分布的测定 |
| 2.2.6 载药率及包埋率的检测方法 |
| 2.2.7 载药微球体外释放行为的评价 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 制备方法对微球性质的影响 |
| 2.3.2 膜乳化过程参数的影响 |
| 2.3.3 处方工艺参数对包埋率、释放行为的影响 |
| 2.3.4 制备不同粒径尺寸的微球 |
| 2.3.5 本章小结 |
| 第3章 固化方法对微球性能的影响以及机理分析 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.0 实验材料与药品 |
| 3.2.1 实验仪器 |
| 3.2.2 实验动物 |
| 3.2.3 载罗哌卡因微球的制备 |
| 3.2.4 微球形貌以及结构的观察 |
| 3.2.5 微球粒径及其分布的测定 |
| 3.2.6 载药率以及包埋率检测方法 |
| 3.2.7 载药微球释放行为的方法 |
| 3.2.8 微球内部结构变化的观察 |
| 3.2.9 X射线衍射检测药物的物理状态 |
| 3.2.10 差示扫描量热法的测定 |
| 3.2.11 紫外分光光度计测定罗哌卡因与PLGA的沉积速率 |
| 3.2.12 气相色谱法检测有机溶剂残留 |
| 3.2.13 药效行为学评价 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 固化方法对微球包埋率的影响 |
| 3.3.2 固化方法对微球的体外释放的影响 |
| 3.3.3 固化方法对微球的形貌以及结构的影响 |
| 3.3.4 固化方法对降解过程中微球形貌、内部结构的影响 |
| 3.3.5 固化方法对药物物理状态的影响 |
| 3.3.6 两种固化方法制备微球的药效学评价 |
| 3.3.7 加入预固化液进一步提高载药率 |
| 3.3.8 有机溶剂残留的检测 |
| 3.4 本章小结 |
| 第4章 PLGA端基对载药微球的性能影响及机理分析 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.0 实验材料与药品 |
| 4.2.1 实验仪器 |
| 4.2.2 实验动物 |
| 4.2.3 载罗哌卡因微球的制备 |
| 4.2.4 微球形貌的观察 |
| 4.2.5 微球粒径及其分布测定 |
| 4.2.6 载药率以及包埋率检测方法 |
| 4.2.7 载药微球体外释放方法 |
| 4.2.8 不同端基PLGA亲疏水性的测定 |
| 4.2.9 不同端基PLGA吸附罗哌卡因能力的测定 |
| 4.2.10 膜材吸附蛋白后表面形貌的观察 |
| 4.2.11 微球内部微环境pH值的检测 |
| 4.2.12 密度泛函与前线分子轨道的计算 |
| 4.2.13 药代动力学的检测 |
| 4.2.14 药效行为学的检测 |
| 4.2.15 血液生化指标的检测 |
| 4.2.16 不同端基PLGA安全性的评价 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 微球的理化性质 |
| 4.3.2 不同端基对体外释放行为的影响 |
| 4.3.3 不同端基对罗哌卡因的吸附性能 |
| 4.3.4 微球的内部微环境变化 |
| 4.3.5 密度泛函理论计算与前线分子轨道的分析 |
| 4.3.6 药代动力学 |
| 4.3.7 药效行为学 |
| 4.3.8 血液生化指标检测 |
| 4.3.9 不同端基PLGA引起注射部位的炎症反应 |
| 4.4 本章小结 |
| 第5章 罗哌卡因微球的药效学以及安全性评价 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验部分 |
| 5.2.0 实验材料与药品 |
| 5.2.1 实验仪器 |
| 5.2.2 实验动物 |
| 5.2.3 细胞培养 |
| 5.2.4 载罗哌卡因微球的制备 |
| 5.2.5 微球形貌的观察 |
| 5.2.6 微球粒径及其分布的测定 |
| 5.2.7 载药率以及包埋率的检测方法 |
| 5.2.8 载药微球的体外释放方法 |
| 5.2.9 药效学的评价 |
| 5.2.10 体外毒性的评价 |
| 5.2.11 体内安全性的评价 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 微球的理化性质 |
| 5.3.2 罗哌卡因微球的药效学评价 |
| 5.3.3 体外毒性的评价 |
| 5.3.4 体内安全性的评价 |
| 5.3.5 豚鼠局部浸润模型体内安全性评价 |
| 5.4 本章小结 |
| 第6章 结论与展望 |
| 6.1 本论文主要结论 |
| 6.2 本论文主要创新点 |
| 6.3 今后工作的建议 |
| 附录 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历及发表文章目录 |
（3）20（S）-原人参二醇纳米脂质载体凝胶的制备及其用于糖尿病溃疡有序化恢复的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词中英文对照表 |
| 引言 |
| 第一章 20(S)-原人参二醇纳米脂质载体凝胶检测方法的确定及处方前研究 |
| 1.1 仪器与试剂 |
| 1.1.1 试剂 |
| 1.1.2 仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 PPD含量测定方法的建立 |
| 1.2.2 PPD平衡溶解度的考察 |
| 1.2.3 PPD油水分配系数的考察 |
| 1.3 结果与讨论 |
| 1.3.1 PPD含量测定方法 |
| 1.3.2 PPD的平衡溶解度 |
| 1.3.3 PPD的油水分配系数 |
| 1.4 本章小结 |
| 第二章 20(S)-原人参二醇纳米脂质载体凝胶处方工艺研究 |
| 2.1 仪器与试剂 |
| 2.1.1 试剂 |
| 2.1.2 仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 PPD-纳米脂质载体评价指标 |
| 2.2.2 PPD-N处方优化 |
| 2.2.3 PPD-N制备工艺考察 |
| 2.2.4 PPD-N和硅酮弹性体比例筛选 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 PPD-N处方优化 |
| 2.3.2 正交试验法优化 PPD 纳米脂质载体处方 |
| 2.3.3 PPD-N 制备工艺考察结果 |
| 2.3.4 PPD-N 和硅酮弹性体比例筛选 |
| 2.3.5 PPD-NS 处方和制备工艺 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 20(S)-原人参二醇纳米脂质载体凝胶理化性质研究 |
| 3.1 仪器与试剂 |
| 3.1.1 试剂 |
| 3.1.2 仪器 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 PPD-纳米脂质载体粒径,多分散指数及电位研究 |
| 3.2.2 PPD-N和 PPD-NS形态研究 |
| 3.2.3 PPD-纳米脂质载体结晶性研究 |
| 3.2.4 PPD-纳米脂质载体包封率和载药量研究 |
| 3.2.5 PPD-N和 PPD-NS体外释放度研究 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 PPD-N 的粒径,粒度分布和电位 |
| 3.3.2 PPD-N和 PPD-NS的形态 |
| 3.3.3 PPD-纳米脂质载体的结晶性 |
| 3.3.4 PPD-纳米脂质载体的包封率和载药量 |
| 3.3.5 PPD-纳米脂质载体和 PPD-NS 的体外释放度 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 20(S)-原人参二醇纳米脂质载体凝胶药效学研究 |
| 第一节 体外药效学研究 |
| 4.1 仪器与试剂 |
| 4.1.1 试剂 |
| 4.1.2 仪器 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 细胞培养 |
| 4.2.2 RAW264.7 细胞毒性和 NO 含量研究 |
| 4.2.3 HUVEC 细胞增殖和迁移率研究 |
| 4.2.4 血管生成密度研究 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 RAW264.7 细胞毒性和 NO 含量 |
| 4.3.2 HUVEC 细胞增殖和迁移率 |
| 4.3.3 血管生成密度 |
| 第二节 体内药效学研究 |
| 4.4 仪器,试剂与实验动物 |
| 4.4.1 试剂 |
| 4.4.2 仪器 |
| 4.4.3 实验动物 |
| 4.5 实验方法 |
| 4.5.1 小鼠造模方法 |
| 4.5.2 实验分组及给药方法 |
| 4.5.3 伤口闭合率分析 |
| 4.5.4 病理组织切片分析 |
| 4.6 结果与讨论 |
| 4.6.1 伤口闭合率分析 |
| 4.6.2 炎症期炎症浸润程度分析 |
| 4.6.3 增殖期血管密度分析 |
| 4.6.4 重塑期胶原沉积情况分析 |
| 4.7 本章小结 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录Ⅰ:文献综述 20(S)-原人参二醇的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录Ⅱ:攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
（4）可作为药物载体的改性聚乳酸微球支架的制备及性能研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中文文摘 |
| 0 绪论 |
| 0.1 生物医用材料 |
| 0.1.1 生物医用材料概述 |
| 0.1.2 生物医用材料的分类 |
| 0.2 组织工程支架材料 |
| 0.2.1 组织工程概述 |
| 0.2.2 组织工程支架材料 |
| 0.2.3 组织工程支架的结构 |
| 0.2.4 组织工程支架的制备方法 |
| 0.3 药物缓控释载体材料 |
| 0.3.1 药物缓控释体系概述 |
| 0.3.2 药物缓控释载体材料的种类 |
| 0.4 聚乳酸 |
| 0.4.1 概述 |
| 0.4.2 聚乳酸的合成 |
| 0.4.3 聚乳酸的改性 |
| 0.4.4 聚乳酸微球 |
| 0.5 本论文的研究内容、目的和意义 |
| 0.6 本论文的创新之处 |
| 第一章 实验材料与实验方法 |
| 1.1 主要试剂与仪器 |
| 1.1.1 主要化学试剂 |
| 1.1.2 主要仪器设备 |
| 1.2 分析与表征方法 |
| 1.2.1 茚三酮显色法测定氨基含量 |
| 1.2.2 体外生物矿化实验研究 |
| 1.2.3 扫描电子显微镜 |
| 1.2.4 傅里叶变换红外光谱 |
| 1.2.5 X-射线粉末衍射 |
| 1.2.6 X射线光电子能谱 |
| 1.2.7 接触角的测定 |
| 1.2.8 凝胶渗透色谱 |
| 1.2.9 核磁共振氢谱 |
| 1.2.10 热重分析 |
| 1.2.11 原子吸收 |
| 1.2.12 N_2物理吸附分析 |
| 第二章 纳米纤维构建的氨基化改性聚乳酸微球支架的制备及表征 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 纳米纤维构建的EPLA微球的制备 |
| 2.2.2 EPLA微球的表征 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 氨解反应的表征 |
| 2.3.2 微球制备工艺条件的探讨 |
| 2.3.3 体外生物活性评价 |
| 2.4 结论 |
| 第三章 EPLA/阿仑膦酸钠缓释微球的制备及其体外释药性能的研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 EPLA/AL缓释微球的制备 |
| 3.2.2 微球载药量的测定及计算 |
| 3.2.3 载药微球的表征与测试 |
| 3.2.4 EPLA微球对阿仑膦酸钠药物吸附性能的研究 |
| 3.2.5 微球体外释药行为的研究 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 载药微球的表征 |
| 3.3.2 EPLA微球对阿仑膦酸钠吸附性能的研究 |
| 3.3.3 体外释药行为研究 |
| 3.4 结论 |
| 第四章 EPLA/nHA复合微球的制备及载药性能的研究 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 EPLA/nHA复合微球的制备 |
| 4.2.2 EPLA/nHA复合微球的表征 |
| 4.2.3 EPLA/nHA复合微球制备条件的研究 |
| 4.2.4 吸附-冷冻干燥法载药及载药量的计算 |
| 4.2.5 EPLA/nHA复合微球对阿仑膦酸钠吸附性能的研究 |
| 4.2.6 EPLA/nHA/AL载药微球体外释药行为的研究 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 EPLA微球对nHA仿生矿化合成的模板诱导作用及机理分析 |
| 4.3.2 EPLA/nHA复合微球制备条件的探讨 |
| 4.3.3 EPLA/nHA复合微球对阿仑膦酸钠的负载及缓释性能的研究 |
| 4.4 结论 |
| 第五章 Gelatin-g-EPLA复合微球的制备及其对布洛芬缓释性能的研究 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 实验部分 |
| 5.2.1 Gelatin-g-EPLA复合微球的制备 |
| 5.2.2 Gelatin-g-EPLA复合微球的表征 |
| 5.2.3 EPLA微球负载布洛芬的实验研究 |
| 5.2.4 Gelatin-g-EPLA/IBU缓释微球的制备 |
| 5.2.5 Gelatin-g-EPLA/IBU缓释微球体外释药行为的研究 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 EPLA微球表面明胶接枝改性的机理研究 |
| 5.3.2 Gelatin-g-EPLA复合微球的表征 |
| 5.3.3 Gelatin-g-EPLA复合微球体外生物活性的评价 |
| 5.3.4 布洛芬载药微球制备条件的研究 |
| 5.3.5 体外释药行为的研究 |
| 5.4 结论 |
| 第六章 结论与展望 |
| 略语表 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（5）壳聚糖缓释体系研究进展（论文提纲范文）
| 前言 |
| 1 壳聚糖衍生物缓释体系的研究 |
| 1.1 壳聚糖衍生物缓释微球的研究 |
| 1.2 壳聚糖纳米粒的研究 |
| 1.3 壳聚糖缓释片的研究 |
| 1.4 壳聚糖缓释微囊的研究 |
| 1.5 壳聚糖缓释膜的研究 |
| 1.6 壳聚糖水凝胶缓释体的研究 |
| 2 壳聚糖缓释体系在医药系统的应用 |
| 3 吸附-控释复合体系的研究 |
| 4 结 语 |
（6）VEGFF-P（HBHO）NPs缓释微球的制备、性能及生物学活性检测（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 缩略词 |
| 第一章 VEGF-P(HBHO)NPs缓释微球的不同制备技术及理化性质 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 主要试剂 |
| 1.1.2 主要仪器 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 以微球的粒径、形态、分散性为主要指标，筛选 PHBHOx 空白纳米粒制备方法 |
| 1.2.2 PHBHOx 载 VEGF 纳米粒的制备 |
| 1.2.3 PHBHOx 载 VEGF 纳米粒的基本特性 |
| 1.2.4 PHBHOx 载 VEGF 纳米粒应用于组织工程支架 |
| 1.3 结果 |
| 1.3.1 PHBHOx 空白纳米微球制备方法的筛选结果 |
| 1.3.2 纳米粒表面形态观察与粒径分析结果 |
| 1.3.3 载药量与包封率的测定结果 |
| 1.3.4 体外释药率测定结果 |
| 1.3.5 PHBHOx 载 VEGF 纳米粒应用于组织工程支架 SEM 观察结果 |
| 1.4 讨论 |
| 第二章 兔肾微血管内皮细胞的分离传代培养及鉴定 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 主要试剂及仪器 |
| 2.1.2 实验动物 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 兔肾微血管内皮细胞分离培养及传代培养 |
| 2.2.2 兔肾微血管内皮细胞Ⅷ因子相关抗原鉴定方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 兔肾微血管内皮细胞培养图片 |
| 2.3.2 兔肾微血管内皮细胞Ⅷ因子相关抗原鉴定图 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 VEGF-P(HBHO)NPs 缓释微球对肾微血管内皮细胞增殖的影响 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 主要试剂 |
| 3.1.2 主要仪器 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 W1/O/W2 超声乳化法制备 PHBHOx 载 VEGF 纳米微球 |
| 3.2.2 三步梯度筛网法培养肾微血管内皮细胞 |
| 3.2.3 实验分组 |
| 3.2.4 MTT 法检测缓释纳米微球对肾微血管内皮细胞增殖的影响 |
| 3.2.5 统计学分析 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 攻读学位期间发表论文情况 |
| 个人简介 |
| 致谢 |
（7）丝素蛋白—壳聚糖缓释微球的制备与表征（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 微球和微囊的材料分类 |
| 1.1.1 可降解的人工合成高分子材料 |
| 1.1.2 可降解的天然高分子材料 |
| 1.2 理想的微球微囊材料的要求 |
| 1.3 微球材料的选择 |
| 1.3.1 丝素蛋白 |
| 1.3.2 壳聚糖 |
| 1.3.3 京尼平 |
| 1.3.4 牛血清白蛋白 |
| 1.4 本论文的研究内容 |
| 第二章 以京尼平交联的丝素蛋白-壳聚糖微球的制备与表征 |
| 2.1 材料及方法 |
| 2.2 丝素蛋白-壳聚糖微球的表征 |
| 2.3 统计学分析 |
| 2.4 结果 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6 结论 |
| 第三章 以京尼平交联包载BSA的丝素蛋白-壳聚糖微球的制备与表征 |
| 3.1 材料及方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.2 丝素蛋白-壳聚糖缓释微球的表征 |
| 3.2.1 微球表面形态研究和粒径分析 |
| 3.2.2 微球溶胀率,包封率和载药率 |
| 3.2.3 微球的傅里叶变换红外光谱(FTIR)研究 |
| 3.2.4 微球的X-射线衍射学(XRD)研究 |
| 3.2.5 微球的热重分析 |
| 3.2.6 微球的体外释放实验 |
| 3.3 统计学分析 |
| 3.4 结果 |
| 3.4.1 微球的表面形态和粒径分析结果(图8) |
| 3.4.2 微球的包封率,载药率和溶胀率 |
| 3.4.3 FTIR分析结果 |
| 3.4.4 XRD分析结果 |
| 3.4.5 热重分析结果 |
| 3.4.6 包载BSA微球的体外释放的结果 |
| 3.5 讨论 |
| 3.6 结论 |
| 第四章 包载BSA的丝素蛋白-壳聚糖微球与纯壳聚糖微球的缓释效能对比研究 |
| 4.1 材料及方法 |
| 4.1.1 实验试剂 |
| 4.1.2 方法 |
| 4.2 三组微球的表征 |
| 4.2.1 微球表面形态研究 |
| 4.2.2 微球溶胀率,包封率和载药率 |
| 4.2.3 微球的体外释放实验 |
| 4.3 统计学分析 |
| 4.4 结果 |
| 4.4.1 微球的表面形态(图14) |
| 4.4.2 微球的包封率,载药率和溶胀率 |
| 4.4.3 包载BSA微球的体外释放结果 |
| 4.5 讨论 |
| 第五章 全文总结 |
| 第六章 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 在读期间研究成果 |
| 致谢 |
（8）骨形态发生蛋白2/聚乳酸缓释微球的制备及表征（论文提纲范文）
| 文章亮点: |
| 0 引言Introduction |
| 1 材料和方法Materials and methods |
| 2 结果Results |
| 3 讨论Discussion |
（9）rhBMP2缓释微球的制备及其用于盖髓剂的实验研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 一、牙髓的损伤修复 |
| 二、骨形成蛋白研究进展 |
| 三、高分子载体材料的研究进展 |
| 四、PLGA 研究进展 |
| 实验一 缓释微球制备工艺的优化 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验二 RHBMP2 缓释微球的制备及相关检测 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验三 RHBMP2-PLGA 缓释微球用于犬牙直接盖髓的实验研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
（10）肺部缓释微球治疗肺部疾病的性能及评价（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 药物控制释放系统的发展阶段及优势 |
| 2 制备微球载体材料及特点 |
| 3 缓释微球治疗肺部疾病的特点及性能 |
| 3.1 资料来源 |
| 3.2 纳入标准 |
| 3.3 排除标准 |
| 3.4 分析指标 |
| 3.5不同载药方式的肺部缓释微球载体材料 |
| 3.6肺部缓释微球载体材料的粒径及给药途径与药效的关系 |
| 3.7 肺部缓释微球的性能研究 |
| 3.8不同方法评价肺部缓释微球的释药性能 |
| 3.9不同制备方法制备的肺部缓释微球的特点 |
| 4 影响肺部缓释微球质量和体外释药的因素 |
| 5 结论 |
四、制备复合生长因子的缓释微球并考察其对细胞的影响（论文参考文献）
- [1]新型复合释氧支架的构建及促进大鼠脊髓损伤修复的实验研究[D]. 刘良乐. 南方医科大学, 2021
- [2]局麻药罗哌卡因缓释微球的制备和应用研究[D]. 李勋. 中国科学院大学(中国科学院过程工程研究所), 2019(08)
- [3]20（S）-原人参二醇纳米脂质载体凝胶的制备及其用于糖尿病溃疡有序化恢复的研究[D]. 孙迪. 上海中医药大学, 2019(03)
- [4]可作为药物载体的改性聚乳酸微球支架的制备及性能研究[D]. 陈顺玉. 福建师范大学, 2018(05)
- [5]壳聚糖缓释体系研究进展[J]. 金政,刘美华,刘振梅,赵东宇,白续铎,赵凯. 化学与黏合, 2015(01)
- [6]VEGFF-P（HBHO）NPs缓释微球的制备、性能及生物学活性检测[D]. 任玮. 山西医科大学, 2014(12)
- [7]丝素蛋白—壳聚糖缓释微球的制备与表征[D]. 叶漫文. 南方医科大学, 2014(12)
- [8]骨形态发生蛋白2/聚乳酸缓释微球的制备及表征[J]. 马立坤,叶鹏,黄文良,田仁元,邓江. 中国组织工程研究, 2014(03)
- [9]rhBMP2缓释微球的制备及其用于盖髓剂的实验研究[D]. 柴雪. 第四军医大学, 2013(02)
- [10]肺部缓释微球治疗肺部疾病的性能及评价[J]. 王世寿,武刚. 中国组织工程研究, 2013(12)