一、肝移植病人TNF-α基因多态性与急性排斥反应的关系（论文文献综述）
潘慧[1]（2020）在《肝移植术后患者他克莫司的血药浓度分布，凝血功能及肝肾功能的探讨》文中研究指明目的:探讨应用他克莫司抗排异方案治疗的肝移植受者术后他克莫司血药浓度的分布,凝血功能,肝肾功能变化趋势及影响因素,为他克莫司的治疗药物监测,以及血药浓度范围提供参考,为可能出现的肝肾不良反应提供依据,确保他克莫司安全有效。方法:回顾性研究2015.9～2019.10在上海市第一人民医院行肝移植的85例,经筛选,搜集71例患者肝移植术前及术后1～5d凝血功能指标:凝血酶原时间（PT）,活化部分凝血酶原时间（APTT）,凝血酶时间（TT）,血小板计数（PLT）以及纤维蛋白原（FBG）,进行统计分析;经筛选,搜集66例患者术后30 d内,90 d和180 d他克莫司血药浓度,和谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肌酐（Scr）指标,观察他克莫司血药浓度分布,探讨术后肝肾功能骤升的原因,及肝肾功能长期变化的趋势。符合正态的数据分布采用t检验,反之采用Wilcoxon秩和检验。结果:71例患者术后PT,APTT,TT及FBGd1～d 5内逐步恢复,但PLT在术后d1～d 5内持续下降,d2～d 5的PLT与术前相比,差异有统计学意义（P<0.05）。66例患者30 d内他克莫司平均血药浓度7.39±3.18ng/m L,39%的浓度在6～10ng/m L;90d为6.32±3.09ng/m L,58%的浓度在4～8ng/m L;180d为6.43±3.03ng/m L,55%的浓度在4～8ng/m L。66例患者的ALT、AST及Scr在术后1 d出现峰值,ALT及AST术后30天内恢复正常,术后180天基本保持在正常范围内,与术前相比无统计学差异;Scr术后7天内恢复,180天Scr明显高于术前（P<0.05）,且具有统计学差异。联合西罗莫司治疗组,180天Scr与术前无差异;单用他克莫司治疗组,180天Scr与术前相比,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:长期应用他克莫司,不能忽视可能造成的血小板减少,治疗量即可能引起血小板聚集而导致血小板计数减少。诱导免疫治疗,或联用西罗莫司,可延迟或减少他克莫司的暴露,维持他克莫司最低有效浓度,既有抗排异作用,也可减少肾毒性。他克莫司对肾脏的损伤是慢慢积累的,联合西罗莫司可改善他克莫司引起的肾功能损伤。
校丹[2]（2020）在《SP-A、TNF-α、GDF-15在AECOPD患者诊断价值的研究》文中研究指明目的:检测慢性阻塞性肺疾病患者急性加重期（包括A1期、A2期）及病情缓解期血清中肺表面活性蛋白-A、肿瘤坏死因子-α、生长分化因子-15的表达水平,探讨其临床意义,为预测AECOPD寻找有效的血清生物学指标。方法:（1）收集慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者60例（加重组）,其中肺功能分级为Ⅰ级、Ⅱ级患者30例（A1组）,肺功能分级为Ⅲ级、Ⅳ级患者30例（A2组）和病情缓解期患者30例（缓解组）。（2）收集各组的一般资料,检测各组的血常规和生化指标;应用肺功能仪测定COPD患者肺功能参数第一秒用力呼吸容积占预计值百分比（FEV1%pred）;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组外周血SP-A、TNF-α、GDF-15浓度。（3）应用单因素方差分析法分析各组外周血SP-A、TNF-α、GDF-15的表达水平;Pearson相关分析法分析SP-A、TNF-α、GDF-15水平的相关性以及这三种生物学标志物与FEV1%pred的相关性;描绘受试者操作特征曲线,评估SP-A、TNF-α、GDF-15单独和联合检测对AECOPD患者的临床诊断价值。结果:（1）缓解组、A1组和A2组数据中WBC、PCO2、PO2、FEV1/pred（%）比较,组间差异均有统计学意义（P<0.001）。（2）外周血SP-A、TNF-α、GDF-15表达水平在缓解组、A1组和A2组基本呈上升趋势,组间差异有统计学意义（P<0.001）;AECOPD患者SP-A、TNF-α、GDF-15表达水平均高于缓解组,且A2组高于A1组,组间差异有统计学意义（P<0.001）。（3）加重组血清SP-A水平与TNF-ɑ水平呈弱正相关（r=0.244,P<0.05）,与GDF-15水平呈弱正相关（r=0.216,P<0.05）,加重组TNF-α水平与GDF-15水平也呈弱正相关（r=0.340,P<0.05）。加重组外周血TNF-α、GDF-15、SP-A水平均与FEV1%pred呈弱负相关（r=-0.306,-0.174,-0.203;均P<0.05）。（4）SP-A、TNF-α、GDF-15单独诊断AECOPD患者的ROC曲线下面积分别为0.896、0.877、0.888,SP-A对AECOPD患者的诊断价值灵敏度均优于TNF-α和GDF-15,但GDF-15对AECOPD患者的诊断价值特异度均优于SP-A和TNF-α。（5）SP-A联合TNF-α、SP-A联合GDF-15、TNF-α联合GDF-15及三者联合诊断AECOPD患者的ROC曲线下面积分别为0.951、0.959、0.952、0.978。SP-A联合GDF-15可提高AECOPD患者的诊断效能,主要提高诊断AECOPD的灵敏性,更好地检测出患病者,三者联合并不优于两两联合对AECOPD患者诊断效能的评估,两两联合可显着提高诊断AECOPD患者的灵敏度,但对特异度的影响不大,单独检测GDF-15的特异度较高,两两联合甚至三者联合后均对特异度无明显提高。结论:（1）外周血SP-A、TNF-α和GDF-15表达水平可能反映AECOPD患者的病情严重程度,随着GOLD分级增加,SP-A、TNF-α和GDF-15表达水平越高。（2）SP-A联合GDF-15可提高AECOPD患者的诊断效能,对评估COPD急性加重期有一定的意义。
时程程[3]（2020）在《供体遗传学和表观遗传学因素对肝移植患者术后他克莫司血药浓度的影响》文中研究说明研究目的肝移植手术是目前临床上治疗各种终末期肝病的最有效手段。排斥反应是移植术后常见的并发症,也是影响移植器官存活的重要因素。因此,器官移植成功的关键就是抑制受体的免疫系统从而预防排斥反应的发生,最有效的手段就是合理的选择和使用免疫抑制剂。目前临床上常用的免疫抑制三联方案为:他克莫司联合吗替麦考酚酸酯与糖皮质激素。其中,他克莫司因其有效治疗浓度范围窄,个体差异大,不良反应严重等药动学和药效学特征而需要通过血药浓度监测来调整其给药剂量。然而,由于血药浓度监测存在明显的滞后性,只能从一定程度上降低移植术后急性排斥反应和药物毒副作用的发生率。因此,找到影响他克莫司体内代谢过程的关键因素并确定其为生物标记物,在给药前即根据患者个体差异来确定个体化给药剂量,对于移植术后他克莫司应用的有效性和安全性有着更加重要的指导意义。目前关于他克莫司血药浓度个体差异原因的研究,主要集中在遗传药理学方面,且大多结论不尽一致。这提示他克莫司在人体肝脏的代谢过程,可能也受表观遗传学因素的影响,有待系统深入研究。同时,由于肝脏是药物代谢最重要的器官,在肝移植中,现有研究已提示供体肝脏在术后药物代谢研究中占据着更重要的地位。因此,肝移植术后他克莫司初始血药浓度监测结果更能反映出供体肝脏的个体差异。本研究拟以肝移植患者术后初始血药浓度为依据,观察供体肝脏遗传学和表观遗传学因素对肝移植患者术后他克莫司血药浓度的影响,力求明确、完善他克莫司在人体内的代谢途径以及影响其代谢过程的调控因素,以确定对临床制定他克莫司个体化给药方案具有指导意义的生物标记物。一、供体肝脏遗传学因素对他克莫司血药浓度的影响方法1.研究对象筛选及肝移植供体肝脏组织标本的收集本研究通过对郑州大学第一附属医院肝移植中心2016年6月至2018年6月的肝移植患者临床资料、术后免疫抑制剂给药方案及他克莫司初始血药浓度检测结果等进行分析,筛选出初始血药浓度差异较大（高浓度组>10μg/L,低浓度组<5μg/L）的两组共计78例患者,从河南省消化器官移植重点实验室生物样本库中获取此78例患者的供体肝脏标本（伦理号2019-KY-019）。2.78例供体肝脏组织DNA的提取及基因多态性的检测提取供肝组织DNA,PCR扩增目的DNA片段,参考现有文献,检测CYP3A5、CYP3A4、CYP3A7、UGT1A4、UGT2B7及ABCB1在亚洲人群中的常见单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）位点并和他克莫司初始血药浓度/剂量（concentration/dose,C/D）值进行对比分析,明确可能参与他克莫司代谢途径的药物代谢酶或转运体以及影响肝移植术后他克莫司初始血药浓度的SNP位点。3.携带CYP3A5*3/*3供体肝脏组织RNA的提取及全转录组测序根据基因多态性的检测结果,在携带CYP3A5*3/*3基因型的供体肝组织（共计36例）中筛选出依然存在他克莫司初始血药浓度差异的23例样本。将其分成高、低血药浓度组（高浓度组>10μg/L,低浓度组<5μg/L）,提取组织RNA,进行全转录组测序并对测序结果进行分析。结果1.肝移植供体基因多态性与受体术后他克莫司初始血药浓度之间的相关性（1）CYP3A酶基因多态性:①78例肝移植供体CYP3A5表达型（CYP3A5*1/*1,CYP3A5*1/*3）与 CYP3A5 不表达型（CYP3A5*3/*3）相比,受体术后他克莫司初始血药浓度C/D值之间具有显着性差异（P=0.0026）。但携带CYP3A5*3/*3供体的肝移植患者中,他克莫司初始血药浓度仍存在较大个体差异。②供体CYP3 A4*1/*1基因型和携带CYP3 A4*1G基因型（*1/*1G+*1G/*1G）的他克莫司初始C/D值之间存在显着性差异（P=0.003）。③供体CYP3A7 rs2257401位点的GG型与GC+CC型相比,受体术后他克莫司初始血药浓度C/D值之间具有显着性差异（P=0.0028）;供体CYP3A7 rs10211位点的AA型与GG+GA型相比,受体术后他克莫司初始血药浓度C/D值之间也具有显着性差异（P=0.041）。（2）UGT酶基因多态性:①78例供体肝组织中,UGT1A4的5个SNP位点之间存在连锁不平衡效应,但各位点的不同基因型之间的受体术后他克莫司初始血药浓度C/D值均无显着性差异（P=0.66）。②UGT2B7的5个SNP位点之间存在连锁不平衡效应,但各位点不同基因型之间的受体术后他克莫司初始血药浓度C/D值并不存在显着性差异（P=0.77）。（3）ABCB1基因多态性:78例供体肝组织中,ABCB1基因3个SNP位点不同基因型之间的受体术后他克莫司初始血药浓度C/D值均不存在显着性差异（P=0.29、0.60、0.50）。2.全转录组测序中表达差异基因的分析对23例他克莫司初始血药浓度存在显着差异的CYP3A5*3/*3基因型供体肝脏组织进行全转录组测序,结果显示,CYP3A4和CYP3A7的基因表达量和受体术后他克莫司初始C/D值之间不存在相关性（r=0.146、0.092;P>0.05）,且CYP3A7的表达量远低于CYP3A4的表达量;Ⅱ相代谢酶中的UGT2B7、UGT1A4、UGT1A1以及转运体ABCB1的基因表达均与术后他克莫司初始C/D值之间存在明显相关性（r=-0.427、-0.432、-0.516、0.515;P<0.05）。同时结果还显示,肝细胞核因子4α（hepatic nuclear factor 4α,HNF4α）的表达量也和血药浓度呈负相关,且和 UGT2B7、UGT1A1、UGT1A4 均存在显着正相关（r=-0.507、0.692、0.413、0.635;P<0.05）。该结果提示,他克莫司的体内代谢可能经Ⅱ相UGT酶代谢。二、HNF4α/HNF4α-AS1/UGT1A4通路对他克莫司血药浓度的影响方法1.体外酶实验检测他克莫司的Ⅱ相代谢途径（1）他克莫司的体外重组单酶筛选:建立他克莫司葡萄糖醛酸结合反应孵育体系,将重组表达的UGTs单酶UGT1A1、UGT1A3、UGT1A4、UGT1A6、UGT1A7、UGT1A8、UGT1A9、UGT1A10、UGT2B4、UGT2B7、UGT2B10、UGT2B15、UGT2B17 及人肝微粒体（human livermicrosomes,HLM）分别和他克莫司标准品共孵育,通过液相-质谱分析方法检测他克莫司的葡醛酸代谢产物。（2）化学抑制定性实验:分别在孵育体系中加入UGT1A1、UGT1A4、UGT1A9、UGT2B7酶的化学抑制剂,对他克莫司在HLM中的葡萄糖醛酸化代谢进行抑制,质谱检测分析他克莫司的葡醛酸化代谢产物,通过代谢产物的减少程度进一步确定他克莫司对UGT1A4单酶的选择性。2.携带CYP3A5*3/*3供体肝脏组织中UGT1A4及HNF4α、HNF4α-AS1 mRNA表达的测定采用qPCR检测23例具有他克莫司血药浓度差异的CYP3A5*3/*3基因型供体肝组织中UGT1A4、HNF4α、HNF4α-AS1的mRNA表达水平,并分析它们和受体术后他克莫司初始C/D值的相关性。3.HNF4α及HNF4α-AS1敲除Huh7细胞系的建立及UGT1A4表达水平的检测采用功能缺失性实验在人肝癌细胞系Huh7细胞中分别敲除HNF4α和HNF4α-AS1,采用 RT-qPCR 和 Western Blot 检测细胞中 HNF4α、HNF4α-AS1及UGT1A4的mRNA和蛋白表达水平。结果1.UGT1A4是直接代谢他克莫司的Ⅱ相代谢酶他克莫司体外葡萄糖醛酸化代谢实验结果显示,只有UGT1A4表现出明显催化活性,且是其他重组亚型酶的35倍左右;在混合HLM中加入不同亚型UGT酶的化学抑制剂后,UGT1A4（海格吉宁）和UGT1A1（尼洛替尼）抑制剂对他克莫司的葡萄糖醛酸化代谢具有明显抑制,抑制后的代谢残余活性分别为42%和38%左右,而其他单酶抑制剂加入后的残余活性仍在80%以上。该结果表明UGT1A4是直接代谢他克莫司的重要Ⅱ相代谢酶。2.UGT1A4、HNF4α、HNF4α-AS1在供体肝脏组织中的mRNA表达水平23例携带CYP3A5*3/*3基因型的供体肝组织中,UGT1A4和HNF4α mRNA表达水平均与他克莫司初始血药浓度呈负相关（r=-0.418、-0.453;P<0.05）,且HNF4α和UGT1A4 mRNA表达水平呈显着正相关（r=0.614;P<0.05）。HNF4α-AS1和HNF4α、UGT1A4 mRNA表达水平也均呈明显正相关（r=0.505、0.416;P<0.05）。该结果提示,HNF4α/HNF4α-AS1通路有可能通过调节UGT1A4的表达影响他克莫司的血药浓度。3.siRNA干扰HNF4α或HNF4α-AS1对UGT1A4表达的影响siRNA干扰实验结果显示,敲低HNF4α后,与对照组相比,细胞内HNF4α、HNF4α-AS1 及 UGT1A4 mRNA 表达水平均明显下降（P<0.001）,HNF4α 和UGT1A4蛋白表达量也有明显降低。而在敲低HNF4α-AS1后,与对照组相比,HNF4α和UGT1A4 mRNA表达水平均升高,蛋白表达量也升高。结果提示,HNF4α-AS1可能作为辅助因子与HNF4α相互作用,从而调控UGT1A4的表达。三、ABCB1启动子区DNA甲基化对他克莫司血药浓度的影响方法1.携带CYP3A5*3/*3供体肝脏组织DNA甲基化的检测采用Illumina850甲基化芯片测序技术对23例携带CYP3A5*3/*3供体肝脏组织中的15例标本（每例标本DNA约500ng）进行全基因组DNA甲基化程度检测,筛选出对他克莫司血药浓度差异有意义的甲基化位点,再用焦磷酸化测序技术对全部23例标本该位点的甲基化程度进行验证。2.qPCR检测肝脏组织ABCB1 mRNA表达水平采用qPCR检测23例具有他克莫司血药浓度差异的CYP3A5*3/*3供肝组织中ABCB1的mRNA表达水平,分析mRNA表达水平和他克莫司血药浓度以及和DNA甲基化程度之间的相关性。3.细胞水平检测ABCB1启动子区甲基化对ABCB1转运他克莫司的影响分别用0、10μmol/L的甲基化抑制剂5-Aza-2-dC处理HepG2细胞72h后,更换含60μmol/L他克莫司的培养基,48h后撤去含他克莫司的培养基,更换为不含他克莫司的培养基继续培养,分别于更换后0、4、6、12h后收集细胞。采用RT-qPCR和Western Blot检测HepG2细胞中ABCB1的mRNA和蛋白表达水平的变化;采用焦磷酸测序检测细胞内ABCB1基因甲基化程度的改变;同时采用液相-质谱检测细胞中他克莫司的浓度变化。结果1.携带CYP3A5*3/*3供体肝脏组织全基因组甲基化测序分析结果甲基化芯片筛选结果显示,供体肝脏组织内ABCB1的三个甲基化位点（cg12501229,cg00634941,cg05496710）与他克莫司初始血药浓度水平相关。焦磷酸化检测进一步验证后结果显示,供体ABCB1这三个位点的甲基化程度在他克莫司血药浓度高、低组中存在显着性差异（P<0.05）。2.携带CYP3A5*3/*3供体肝脏组织中ABCB1的mRNA表达水平qPCR检测结果显示,供体肝脏组织中ABCB1 mRNA表达水平和他克莫司初始血药浓度呈显着正相关（r=0.458;P<0.05）,且ABCB1三个CpG位点的甲基化程度均和ABCB1 mRNA表达水平呈负相关（r=-0.273、-0.292、-0.195）。由此说明,ABCB1的启动子区甲基化可能是影响术后他克莫司血药浓度的另一重要因素。3.5-Aza-2-dC对HepG2细胞代谢他克莫司的影响甲基化酶抑制剂5-Aza-2-dC处理HepG2细胞后,细胞中ABCB1 mRNA和蛋白表达水平均有明显升高;ABCB1三个CpG位点的甲基化程度与未处理组相比均有明显减少（P<0.05）;在撤去他克莫司培养基后的0、4、6、12h,细胞中他克莫司的含量与未处理组相比也均有明显减少（P<0.05）。由此证明,转运体ABCB1基因启动子区甲基化通过调控ABCB1的表达进而影响他克莫司在细胞内的代谢过程。结论1.供体CYP3A5*3和CYP3A4*1G的基因多态性是影响肝移植术后他克莫司血药浓度差异的重要因素,但并不能完全解释个体差异。2.UGT1A4是人体内直接代谢他克莫司的重要Ⅱ相代谢酶,且HNF4α/HNF4α-AS1通路是调控UGT1A4差异表达进而影响肝移植术后他克莫司血药浓度的因素。3.供体ABCB1启动子区DNA甲基化通过调控ABCB1的表达进而影响肝移植术后他克莫司的血药浓度。
朱海[4]（2020）在《FK506和MMF联合的自组装载药体系在肝移植急性排斥中的作用研究》文中研究指明肝脏移植经过数十年的发展,目前已经被广泛应用于各种终末期肝脏和胆道疾病的治疗。肝脏移植的广泛应用不仅仅是手术技术的进步,作为术后急性排斥防治常规用药的免疫抑制剂,其发展也起到了重要的作用。现在,肝脏移植术后使用的免疫抑制剂主要有:钙调磷酸酶抑制剂、代谢抑制剂、哺乳动物雷帕霉素靶点抑制剂、糖皮质激素和各种单克隆或多克隆抗体。在众多的免疫抑制剂中,钙调磷酸酶抑制剂他克莫司（FK506）是肝脏移植术后免疫抑制的基石。为了延长移植肝脏的寿命,肝移植患者术后须长期口服FK506。然而长期使用FK506也会带来各种不良反应,为了减少其不良反应并发挥协同治疗的作用临床上经常将FK506和抗代谢类的药物霉酚酸酯（Mycophenolate mofetil,MMF）联合使用。但是这两种免疫抑制剂都存在水溶性低,生物利用度和靶向性差的问题。并且由于低水溶性这两种药物临床上应用是以口服为主,难以制备成可常规使用的注射用药,这也限制了他们的临床应用范围。为了解决这些问题,我们在本研究中首次使用了基于前体药物的自组装载药体系（Self-Assembled Immunosuppressant Cocktails,SAIC）来装载这两种药。并且,我们还基于前期研究中利用多不饱和脂肪酸合前体药物的策略来构建载药体系。在本研究的第一部分,我们首先根据FK506和MMF分子的结构特点,选择MMF作为前体药物。并且选择了亚油酸（Linolenic acid,LA）、二十二碳六烯酸（Docosahexaenoic acid,DHA）、庚酸（Heptanoic Acid,Hep）与MMF进行结合。这三种材料都可以和MMF结合成前体药物,并且都可以在水中自组装成的装载MMF和FK506的载药体系。接下来我们对由三种自组装载药体系行了体内分布的比较。比较的结果发现使用LA合成前药自组装的联合载药体系在肝脏、脾脏、淋巴结这些肝移植后急性排斥相关器官中分布是最多的。因此在第二部分的研究中,我们选择了以LA-MMF作为前体药物与FK506自组装成载药体系使用在大鼠肝移植术后急性排斥的模型中。LA-SAIC在与常规的FK506联合MMF口服比较中,载药体系可以显着延长接受了DA大鼠肝脏移植的Lewis大鼠生存时间。对各组移植肝脏的组织学比较中还发现载药体系显着的抑制了淋巴细胞的渗出和脉管周围渗出细胞的增生。而对各组移植肝脏中细胞因子谱的主成分分析和聚类分析发现,载药体系组的细胞因子谱一直处于较为稳定的状态。并且载药体系可以显着的抑制移植肝脏中各种趋化因子和促进T细胞增值的细胞因子,而且显着提升了Th2细胞来源的细胞因子。对各组的肝功能谱的主成分分析发现载药体系组肝功能谱的变化不明显,而且聚类分析结果提示各组间的肝功能谱在合成功能上有类似的趋势。在具体的比较各项肝功能指标后,我们发现载药体系组中肝脏合成功能显着优于其他两组,肝脏损伤和胆管损伤指标也明显好于排斥组。综上所述,在本研究中我们通过利用脂肪酸合成前体药物的策略,构建出可自组装的FK506和MMF联合的载药体系。并且筛选出LA作为理想的MMF前药合成材料,并使用LA-MMF与FK506一起自组装成联合的载药体系。该载药体系可以显着的延长肝移植术后急性排斥大鼠的生存时间,并且抑制移植肝脏中的急性排斥反应。这些结果表明该载药体系对肝移植术后的急性排斥具有很好的治疗效果和临床应用前景。
贺希,刘鸿凌[5]（2019）在《细胞色素P450基因多态性对他克莫司临床应用的影响》文中提出肝移植是终末期肝病患者最有效的治疗手段,而免疫抑制剂的应用是影响患者移植术后长期存活的关键。本文介绍了最常用的免疫抑制剂——他克莫司的作用机制,以及细胞色素P450基因多态性对他克莫司应用影响的最新研究进展。为临床上合理使用他克莫司,减少相关并发症的发生,提高肝移植患者的长期生存率提供参考。
秦寅鹏[6]（2019）在《胆道闭锁婴儿活体肝移植术后早期基于CYP3A5 SNPs的他克莫司群体药动学研究》文中提出目的:探讨胆道闭锁婴儿活体肝移植术后3个月内他克莫司在受者中的药动学特征,分析他克莫司在该人群中血药浓度的影响因素;建立他克莫司在胆道闭锁婴儿活体肝移植受者中的群体药动学模型,探讨他克莫司在该人群中药动学参数与病理生理特征之间的关系;对建立的模型进行外部验证,结合贝叶斯方法预测他克莫司的血药浓度,以期为优化他克莫司在该群体的个体化给药方案提供参考。方法:1、胆道闭锁婴儿活体肝移植受者中他克莫司血药浓度的影响因素:按照纳入排除标准选择研究对象,用Sanger测序法检测供、受者CYP3A5*3基因型;化学发光免疫分析法（CMIA）测定他克莫司的谷浓度（C0）;记录受者人口学信息、移植肝重/体重比（GRWR）及术后第3d、5d、7d、14d以及1个月、2个月和3个月时他克莫司的日给药剂量、C0以及肝肾功能指标;分析受者术后3个月内他克莫司的给药剂量及血药浓度特征;以C0/D为因变量,人口学、GRWR、肝肾功能指标及CYP3A5基因型等因素为自变量进行多元逐步回归分析,探讨影响该群体他克莫司血药浓度的因素;并按照供、受者CYP3A5*3基因分型进一步探讨对他克莫司药动学的影响。2、他克莫司在胆道闭锁婴儿活体肝移植受者中的群体药动学研究:采用NONMEM法建立术后3个月内他克莫司在胆道闭锁婴儿活体肝移植受者中的群体药动学模型,考察受者年龄、性别、体重、GRWR、术后时间、他克莫司日剂量、供、受者CYP3A5基因型以及肝肾功能等协变量,分析他克莫司在该人群中药动学参数与病理生理特征之间的关系;通过模型的拟合优度图、2000次自举法（Bootstrap）以及基于模拟的正态预测分布误差三种方法对建立的模型进行评价,评估模型参数估算的精确度以及模型的稳定性。3、群体药动学模型的外部验证及预测能力评估:用10例独立于建模组受者的数据对建立的模型进行外部验证,考察模型的外部拟合情况,分析模型的稳定性和精确性;结合贝叶斯方法对20例受者预测其在术后3d、7d、14d、30d、60d和90d时他克莫司的血药浓度,验证模型的预测能力。结果:1、共100例婴儿活体肝移植受者纳入了研究,术后3个月内他克莫司血药浓度达到目标范围的最高比例为58.54%。供者和受者CYP3A5*3基因型、GRWR、红细胞压积、体重和碱性磷酸酶是他克莫司血药浓度的主要影响因素。供、受者CYP3A5*1等位基因的发生频率分别为30.5%和34.5%,术后2个月内NEX-R/NEX-D组他克莫司C0/D均明显高于EX-R/EX-D组（P<0.01）。受者CYP3A5基因型表达者C0/D显着低于非表达者（P<0.01）,供者CYP3A5基因型表达者与非表达者C0/D在术后7d内有显着差异（P<0.01）。2、60例婴儿活体肝移植受者的数据用于他克莫司在该群体中的群体药动学模型的建立,最终模型他克莫司表观清除率（CL/F）和表观分布容积（V/F）的群体典型值分别为5.37L·h﹣1和84.1L。他克莫司的日剂量、总蛋白、移植肝重/体重比、红细胞压积、术后时间以及供者和受者CYP3A5*3的基因多态性是影响他克莫司在该群体表观清除率（CL/F）的因素。并且受者CYP3A5非表达者与表达者相比,他克莫司的CL/F下降了13.5%,供者CYP3A5非表达者较表达者CL/F下降了10.5%。模型的拟合优度良好;Bootstrap验证的成功率为96.4%,估计值与最终模型估计值之间的偏差小于5%;正态预测分布误差的结果表明模型良好。3、模型对外部数据的拟合程度良好,最终模型的权重残差分布均匀,模型有一定预测能力。模型对术后3d、14d的预测相对不稳定,对术后7d、30d、60d和90d的预测准确度较高。对术后30d、60d、90d预测误差在±30%以内的均在80%以上,体现在浓度上平均预测误差为0.99（0.023.04）ng·mL﹣1。结论:1、胆道闭锁婴儿活体肝移植术后3个月内,受者他克莫司的血药浓度波动幅度大,难以稳定在目标范围,最高达标率仅为58.54%。供者和受者CYP3A5基因型、移植肝重/体重比、红细胞压积、体重和碱性磷酸酶是主要影响婴儿活体肝移植受者他克莫司血药浓度的因素,临床需考虑婴儿受者的特点、红细胞压积以及肝功能等诸多影响因素来进行个体化用药。2、供者与受者CYP3A5基因型均显着影响婴儿受者肝移植术后他克莫司的药代动力学。在纳入研究的100例婴儿活体肝移植受者中,CYP3A5*1等位基因的发生频率为34.5%,CYP3A5*3等位基因发生率为65.5%。婴儿肝移植术后Tac所需剂量与CYP3A5*3的基因多态性密切相关,为预测Tac的代谢,制定合理的给药方案以及降低急性排斥反应的风险,术前评估供者与受者CYP3A5基因型尤为必要,临床应综合考虑供者和受者CYP3A5基因型来制定个体化治疗方案。3、建立了胆道闭锁婴儿活体肝移植术后3个月的他克莫司群体药动学模型。在最终模型中,他克莫司表观清除率和表观分布容积的群体典型值分别为5.37L·h﹣1和84.1L。模型的拟合优度良好、2000次Bootstrap成功率为96.4%、正态预测分布误差表明模型良好。4、他克莫司日剂量、总蛋白、移植肝重/体重比、红细胞压积、术后时间以及供者和受者CYP3A5*3的基因多态性显着影响他克莫司在婴儿活体肝移植受者中的表观清除率。并且受者CYP3A5非表达者与表达者相比,他克莫司的CL/F下降了13.5%,供者CYP3A5非表达者较表达者CL/F下降了10.5%。5、模型对外部数据的拟合程度良好,具有一定预测能力,对肝移植术后7d、30d、60d和90d的预测准确度较高,术后30d、60d、90d预测误差在±30%以内的均在80%以上,对临床制定个体化免疫抑制方案有一定参考价值。
吕舰[7]（2019）在《TNF-α基因多态性对肝星状细胞生物学功能的影响及分子机制研究》文中研究指明目的:肝纤维化（hepatic fibrosis）是慢性肝损伤的组织代偿性反应,若不及时去除潜在致病因素将会进一步发展为肝硬化甚至肝癌。肝星状细胞（hepatic stellate cells,HSCs）在肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）等细胞因子刺激下,其增殖、活化表型发生改变是肝纤维化发生、发展过程中的中心事件。研究发现TNF-αA94T（rs1800620）和TNF-αP84L（rs4645843）单核苷酸基因多态性（single nucleotide polymorphisms,SNPs）,会影响TNF-α蛋白氨基酸之间的氢键网络和相互作用力,减小TNF-α蛋白结构的稳定性,进而下调TNF-α水平。本实验旨在通过构建TNF-α野生型、TNF-αA94T/P84L突变型的HSCs稳转细胞株模型,研究TNF-αSNPs对人肝星状细胞系LX-2增殖、活化、凋亡和迁移等生物学功能的影响及潜在分子机制。方法:PCR扩增合成TNF-αc DNA,以此为模版点突变合成TNF-αA94T和TNF-αP84L。与线性化载体重组后,在DH5α感受态细菌中转化,挑选阳性克隆经测序验证后,进行慢病毒包装。转染至LX-2细胞系,嘌呤霉素筛选阳性细胞,获得稳转株。分别采用实时荧光定量PCR（Real time quantitative PCR,RTq-PCR）、Western blot和酶联免疫吸附测定法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测各组细胞TNF-αm RNA和蛋白水平。采用CCK-8法检测TNF-αSNPs对HSCs增殖的影响;采用RTq-PCR检测TNF-αSNPs对HSCs活化指标Ⅰ型胶原蛋白、α平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、基质金属蛋白酶（matrix-metalloproteinase,MMP）2和9的m RNA水平的影响;采用流式细胞术检测TNF-αSNPs对HSCs细胞凋亡的影响;采用Transwell法检测TNF-αSNPs对HSCs迁移能力的影响;采用ELISA检测TNF-αSNPs对HSCs炎症因子IL-6和TGF-β1表达水平的影响;采用Western blot检测TNF-αSNPs对NF-κB信号通路蛋白P-IκB-α、P-P65、IκB-α和P65表达的影响。结果:经测序验证、嘌呤霉素筛选及倒置显微镜观察绿色荧光蛋白（Green fluorescent protein,GFP）表达,TNF-α野生型、TNF-αA94T/TNF-αP84L突变型稳转细胞株构建成功。RTq-PCR、Western blot和ELISA实验发现,与野生型TNF-α转染组（WT组）相比,TNF-αA94T（A94T组）和TNF-αP84L（P84L组）能显着下调TNF-αm RNA和蛋白水平。CCK8检测细胞增殖能力发现,在72 h和96 h时,WT组较空质粒组（GFP组）,细胞数量显着降低;而A94T和P84L突变组与WT组相比,细胞数量显着增多,表明TNF-αSNPs能显着减小TNF-α对HSCs的生长抑制作用。RTq-PCR检测HSCs活化指标m RNA水平,结果表明WT组与空质粒组相比,能显着下调Ⅰ型胶原蛋白和α-SMA的m RNA水平,能显着上调MMP-2/9的m RNA水平;而A94T和P84L突变组与WT组相比,能显着增加Ⅰ型胶原蛋白的水平,并能显着减少MMP9的m RNA水平;此外,TNF-αA94T能上调α-SMA的m RNA含量,并下调MMP2 m RNA水平。流式细胞术检测各组细胞凋亡水平,发现各组凋亡率无显着差异。Transwell法发现,WT组与空质粒组相比,穿透小室薄膜的细胞数量显着降低;而A94T和P84L突变组与WT组相比,能显着减小TNF-α对HSCs的迁移抑制作用。ELISA检测发现,WT组能上调IL-6的表达;而TNF-αA94T/P84L能显着下调IL-6的表达水平;此外,各组间TGF-β1的含量无显着差异。Western blot检测相关NF-κB通路蛋白发现,WT组较GFP组能上调P-IκB-α和P-P65的蛋白水平,并下调IκB-α的水平;而TNF-αA94T/P84L突变组较WT组,能显着下调P-IκB-α和P-P65的蛋白表达,并上调IκB-α的水平。结论:TNF-αA94T/P84L基因多态性位点能下调TNF-αm RNA和蛋白水平,能减小TNF-α对HSCs增殖、活化和迁移的抑制作用,可能与抑制NF-κB信号通路活化相关。
Edoo Muhammad Ibrahim Alhadi[8]（2019）在《肝移植后糖蛋白130多态性与新发糖尿病风险分析》文中指出目的:经过半个多世纪的研究和开发,肝移植患者的预后得到了极大的改善。然而,肝移植后新发糖尿病的发病率仍然很高,这已成为影响患者长期存活率和生活质量的重要因素。我们的目的是研究GP130的单核苷酸多态性是否与NODAT相关。方法:本研究纳入了 2009年至2014年我中心接受肝移植的469例患者,分为两组:NODAT组和非NODAT组。我们使用单变量和多变量分析筛选了 NODAT的独立危险因素。我们进一步构建了两个包含风险因子的NODAT预测模型。最后,我们通过单变量分析分析了生存时间和存活率。排除标准患有家族性糖尿病史,多器官移植,不到6个月的随访或急性排斥反应结果:肝移植6个月后新发糖尿病的总发生率为31.3%（147/469）。男性414例,女性55例,平均年龄45.7±11.1岁。使用单变量分析,年龄（P<0.001）,BMI指数（P=0.029）,GP130 rs1800796 和 rs10941411 与 NODAT 显着相关。rs1800796和rs10941411的显性模型进一步证实了这些风险因素。NODAT组患者和移植肝脏的总生存时间和存活率显着低于非NODAT（P<0.05）。结论:NODAT代表移植的主要代谢并发症。根据这一声明,所有前瞻性移植患者都应该被告知移植后患糖尿病的潜在风险,并且应该鼓励他们在LT之前采取适当的生活方式措施,以降低患糖尿病的风险。此外,葡萄糖失调的筛查应该是系统性的,应该在移植过程的所有阶段进行。由于高血糖的程度可能因NODAT受试者而异,因此选择最合适的药物治疗以实现可接受的血糖控制非常重要。基于移植器官的恢复功能和抗糖尿病药物的毒性特征,应针对每位患者定制抗糖尿病治疗。因此,优化NODAT的预防和管理可以最大限度地降低与此病症相关的急性和长期风险.本研究首次证实GP130 rs1800796和rs10941411基因多态性与肝移植术后NODAT的发生密切相关。它揭示了年龄是NODAT的风险因素。进一步证实NODAT的存活时间和存活率比非NODAT的存活时间和存活率更差。
李嘉丽,黄民[9]（2018）在《器官移植术后免疫抑制剂的药物基因组学研究进展》文中认为器官移植是救治器官功能衰竭最有效的手段,但术后急、慢性排斥反应是导致移植物功能丧失的重要原因之一,因此免疫抑制剂的安全合理应用起着至关重要的作用。然而,临床常用免疫抑制剂普遍具有治疗窗窄、药代动力学及药效动力学个体差异显着的特点,导致其给药剂量难以把握。综述近年来器官移植术后常用免疫抑制剂,包括他克莫司、环孢素、麦考酚酸类药物、西罗莫司、依维莫司、糖皮质激素及抗体类药物的药动学、药效学的相关遗传多态性的研究进展,以期为器官移植术后免疫抑制剂临床个体化治疗提供参考。
王晓硕[10]（2017）在《CYP3A5/3A4 SNPs对儿童肝移植术后他克莫司药动学的影响》文中进行了进一步梳理目的:探讨儿童肝移植受者术后3个月内他克莫司的血药浓度、给药剂量、浓度/剂量比的特点,并总结规律;基于儿童肝移植供者-受者CYP3A5*3和CYP3A4*18B基因多态性进一步分析各基因型受者在术后早期他克莫司的用药特征,并分析基因多态性对Tac代谢的影响及儿童肝移植术后早期他克莫司药物代谢的影响因素,为临床更合理地确定他克莫司的初始剂量提供参考。方法:1、儿童肝移植受者术后早期他克莫司的药动学特点分析:严格按照入选及排除标准筛选符合条件的儿童肝移植受者共80例作为研究对象,在术后第1、3、5、7、14天及1、2、3个月定期监测及记录患者体重、他克莫司的D以及合并用药、肝肾功能指标并采用化学发光酶免疫分析法（CLIA）测定他克莫司C0。分析受者术后3个月内Tac剂量、血药浓度及C0/D特点及个体间差异。2、儿童肝移植供者-受者CYP3A5*3（rs776746）SNPs对他克莫司药动学的影响:采用直接测序法测定儿童活体肝移植供受者CYP3A5*3（rs776746）的基因型。分别按照受体、供体、供受体CYP3A5*3基因型分组分别比较不同分组间Tac的用药特征。以C0/D为因变量,其余生理因素及CYP3A5*3基因多态性为自变量进行多元逐步回归分析,考察儿童肝移植受者术后早期他克莫司C0/D的影响因素。3、儿童肝移植供者-受者CYP3A4*18B（rs12333983）SNPs对他克莫司药动学的影响:采用直接测序法测定CYP3A4*18B（rs12333983）的基因型。分别按照受体、供体、供受体CYP3A4*18B基因型分组分别比较不同分组间Tac的用药特征。以C0/D为因变量,其余生理因素及CYP3A4*18B基因多态性为自变量进行多元逐步回归分析,考察儿童肝移植受者术后早期他克莫司C0/D的影响因素。结果:1、80例儿童活体肝移植术后Tac初始剂量为（0.10±0.03）mg.kg-1.d-1,术后7d内Tac剂量呈渐增趋势,在2m时剂量达到最大值（0.21±0.09）mg.kg-1.d-1,而3m时Tac剂量略有所下降。术后1个月内,仅有28.75%的受者至术后1个月时能够达到靶浓度范围;术后2个月、3个月时,分别有52.5%、57.5%的儿童受者能够达到目标血药浓度。2、80例儿童肝移植受者中,CYP3A5*1等位基因发生率为31.9%,CYP3A5*3发生率为68.1%。CYP3A5*1*1快代谢型组、CYP3A5*1*3中间代谢型组与CYP3A5*3*3慢代谢型组三组间D、C0、C0/D在肝移植术后3个月内各时间点的关系分别分别为:*1*1>*1*3>*3*3、*3*3>*1*3>*1*1、*3*3>*1*3>*1*1。术后3个月内,EX-R/EX-D组、EX-R/NEX-D组Tac剂量均高于NEX-R/NEX-D组;NEX-R/NEX-D组受者C0/D显着高于EX-R/EX-D组及EX-R/NEX-D组;EX-R/EX-D组、EX-R/NEX-D组Tac的C0/D均显着低于NEX-R/NEX-D组,差异均具有统计学意义。CYP3A5基因型对Tac的代谢在术后3个月内均有持续且显着的影响（P<0.05）,占到38.95%,而其中供者CYP3A5*3基因型起主要作用达到31.83%（P=0.003）,受者占7.12%（P=0.024）。3、80例儿童肝移植受者中,CYP3A4*18B等位基因发生率为29.38%,CYP3A4*1发生率为70.62%。CYP3A4*18B*18B快代谢型组、CYP3A4*1*18B中间代谢型组与CYP3A4*1*18B慢代谢型组三组间D、C0、C0/D在肝移植术后3个月内各时间点的关系分别分别为:*18B*18B>*1*18B>*1*1、*1*1>*1*18B>*18B*18B、*1*1>*1*18B>*18B*18B。术后2个月内,EX-R/EX-D组Tac剂量高于NEX-R/NEX-D组,差异具有统计学意义。仅在术后1个月内,NEX-R/NEX-D组C0/D显着高于EX-R/EX-D组、EX-R/NEX-D组,差异具有统计学意义。在遗传因素方面,仅受者CYP3A4*18B基因型对Tac代谢有显着影响（P=0.046）,占到13.66%,而供者CYP3A4*18B基因型并非为Tac代谢的主要影响因素（P>0.05）。结论:1、儿童活体肝移植术后Tac代谢个体间差异较大,C0/D在术后1个月内波动幅度大,而术后1个月至3个月期间处于平稳阶段。仅依靠TDM及临床症状调整剂量很难达到满意的免疫抑制效果,有必要借助药物代谢酶的基因多态性进行个体化给药。2、在纳入研究的80例儿童肝移植受者中,CYP3A5*1等位基因发生率为31.9%,CYP3A5*3发生率为68.1%。携带有CYP3A5*1的受者所需Tac剂量显着高于CYP3A5*3*3型受者,并且其C0/D显着低于后者。3、儿童活体肝移植术后Tac所需剂量与CYP3A5*3基因多态性密切相关,术前检测供受体基因型可以预测Tac的代谢,可以为儿童受者Tac的个体化给药提供可靠参考。4、在纳入的80例儿童肝移植受者中,CYP3A4*18B等位基因发生率为29.38%,CYP3A4*1发生率为70.62%。携带有CYP3A4*18B的受者所需Tac剂量显着高于CYP3A4*1*1型受者,并且其C0/D显着低于后者。5、儿童活体肝移植术后Tac所需剂量仅与受者CYP3A4*18B基因多态性有一定的相关性,术前可通过检测儿童受者CYP3A4*18B基因型预测受者Tac的代谢,可以为儿童受者Tac的个体化给药提供一定程度的参考。
二、肝移植病人TNF-α基因多态性与急性排斥反应的关系（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、肝移植病人TNF-α基因多态性与急性排斥反应的关系（论文提纲范文）
（1）肝移植术后患者他克莫司的血药浓度分布，凝血功能及肝肾功能的探讨（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 绪论 |
| 参考文献 |
| 第一部分 肝移植术后早期应用他克莫司对凝血功能的影响 |
| 前言 |
| 1.研究对象及方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 研究方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 肝移植术后他克莫司谷血药浓度分布 |
| 前言 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 免疫抑制方案 |
| 1.3 血样的采集 |
| 1.4 血样的检测 |
| 1.5 研究方法 |
| 2.结果 |
| 2.1 肝移植受者情况 |
| 2.2 他克莫司血药谷浓度分布 |
| 3.讨论 |
| 3.1 肝移植受者基本情况分析 |
| 3.2 他克莫司血药浓度检测方式 |
| 3.3 他克莫司与免疫诱导治疗 |
| 3.4 他克莫司联合西罗莫司 |
| 参考文献 |
| 第三部分 肝移植术后他克莫司与肝肾功能的关系及其影响因素 |
| 前言 |
| 1.研究对象与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 免疫抑制方案 |
| 1.3 方法 |
| 2.结果 |
| 2.1 肝移植术后应用他克莫司肝功能情况 |
| 2.2 肝移植术后应用他克莫司肾功能情况 |
| 3.讨论 |
| 3.1 肝功能评价指标的选择 |
| 3.2 他克莫司与肝移植术后肝功能的关系 |
| 3.3 他克莫司联合西罗莫司治疗对肝功能的影响 |
| 3.4 肾功能评价指标的选择 |
| 3.5 他克莫司与肝移植术后肾功能的关系 |
| 3.6 他克莫司联合西罗莫司治疗对肾功能的影响 |
| 3.7 他克莫司的药学监护 |
| 参考文献 |
| 总结与展望 |
| 综述 肝移植患者他克莫司血药浓度影响因素 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 科研成果 |
（2）SP-A、TNF-α、GDF-15在AECOPD患者诊断价值的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略词中英文对照表 |
| 第一章 引言 |
| 第二章 资料与方法 |
| 2.1 临床资料 |
| 2.1.1 病例来源及分组 |
| 2.1.2 纳入标准 |
| 2.1.3 排除标准 |
| 2.1.4 问卷调查表 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 肺功能检查 |
| 2.2.2 血标本的收集与处理 |
| 2.3 实验过程 |
| 2.3.1 实验设备 |
| 2.3.2 实验原理 |
| 2.3.3 实验步骤 |
| 2.3.4 计算 |
| 2.4 数据分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 三组临床资料和相关实验室指标比较 |
| 3.2 三组外周血SP-A、TNF-α和GDF-15 表达水平比较 |
| 3.3 加重组SP-A、TNF-α和GDF-15 水平的相关性 |
| 3.4 加重组SP-A、TNF-α和GDF-15 水平分别与FEV1%pred的相关性 |
| 3.5 SP-A、TNF-α和GDF-15 单独检测对AECOPD诊断的ROC曲线分析 |
| 3.6 SP-A、TNF-α和GDF-15 联合检测对AECOPD诊断的ROC曲线分析 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 SP-A在 AECOPD患者的表达水平 |
| 4.2 TNF-α在AECOPD患者的表达水平 |
| 4.3 GDF-15在AECOPD患者的表达水平 |
| 4.4 SP-A、TNF-α和GDF-15对AECOPD患者的临床诊断价值 |
| 4.5 不足与展望 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| COPD病例资料收集表 |
| 致谢 |
（3）供体遗传学和表观遗传学因素对肝移植患者术后他克莫司血药浓度的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词 |
| 引言 |
| 第一部分 供体肝脏遗传学因素对他克莫司血药浓度的影响 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第二部分 HNF4α/HNF4α-AS1/UGT1A4通路对他克莫司血药浓度的影响 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第三部分 ABCB1启动子区DNA甲基化对他克莫司血药浓度的影响 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 综述 肝移植术后免疫抑制剂的应用及个体化给药研究现状 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（4）FK506和MMF联合的自组装载药体系在肝移植急性排斥中的作用研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 中英文缩略词 |
| 序言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 FK506和MMF联合的自组装载药体系的合成及评估 |
| 1 前言 |
| 2 实验材料和方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 实验试剂 |
| 2.3 实验仪器 |
| 2.4 实验方法 |
| 2.5 统计学分析方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 脂肪酸-MMF结合物载药体系的制备及评估 |
| 3.2 Cy5.5标记的载药体系在体内分布 |
| 3.3 LA-MMF纳米颗粒安全性评估 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 6 参考文献 |
| 第二部分 FK506和MMF联合的自组装载药体系在大鼠肝移植急性排斥中的作用研究 |
| 1 引言 |
| 2 实验材料 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 实验试剂 |
| 2.3 实验仪器 |
| 2.4 实验方法 |
| 2.5 统计学分析方法 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 不同免疫抑制方案的生存观察 |
| 3.2 不同免疫抑制剂方案的移植肝脏排斥程度评估 |
| 3.3 不同免疫抑制剂方案的移植肝脏组织学检测 |
| 3.4 不同免疫抑制剂方案移植肝中趋化因子和细胞因子谱的检测 |
| 3.5 不同免疫抑制剂方案肝功能谱的检测 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 6 参考文献 |
| 综述 纳米免疫抑制剂在进展及肝移植中应用 |
| 参考文献 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 |
（5）细胞色素P450基因多态性对他克莫司临床应用的影响（论文提纲范文）
| 1 他克莫司的作用机理及临床应用 |
| 1.1 作用机理 |
| 1.2 临床应用 |
| 2 药物代谢反应与CYP基因多态性 |
| 2.1 药物代谢反应 |
| 2.2 CYP基因多态性 |
| 3 CYP基因多态性对他克莫司应用的影响 |
| 3.1 CYP3A与药代动力学关系 |
| 3.2 CYP3A基因多态性与他克莫司的应用 |
| 3.3 CYP3A基因多态性与他克莫司用量 |
| 4 其他药物对他克莫司浓度影响 |
| 5 结语 |
（6）胆道闭锁婴儿活体肝移植术后早期基于CYP3A5 SNPs的他克莫司群体药动学研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、胆道闭锁婴儿活体肝移植受者术后早期他克莫司药动学的特征及CYP3A5 SNPs的影响 |
| 1.1 对象和方法 |
| 1.1.1 研究对象 |
| 1.1.2 免疫抑制方案 |
| 1.1.3 受者数据收集 |
| 1.1.4 试剂、仪器及设备 |
| 1.1.5 血样采集 |
| 1.1.6 全血DNA的提取 |
| 1.1.7 供、受者CYP3A5*3 基因型的测定 |
| 1.1.8 Tac全血谷浓度的测定 |
| 1.1.9 统计分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 术后不同时间Tac的给药剂量及血药浓度 |
| 1.2.2 多元逐步回归分析术后不同时间Tac血药浓度的影响因素 |
| 1.2.3 CYP3A5 基因型与Tac C_0/D的关系 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 术后早期婴儿受者Tac的血药浓度 |
| 1.3.2 术后早期婴儿受者Tac血药浓度的影响因素 |
| 1.3.3 CYP3A5 基因多态性的影响 |
| 1.4 小结 |
| 二、胆道闭锁婴儿活体肝移植术后早期他克莫司的群体药动学研究 |
| 2.1 对象和方法 |
| 2.1.1 研究对象 |
| 2.1.2 免疫抑制方案 |
| 2.1.3 受者数据收集与整理 |
| 2.1.4 试剂、仪器及软件 |
| 2.1.4.1 试剂、仪器 |
| 2.1.4.2 软件 |
| 2.1.5 血样采集 |
| 2.1.6 全血DNA的提取 |
| 2.1.7 供、受者CYP3A5*3 基因型的测定 |
| 2.1.8 Tac全血谷浓度的测定 |
| 2.1.9 群体药动学模型的建立 |
| 2.1.9.1 基础模型的建立 |
| 2.1.9.2 协变量的筛选 |
| 2.1.9.3 模型评价 |
| 2.1.10 群体药动学模型的外部验证 |
| 2.1.11 群体药动学模型的预测能力评估 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 群体药动学模型 |
| 2.2.1.1 基础模型 |
| 2.2.1.2 协变量筛选 |
| 2.2.1.3 最终模型 |
| 2.2.1.4 模型评价 |
| 2.2.2 群体药动学模型的外部验证 |
| 2.2.3 群体药动学模型的预测能力评估 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 婴儿肝移植受者Tac PPK模型的分析 |
| 2.3.2 婴儿肝移植受者Tac PPK模型协变量的分析 |
| 2.3.3 PPK模型的外部验证和预测能力 |
| 2.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 他克莫司在儿童肝移植受者中的群体药动学研究进展 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）TNF-α基因多态性对肝星状细胞生物学功能的影响及分子机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文名词对照 |
| 引言 |
| 第1章 TNF-α重组质粒及LX-2 稳转细胞株的构建 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 实验结果 |
| 1.4 讨论 |
| 第2章 TNF-α基因多态性对LX-2 生物学功能的影响 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.4 讨论 |
| 第3章 TNF-α基因多态性对NF-κB信号通路的影响 |
| 3.1 材料 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.4 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表论文目录 |
| 致谢 |
（8）肝移植后糖蛋白130多态性与新发糖尿病风险分析（论文提纲范文）
| Acknowledgement |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| Abbreviation |
| 1 Introduction |
| 2 Materials and methods |
| 2.1 Experimental materials |
| 2.2 Experimental method |
| 2.3 statistical analysis |
| 2.4 Diagnostic criteria |
| 3 Results |
| 3.1 Clinical manifestations of NODAT group and Non-NODAT |
| 3.2 Association between gene polymorphism and NODAT |
| 3.3 Risk factors of NODAT |
| 3.4 Establishment of risk factors model for NODAT |
| 3.5 Comparison of curative effect after liver transplantation |
| 3.6 Comparison of overall survival rates and survival rates of liver graft after livertransplantation |
| 4 Discussion |
| 4.1 Metabolic syndrome after liver transplantation |
| 4.2 New onset diabetes mellitus after liver transplantation |
| 4.3 GP130 and diabetes mellitus |
| 4.4 Hepatitis virus and NODAT |
| 4.5 Probable mechanisms of B-cell damage after HCV and CMV leading toNODAT |
| 4.6 Analysis of the incidence of new-onset diabetes mellitus after livertransplantation |
| 4.7 Immunosuppresive Therapy |
| 4.8 Treatment for NODAT |
| 4.9 Significance of this research |
| 5 Conclusion |
| Reference |
| 论文中文版 |
| 1 介绍 |
| 2 材料和方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| Review |
| Reference |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 |
（9）器官移植术后免疫抑制剂的药物基因组学研究进展（论文提纲范文）
| 1 钙调神经磷酸酶抑制剂 |
| 1.1 他克莫司 |
| 1.1.1 药动学相关基因多态性 |
| 1.1.2 药效学相关基因多态性 |
| 1.2 环孢素 |
| 1.2.1 药动学相关基因多态性 |
| 1.2.2 药效学相关基因多态性 |
| 2 麦考酚酸类 |
| 2.1 药动学相关基因多态性 |
| 2.2 药效学相关基因多态性 |
| 3 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白抑制剂 |
| 3.1 西罗莫司 |
| 3.1.1 药动学相关基因多态性 |
| 3.1.2 药效学相关基因多态性 |
| 3.2 依维莫司 |
| 4 糖皮质激素 |
| 4.1 药动学相关基因多态性 |
| 4.2 药效学相关基因多态性 |
| 5 抗体类 |
| 6 结语 |
（10）CYP3A5/3A4 SNPs对儿童肝移植术后他克莫司药动学的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、儿童肝移植受者术后早期他克莫司的药动学特点分析 |
| 1.1 对象和方法 |
| 1.1.1 研究对象 |
| 1.1.2 免疫抑制方案 |
| 1.1.3 临床数据收集 |
| 1.1.3.1 患者基本信息 |
| 1.1.3.2 实验室检查 |
| 1.1.4 全血样本采集 |
| 1.1.5 试剂、仪器及设备 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 受者基本信息 |
| 1.2.2 受者术后Tac剂量、血药浓度及C_0/D特点 |
| 1.2.3 受者术后排斥反应、感染的发生情况 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 Tac的药代动力学 |
| 1.3.2 影响Tac血药浓度的病理生理因素 |
| 1.3.3 年龄对Tac血药浓度的影响 |
| 1.4 小结 |
| 二、儿童肝移植供者-受者CYP3A5*3（rs776746）SNPs对他克莫司药动学的影响 |
| 2.1 对象和方法 |
| 2.1.1 研究对象 |
| 2.1.2 免疫抑制方案 |
| 2.1.3 临床数据收集 |
| 2.1.3.1 患者基本信息 |
| 2.1.3.2 实验室检查 |
| 2.1.4 全血样本采集 |
| 2.1.5 试剂、仪器及设备 |
| 2.1.6 Tac全血谷浓度的测定 |
| 2.1.7 全血DNA的提取 |
| 2.1.8 聚合酶链反应（PCR） |
| 2.1.9 统计学方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 受者CYP3A5*3基因型分布情况 |
| 2.2.2 供受体CYP3A5*3 SNPs对Tac剂量及血药浓度的影响 |
| 2.2.2.1 单独考虑受体CYP3A5*3基因型 |
| 2.2.2.2 单独考虑供体CYP3A5*3基因型 |
| 2.2.2.3 综合考虑供受体CYP3A5*3基因型 |
| 2.2.3 儿童肝移植术后Tac血药浓度的影响因素分析 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 CYP3A5*3多态性对用药的影响 |
| 2.3.2 儿童肝移植供受体CYP3A5 SNPs对Tac代谢的影响 |
| 2.3.2.1 受者肠道CYP3A5基因多态性对Tac代谢的影响 |
| 2.3.2.2 供肝CYP3A5基因多态性对Tac代谢的影响 |
| 2.4 小结 |
| 三、儿童肝移植供者-受者CYP3A4*18B（rs12333983）SNPs对他克莫司药动学的影响 |
| 3.1 对象和方法 |
| 3.1.1 研究对象 |
| 3.1.2 免疫抑制方案 |
| 3.1.3 临床数据收集 |
| 3.1.3.1 患者基本信息 |
| 3.1.3.2 实验室检查 |
| 3.1.4 全血样本采集 |
| 3.1.5 试剂、仪器及设备 |
| 3.1.6 Tac全血谷浓度的测定 |
| 3.1.7 全血DNA的提取 |
| 3.1.8 聚合酶链反应（PCR） |
| 3.1.9 统计学方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 受者CYP3A4*18B基因型分布情况 |
| 3.2.2 供受体CYP3A4*18B SNPs对Tac剂量及血药浓度的影响 |
| 3.2.2.1 单独考虑受体CYP3A4*18基因型 |
| 3.2.2.2 单独考虑供体CYP3A4*18B基因型 |
| 3.2.2.3 综合考虑供受体CYP3A4*18B基因型 |
| 3.2.3 儿童肝移植术后Tac血药浓度的影响因素分析 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
四、肝移植病人TNF-α基因多态性与急性排斥反应的关系（论文参考文献）
- [1]肝移植术后患者他克莫司的血药浓度分布，凝血功能及肝肾功能的探讨[D]. 潘慧. 上海交通大学, 2020(01)
- [2]SP-A、TNF-α、GDF-15在AECOPD患者诊断价值的研究[D]. 校丹. 延安大学, 2020(12)
- [3]供体遗传学和表观遗传学因素对肝移植患者术后他克莫司血药浓度的影响[D]. 时程程. 郑州大学, 2020(02)
- [4]FK506和MMF联合的自组装载药体系在肝移植急性排斥中的作用研究[D]. 朱海. 浙江大学, 2020(01)
- [5]细胞色素P450基因多态性对他克莫司临床应用的影响[J]. 贺希,刘鸿凌. 传染病信息, 2019(03)
- [6]胆道闭锁婴儿活体肝移植术后早期基于CYP3A5 SNPs的他克莫司群体药动学研究[D]. 秦寅鹏. 天津医科大学, 2019(02)
- [7]TNF-α基因多态性对肝星状细胞生物学功能的影响及分子机制研究[D]. 吕舰. 武汉大学, 2019(06)
- [8]肝移植后糖蛋白130多态性与新发糖尿病风险分析[D]. Edoo Muhammad Ibrahim Alhadi. 浙江大学, 2019(03)
- [9]器官移植术后免疫抑制剂的药物基因组学研究进展[J]. 李嘉丽,黄民. 药学进展, 2018(04)
- [10]CYP3A5/3A4 SNPs对儿童肝移植术后他克莫司药动学的影响[D]. 王晓硕. 天津医科大学, 2017(03)