一、Survivin、caspase-3在非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及意义（论文文献综述）
王海娜[1]（2019）在《CRM1抑制剂的设计优化及抗淋巴瘤机制研究》文中提出淋巴瘤是一类起源于淋巴造血系统的恶性肿瘤,是淋巴组织内原有的淋巴细胞或组织细胞发生恶性增生的结果,淋巴瘤约占全球肿瘤的3-4%。随着多年来对其机制的研究,现在认为淋巴瘤的发病原因多与人体的免疫系统相关,但其发病机制尚不明确。CRM1是细胞内重要的核转运蛋白之一,其负责转运的蛋白大约有285个,且这些货物蛋白多与肿瘤的发生密切相关,如抑癌因子survivin、p53、p27κIP1、APC等。研究显示CRM1的表达量与多种类型淋巴瘤的发生密切相关,且CRM1高表达的患者预后较差。天然产物为小分子药物的发现提供了丰富的来源,其结构多样性,化学性质多样性,生物相容性等特征为药物筛选提供了非常好的基础。因此,从自然界中发现能够靶向抑制CRM1的天然小分子,阐明其作用机制,并以此为基础,对小分子进行优化和设计,得到靶向性更强,毒副作用更低的CRM1抑制剂,能为CRM1高表达的淋巴瘤的治疗提供新的治疗方案。本论文主要针对以上问题做了如下几个方面的研究。第一,CRM1蛋白可能为莱菔素（LFS-01）在体内发挥生物学功能的一个重要靶点。本研究首先通过细胞活性检测的方法验证了 LFS-01抑制淋巴瘤细胞增殖的作用,并且发现LFS-01对正常人外周血单核细胞PBMC的增殖基本无影响。通过靶点验证试验及MALDI-TOF质谱试验验证了 LFS-01能够和CRM1发生共价结合,且结合位点为Cys528。通过激光共聚焦检测方法,发现LFS-01能抑制CRM1介导的RanBP1和p53的细胞核输出。通过构建CRM1突变细胞株,证明CRM1是LFS-01在细胞内的主要靶点之一。通过Western blot方法检测,发现LFS-01能够降低细胞内CRM1的蛋白水平。借助流式细胞术,检测到LFS-01能够将淋巴瘤细胞周期抑制在G2-M期,并且能够激活内源性凋亡通路,诱导淋巴瘤细胞凋亡。第二,通过LDH实验、电镜检测、Western blot及激光共聚焦等试验手段,发现LFS-01能够引起淋巴瘤细胞发生自噬。通过检测线粒体和自噬小体及线粒体和溶酶体的共定位,发现LFS-01诱导的自噬属于线粒体自噬。进一步研究发现,LFS-01诱导线粒体自噬发生的两个主要因素分别为AMPK-mTOR通路的激活和p62蛋白表达量的上调。其中,p62表达量上调的主要原因是CRM1被抑制后Nrf2的细胞核输出受阻,从而增加p62基因的转录。通过建立小鼠模型,发现LFS-01能够通过诱导细胞凋亡和细胞自噬来抑制小鼠体内肿瘤细胞的生长。第三,通过计算机辅助的药物设计,借助Discovery Studio工具,以CRM1和LFS-01的结合构象为基础,进行了基于受体结构的药物生长,得到一系列能够靶向CRM1的小分子。通过虚拟筛选结合经验分析,合成了4个代表性小分子。通过抗肿瘤活性检测,发现LFS-25的活性最好。与LFS-01相比,LFS-25的活性提高了 50倍。通过分子动力学模拟和MM-PBSA能量分解分析,发现LFS-25靶向性增强的原因可能是与NES 口袋中的氨基酸残基有更强的范德华力△Evdw和静电相互作用△Eele。通过对内源性货物蛋白RanBP1和p53的出核抑制检测及对外源性NES-GFP蛋白和Foxo1-GFP蛋白的出核抑制检测,证实了 LFS-25对CRM1的靶向抑制活性。并且发现Cys528是LFS-25靶向作用于CRM1的重要氨基酸。在弥漫性大B细胞淋巴瘤中,通过激光共聚焦和Western blot手段,观察到IκBα在细胞核内的聚集。通过免疫共沉淀技术,检测到随着药物浓度的增加,滞留在细胞核内的IκBα和NF-κB的相互作用增强。通过双荧光素酶报告基因检测技术,观察到NF-κB的转录活性被LFS-25抑制。最后,通过流式细胞术发现LFS-25能够将细胞周期抑制在G1期,同时激活细胞凋亡信号通路,诱导细胞发生凋亡。本论文通过多种实验检测手段阐明了莱菔素靶向作用CRM1和抑制淋巴瘤细胞增殖的作用机制,并以莱菔素为先导化合物,设计了具有更强靶向性和抗淋巴瘤作用的小分子药物LFS-25,并且对LFS-25杀伤大B细胞淋巴瘤的机制做了初步探讨。
沙亚哈提·别尔克哈之[2]（2017）在《食管鳞癌中survivin对Bad基因调控机制的研究》文中提出目的:作为凋亡抑制蛋白家族成员之一,Survivin及其相关的抗凋亡蛋白共同作用促进肿瘤细胞增殖,抑制细胞凋亡,是目前发现的最强的凋亡抑制因子,而Survivin的异常激活在包括食管癌在内的多种癌症里促进肿瘤细胞增殖,其在肿瘤组织中持续高表达的分子机制未见报道;Bad是Bcl-2蛋白家族成员之一,是细胞凋亡的正调控因子;我们以往的研究结果显示,Survivin是参与食管癌发生发展最重要的原癌基因。我们最新研究结果显示,新疆哈萨克族食管癌发生发展重要的原癌基因Survivin,在小样本癌组织中的表达水平与Bad呈负相关,并且在癌细胞中Bad在转录水平随Survivin的变化而改变。但目前Survivin与Bad之间的关系尚不清楚。我们推测,Survivin可能作为转录调控因子,调控Bad的表达。Survivin未知的调控作用将会打破对Survivin传统的认识。因此,本研究通过使用多种技术手段调控食管鳞癌细胞中survivin的表达,来探讨survivin是否通过下调Bad的表达抑制该基因的活性;最后对survivin调控Bad的作用位点,以及调控survivin的表达对细胞生物行为的影响进行研究。在本研究中,我们首先在食管鳞癌组织标本中确认Bad和Survivin的相关性;其次,采用RNA干扰、实时荧光定量PCR、Western blot、流式细胞技术等方法,在食管癌细胞株KYSE450,Eca109中,通过沉默或过表达Survivin检测Bad的mRNA与蛋白表达水平以及细胞周期凋亡状态;同时过表达Bad检测survivin和Bad在基因转录与蛋白表达水平以及细胞周期凋亡状态;并运用ChIP方法寻找Survivin调控Bad的证据;并用Survivin特异性抑制剂YM155在两种食管癌细胞系中通过抑制Survivin的活性而引起细胞凋亡,进而强烈抑制食管癌细胞增殖。同时研究survivin特异性抑制剂与传统化疗药Dox和VP-16联用时是否能增强食管鳞癌细胞对化疗敏感性,从而降低这些细胞对Dox和VP-16的药物耐受。方法:1.转录水平检测survivin和Bad mRNA在食管癌鳞状细胞癌组织与远端无癌组织中的表达差异及相关性分析,探讨survivin和Bad的表达在食管鳞癌组织中是否与其他病理临床指标是否具有相关性。2.构建Survivin的过表达载体及shRNA载体,使用电转染方法将质粒转染食管鳞状细胞癌的细胞株,全培养基培养的细胞作为空白对照组。48h后收集细胞提取总RNA和蛋白,使用RT-qPCR以及Western-blotting检测Survivin、Bad和Caspase-3的表达,验证转染效率及Bad与Survivin的调控关系。使用流式细胞仪对细胞的周期和凋亡情况进行检测,评估上调或者下调Survivin表达对细胞周期和凋亡的影响。3.染色质免疫共沉淀实验:为了证实Survivin蛋白能够通过与Bad启动子区的直接或间接结合来调控Bad启动子的转录活性,影响Bad的活化。我们将GV142-survivin过表达重组质粒转染入KYSE450和ECA109细胞,使用Survivin抗体免疫沉淀与Survivin蛋白结合的DNA片段,并使用针对Bad启动子区设计的特异性引物进行PCR扩增,以鉴定免疫沉淀的DNA片段。4.Survivin特异性抑制剂YM155以适当的浓度作用于ESCC KYSE450和KYSE510细胞,完全培养基处理细胞作为空白对照组。药物作用48h后进行细胞成像和细胞活力检测;同时提取细胞总蛋白,使用Western-blotting检测survivin、Bad、Caspase-3的表达水平,验证YM155是否通过抑制Survivin活性而引起细胞凋亡,进而抑制食管癌细胞的增殖。其次,用不同浓度的YM155,Dox,VP-16单独和共同处理ESCC KYSE450和KYSE510细胞。48h后提取细胞蛋白,用蛋白质免疫印迹法检测Bad,Caspase-3,PARP,验证YM155与传统的化疗药Dox和VP-16联合作用能否引起肿瘤细胞凋亡,是否增加食管癌细胞对化疗致敏,从而降低这些细胞对Dox和VP-16的药物耐受。5.细胞集落形成的软琼脂测定法是检测肿瘤细胞独立生存及迁移能力的一种方法,集落形成能力是评价肿瘤细胞恶性程度的重要指标。培养ESCC KYSE450和KYSE510细胞,将适当数量的细胞接种于含软琼脂/完全培养基的细胞培养板中,24h后将不同浓度的YM155加入到软琼脂胶状物顶层,将细胞培养板放入细胞培养箱中生长2至3周,当用显微镜观察到细胞集落在呈现出黄豆粒大小时用结晶紫染色,4h后用Bio-Rad凝胶成像系统拍照并用“Quantity One”软件对每孔集落数进行计数。验证YM155是否通过抑制Survivin的活性进而抑制肿瘤细胞的生长。结果:1.40对食管癌组织和对应的远端无癌组织中,survivin的阳性表达率为88%,远高于对应的远端无癌组织中47.5%的表达率,差异显着（P<0.05）;而Bad在远端无癌组织中的阳性率为95%,高于食管鳞癌组织中70%的阳性率,差异显着（P<0.05）;在食管癌组织中survivin的表达与低分化之间呈正相关（r=0.412,P=0.009）,而Bad与肿瘤分化程度之间没有相关性;Survivin和Bad的mRNA转录水平与其他各临床病理指标之间均无相关性。2.Survivin过表达质粒转染使得KYSE450和ECA109细胞中Survivin的mRNA转录水平和蛋白表达水平显着增高,而Bad的mRNA转录水平和蛋白表达水平显着降低;同时抑制了两种细胞的细胞凋亡,引起G2/M期的缩短,S期比率显着增多,并促进了细胞增殖。3.Survivin shRNA重组质粒转染KYSE450和ECA109细胞后,细胞中Survivin的mRNA转录和蛋白水平表达水平均显着降低,而Bad的mRNA转录和蛋白表达水平均显着增高;流式细胞检测显示,两种细胞的G1/S期转换受到明显抑制,细胞周期阻滞,细胞凋亡加剧。4.染色质免疫共沉淀实验显示,在KYSE450和ECA109细胞中,survivin蛋白可能与Bad启动子有结合位点。YM155可以抑制ESCC中survivin的活性,通过下调survivin的表达抑制KYSE450和KYSE510的细胞活力,抑制其生长并诱导细胞凋亡。此外,YM155能够抑制KYSE450和KYSE510细胞的集落形成潜力;YM155与Dox和VP-16联用可以显着提高KYSE450和KYSE510细胞对化疗的敏感性,从而降低两种细胞对Dox和VP-16的药物耐受。结论:1.在食管癌组织中,Survivin的表达高于对应的远端无癌组织,Bad的表达低于对应的远端无癌组织;survivin与Bad的转录具有相关性,survivin可能作为转录因子调控Bad的表达,两者之间为负调控关系。Survivin可能参与了食管鳞癌的发生及进程。2.在KYSE450和ECA109细胞株中,survivin蛋白可能是通过结合Bad的基因启动子区抑制Bad的转录,进而抑制肿瘤细胞的凋亡,促进肿瘤细胞增殖。3.在食管鳞癌细胞中,survivin可能参与细胞周期G1/S期转换,而促凋亡基因Bad不仅参与细胞凋亡,也参与细胞周期变化,延长G2/M期,抑制细胞增殖进而引起细胞凋亡。4.KYSE450和ECA109细胞株中,survivin蛋白与Bad的基因启动子区可能有结合位点,该位点可能位于Bad基因启动子区-500bp以内。小分子化合物YM155可以单独作用或与较低浓度Dox和VP-16联合作用促进肿瘤细胞凋亡,降低化疗药物毒性,抑制肿瘤细胞的增殖;本研究中survivin与Bad之间分子调控机制的发现,将为临床药物干预提供新的靶点,并可作为ESCC诊断和治疗中的新指标。
王芬,林红,赵桂秋,林静,胡丽婷,鲁军霞[3]（2016）在《眼附属器MALT淋巴瘤Survivin及Caspase-3表达及意义》文中认为目的研究人生存素（Survivin）及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）在眼附属器黏膜相关淋巴组织（MALT）淋巴瘤组织的表达及其相关性,探讨两者与眼附属器MALT淋巴瘤发病的关系及临床意义。方法收集经病理检查确诊的眼附属器MALT淋巴瘤组织标本50例作为实验组,同时收集反应性淋巴组织增生组织标本12例作为对照组,采用免疫组织化学染色法分别检测两组标本中Survivin及Caspase-3的表达,并对两者的相关性进行统计学分析。结果两组Survivin及Caspase-3蛋白阳性表达率比较,差异有显着意义（χ2=24.60、8.37,P<0.05）。Survivin及Caspase-3蛋白表达均与Ann Arbor临床分期明显相关（χ2=5.82、7.03,P<0.05）;而与病人的年龄、性别无关（P>0.05）。Survivin与Caspase-3在眼附属器MALT淋巴瘤中的表达呈负相关（r=-0.303,P<0.05）。结论 Survivin及Caspase-3可能在眼附属器MALT淋巴瘤的发生发展中起一定的作用,Survivin可能通过抑制Caspase-3的活性从而抑制眼附属器MALT淋巴瘤细胞的凋亡。
王芬[4]（2016）在《Survivin及Caspase-3在眼附属器MALT淋巴瘤中的表达及意义》文中指出目的研究人生存素（Survivin）及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）在眼附属器黏膜相关淋巴组织（mucosa-associated lymphoid tissue,MALT）淋巴瘤组织中的表达及其相关性,探讨两者与眼附属器MALT淋巴瘤发病的关系及临床意义。方法收集经病理检查确诊的眼附属器MALT淋巴瘤组织标本50例作为实验组,同时搜集12例眼部反应性淋巴组织增生标本作为对照组,两组中Survivin及Caspase-3的表达用免疫组织化学染色法进行检测,并对两者的表达及相关性进行统计学分析。结果两组Survivin蛋白及Caspase-3阳性表达率比较,差异有显着性（χ2=24.60、8.37,P<0.05）。Survivin及Caspase-3蛋白表达均与Ann Arbor临床分期明显相关（χ2=5.82、7.03,P<0.05）;而与病人年龄、性别无关（P>0.05）。生存素与Caspase-3在眼附属器MALT淋巴瘤中的表达呈负相关（r=-0.303,P<0.05）。结论Survivin及Caspase-3可能在眼附属器MALT淋巴瘤的发生发展中起一定的作用,Survivin调控眼附属器MALT淋巴瘤细胞的凋亡可以通过抑制Caspase-3的活性进行。
鲁军霞,林红,王芬,林静,张丽娜,赵桂秋[5]（2015）在《Livin及Caspase-3在眼附属器淋巴组织增生病变中的表达》文中研究指明目的:探讨眼附属器淋巴组织增生性病变组织中Livin和Caspase-3的表达情况及临床意义。方法:收集1995-06/2015-06青岛大学附属医院眼科病理室石蜡包埋标本,采用免疫组化法检测40例眼部B细胞非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma,NHL）、10例反应性淋巴组织增生组织中Livin和Caspase-3的表达情况,以患者的年龄、性别、发病部位、病理类型分级作为眼附属器淋巴瘤的分类标准。结果:Livin及Caspase-3的表达与年龄、性别及发病部位无关,而与病理分级有关,Livin在淋巴瘤中的表达率显着高于反应性淋巴组织增生组织（P<0.05）,且随着病理分级恶性程度的增加其表达逐渐上升（P<0.05）;Caspase-3在淋巴瘤中的表达率则显着低于反应性淋巴组织增生（P<0.05）,且随病理分级的增加其表达逐渐降低（P<0.05）。在NHL中,Livin和Caspase-3两者的表达呈负相关（r=-0.491,χ2=7.519,P<0.05）。结论:过量的Livin表达及Caspase-3的低表达可能与眼部淋巴瘤的发生有关,且在NHL中两者表现为负相关,联合检测两种蛋白对眼部B细胞淋巴瘤的临床表现及病理分型有重要意义。
张玉娜[6]（2012）在《XIAP、Survivin、Bcl-2、Caspase-3和PCNA在B细胞非霍奇金淋巴瘤中的表达及意义》文中认为目的：非霍奇金淋巴瘤（NHL）是常见的淋巴造血系统恶性肿瘤,是淋巴瘤中最常见的类型。统计学研究结果显示,近年来我国NHL的发病率呈现不断升高的趋势,而总体治疗效果不是很理想,死亡率仍较高,严重危害人类健康。治疗的关键是对其发生机制的认识程度。大量研究显示细胞增殖和凋亡的调控失常是肿瘤发生的基础,本研究通过对非霍奇金淋巴瘤中的B细胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）增殖和凋亡相关指标（XIAP、Survivin、Bcl-2、Caspase-3和PCNA）的表达研究,旨在探讨B细胞非霍奇金淋巴瘤发生、发展的机制,以期为临床诊断、治疗及预后提供理论依据。方法：收集天津医科大学总医院病理科2008-2010年手术切除、病理诊断证实为B-NHL的石蜡标本50例,其中包括弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）41例,滤泡性淋巴瘤（FL）7例,套细胞淋巴瘤（MCL）2例。另选取同期淋巴结反应性增生的石蜡包埋标本20例作为对照。所有蜡块均为常规福尔马林固定,石蜡包埋；采用4μ m连续切片,应用免疫组织化学染色PV6000两步法检测B-NHL病例和淋巴结反应性增生病例中XIAP、Survivin、Bcl-2、 Caspase-3和PCNA的表达情况。应用SPSS16.0统计软件包进行数据处理,定性资料用χ2检验,定量资料用t检验和方差分析,相关分析用Pearson相关分析,P<0.05为有统计学意义。结果：1、XIAP蛋白阳性表达位于细胞浆,呈棕黄色或棕褐色颗粒,胞核未见着色。50例B-NHL中29例为阳性,21例阴性,阳性率为58%；20例反应性增生淋巴结病例,6例阳性,14例阴性,阳性率为30%。XIAP在B-NHL中的阳性率高于反应性增生淋巴结,差异有统计学意义（χ2=4.48,P<0.05）。XIAP表达与淋巴瘤各病理参数之间的差异均无统计学意义（均P>0.05）。2、Survivin蛋白阳性表达位于细胞核,呈棕黄色或棕褐色颗粒,胞浆未见着色。50例B-NHL中40例为阳性,10例阴性,阳性率为80%；20例反应性增生淋巴结病例中,6例阳性,14例阴性,阳性率为30%。Survivin在B-NHL中的阳性率高于反应性增生淋巴结,差异有统计学意义（χ2=15.815,P<0.01）。Survivin表达与淋巴瘤各病理参数之间的差异均无统计学意义（均P>0.05）。3、Bcl-2蛋白阳性表达位于细胞浆和细胞膜,呈棕黄色或棕褐色颗粒,50例B-NHL中39例阳性,11例为阴性,阳性率为78%；20例反应性增生淋巴结中7例阳性,13例阴性,阳性率为35%。Bcl-2在B-NHL中的阳性率高于反应性增生淋巴结,二者差异有统计学意义（χ2=14.643,P<0.01）。Bcl-2表达与淋巴瘤各病理参数之间差异均无统计学意义（均P>0.05）。4、Caspase-3蛋白阳性表达位于细胞浆,呈棕黄色或棕褐色,胞核未见着色。50例B-NHL中30例阳性,20例阴性,阳性率为60%；20例反应性增生淋巴结病例,19例阳性,1例阴性,阳性率为95%。Caspase-3在反应性增生淋巴结中的阳性率高于B-NHL,差异有统计学意义（χ2=6.750,P<0.05）。Caspase-3表达与淋巴瘤各病理参数之间差异均无统计学意义（均P>0.05）。5、PCNA蛋白阳性表达位于细胞核,呈棕黄色或棕褐色,50例B-NHL中,PCNA阳性表达率为（59.94±20.02）%；20例反应性增生淋巴结中PCNA阳性表达率为（9.7±8.7）%,阳性细胞主要位于滤泡生发中心,套区少见。PCNA在B-NHL中的阳性表达率高于反应性增生淋巴结,差异有统计学意义（t=10.776,P<0.05）。PCNA表达与淋巴瘤临床分期有关（t=-2.223,P=0.031）,与其他各病理参数之间差异均无统计学意义（均P>0.05）。6、相关分析显示,在本组B细胞非霍奇金淋巴瘤研究中,XIAP与Survivin的表达呈正相关（r=0.616,P<0.01）；XIAP与Bcl-2的表达无相关性（r=0.162,P>0.05）; XIAP与Caspase-3的表达呈负相关（r=-0.289,P<0.05）；XIAP与PCNA的表达呈正相关（r=0.328,P<0.05）；Caspase-3与Survivin的表达呈负相关（r=-0.156,P<0.05）；Caspase-3与Bcl-2的表达呈负相关（r=-0.463,P<0.05）。结论：1、XIAP、Survivin、Bcl-2在本组B-NHL中的表达水平显着高于反应性增生淋巴结,提示XIAP、Survivin、Bcl-2参与了B-NHL的发生,其可能的机制是在不同环节抑制凋亡过程；2、Caspase-3在本组B-NHL中的表达水平显着低于反应性增生淋巴结,提示Caspase-3表达下调使其介导的细胞凋亡途径受到抑制,从而参与了B-NHL的发生;3、PCNA在本组B-NHL中的阳性表达率显着高于反应性增生淋巴结,提示细胞增殖过度也参与了B-NHL的发生；4、XIAP与Survivin的表达呈正相关,提示二者可能协同参与了本组B-NHL淋巴瘤的发生；5、XIAP与Bcl-2的表达无明显相关关系,提示二者可能通过不同的途径抑制凋亡参与B-NHL的发生；6、XIAP、Survivin和Bcl-2与Caspase-3的表达均呈负相关,提示XIAP、Survivin和Bcl-2抑制凋亡的机制都与抑制Caspase-3有关；7、XIAP与PCNA的表达呈正相关,提示XIAP在本组B-NHL发生过程中,不仅参与细胞凋亡的抑制,可能同时还参与促进细胞增殖。
李敏婕[7]（2009）在《COX-2和Survivin在非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及相关性研究》文中提出目的探讨环氧化酶-2（COX-2）和Survivin蛋白在非霍奇金淋巴瘤组织中的表达与生物学行为之间的关系,并探讨二者的相关性。方法用免疫组织化学法对51例非霍奇金淋巴瘤和11例瘤旁非肿瘤淋巴组织的COX-2和Survivin蛋白的表达进行检测。结果51例非霍奇金淋巴瘤中COX-2和Survivin蛋白的阳性表达率分别为74.5%和60.8%;二者在11例瘤旁非肿瘤淋巴组织中均未发现阳性表达。COX-2的表达与临床分期有关。COX-2的表达与Survivin蛋白的表达密切相关（r=0.452,P<0.01）。二者的表达与患者的性别、年龄无关。结论COX-2和Survivin蛋白的协同作用可能在非霍奇金淋巴瘤的发生发展过程中起重要作用。
杨顺娥,张国庆[8]（2009）在《Survivin在非霍奇金淋巴瘤中的研究进展》文中指出
金永丽,王靖华,陈龙邦,周航波[9]（2008）在《survivin在鼻型NK/T细胞淋巴瘤的表达及其与caspase-3、ki-67相关性的研究》文中指出目的:探讨survivin在鼻型NK/T细胞淋巴瘤中的表达,并进一步分析其表达与caspase-3基因表达和细胞增殖的关系。方法:应用免疫组化EnVision System检测survivin、caspase-3和ki-67在50例鼻型NK/T细胞淋巴瘤和12例正常淋巴结组织石蜡标本中的表达,并分析肿瘤组织中survivin与caspase-3基因表达、ki-67增殖指数的关系。结果:肿瘤组织中survivin阳性表达率为60%（30/50）,正常淋巴结组织中survivin阳性表达率为16.7%（2/12）,且主要局限于少数生发中心细胞,两者差异有显着性（P<0.05）;caspase-3在肿瘤组织和正常淋巴结中的阳性表达率分别为84%（42/50）和100%（12/12）,但两者差异无显着性统计学意义（P>0.05）。survivin高表达与caspase-3基因表达下调密切相关（P<0.05）。survivin阳性组ki-67增殖指数（38.23±16.54）%明显高于survivin阴性组（23.15±21.53）%（P<0.05）。结论:在鼻型NK/T细胞淋巴瘤组织中,survivin可能通过抑制caspase-3的激活而发挥其抑制细胞凋亡的作用,survivin与细胞增殖指数呈正相关,可能促进肿瘤细胞增殖。survivin异常表达在鼻型NK/T细胞淋巴瘤的发生发展中有一定的作用。
陈丽霞[10]（2008）在《Survivin、P27及Ki-67在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其对淋巴瘤细胞凋亡和增殖的影响》文中进行了进一步梳理目的探讨survivin、p27及ki-67在非霍奇金淋巴瘤中表达及其对淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响。材料和方法收集2005年1月至2007年3月本院病理科诊断为“非霍奇金淋巴瘤”的石蜡标本44例,淋巴结反应性增生20例。所收集非霍奇金淋巴瘤病例按照WHO 2001年新标准进行分类诊断,应用免疫组化技术检测survivin、p27及ki-67表达水平。最后应用SPSS13.0统计软件对所得数据进行分析。结果（ 1）44例非霍奇金淋巴瘤中,Survivin表达阳性率为88.64%（39/44）,Ki-67表达阳性率为86.36%（38/44）,均明显高于淋巴结反应性增生（P<0.05）;P27表达阳性率为52.27%（23/44）,明显低于淋巴结反应性增生（P<0.05）。（2）Survivin表达与p27表达呈明显负相关,与ki-67表达呈明显正相关（P<0.05）,P27与ki-67表达也呈明显负相关（P<0.05）。（3）Survivin、p27、ki-67在非霍奇金淋巴瘤组织中的表达与性别、年龄、患者临床分期、有无全身症状、淋巴瘤细胞来源、首发部位和血清乳酸脱氢酶值均无明显相关。结论survivin、p27和ki-67的表达可能在非霍奇金淋巴瘤的发生发展中起着重要的作用,影响淋巴瘤细胞的增殖和凋亡,可以作为非霍奇金淋巴瘤极有价值的分子生物学预后指标,有助于指导临床治疗及改善预后。联合检测survivin、p27和ki-67用于判断非霍奇金淋巴瘤的恶性度、侵袭程度以及预后具有有效性和可行性。
二、Survivin、caspase-3在非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及意义（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、Survivin、caspase-3在非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及意义（论文提纲范文）
（1）CRM1抑制剂的设计优化及抗淋巴瘤机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要符号表 |
| 1 绪论 |
| 1.1 淋巴瘤概述 |
| 1.1.1 淋巴瘤的分类 |
| 1.1.2 淋巴瘤的流行病学 |
| 1.1.3 淋巴瘤的病因 |
| 1.1.4 淋巴瘤的治疗现状 |
| 1.2 异硫氰酸酯类化合物 |
| 1.2.1 十字花科植物与异硫氰酸酯 |
| 1.2.2 异硫氰酸酯类化合物的药理作用 |
| 1.2.3 莱菔素和莱菔硫烷 |
| 1.3 细胞核转运蛋白CRM1及其抑制剂研究进展 |
| 1.3.1 CRM1结构与功能 |
| 1.3.2 CRM1过表达与肿瘤的关系 |
| 1.3.3 靶向CRM1抑制剂的研究现状 |
| 1.4 细胞凋亡和细胞自噬 |
| 1.4.1 细胞凋亡 |
| 1.4.2 细胞自噬 |
| 1.5 基于计算的理性药物设计 |
| 1.5.1 基于FIPsDock的分子对接 |
| 1.5.2 分子动力学模拟及自由能计算 |
| 1.6 本文主要研究思路及意义 |
| 2 LFS-01抑制淋巴瘤细胞增殖的机制研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料及设备 |
| 2.2.1 细胞系 |
| 2.2.2 实验材料及主要试剂 |
| 2.2.3 实验设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 细胞培养及稳转细胞株构建 |
| 2.3.2 细胞活性检测实验 |
| 2.3.3 CRM1货物蛋白的细胞核输出抑制实验 |
| 2.3.4 MALDI-TOF-MS检测LFS-01与NES结合位点的相互作用 |
| 2.3.5 流式细胞术检测细胞周期抑制 |
| 2.3.6 流式细胞术检测细胞凋亡 |
| 2.3.7 Western Blot检测 |
| 2.3.8 统计学分析 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 LFS-01对淋巴瘤细胞及正常PBMC细胞增殖的抑制 |
| 2.4.2 LFS-01靶向CRM1抑制RanBP1和p53蛋白的细胞核输出 |
| 2.4.3 LFS-01和CRM1底物结合位点肽段的结合检测 |
| 2.4.4 LFS-01对CRM1突变细胞株的影响 |
| 2.4.5 LFS-01对CRM1蛋白表达量的影响 |
| 2.4.6 LFS-01对淋巴瘤细胞周期的影响 |
| 2.4.7 LFS-01诱导淋巴瘤细胞发生凋亡 |
| 2.4.8 LFS-01对caspase家族蛋白的影响 |
| 2.5 本章小结 |
| 3 LFS-01诱导淋巴瘤细胞发生线粒体自噬的机制研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料及设备 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 LFS-01对细胞形态的影响 |
| 3.3.2 LDH检测 |
| 3.3.3 透射电镜观察细胞自噬 |
| 3.3.4 激光共聚焦和Western blotting检测自噬蛋白LC-3Ⅱ的变化 |
| 3.3.5 线粒体和自噬小体的共定位检测 |
| 3.3.6 线粒体和溶酶体的共定位检测 |
| 3.3.7 细胞自噬对药物作用的影响 |
| 3.3.8 Nrf2细胞核定位检测及p62蛋白水平检测 |
| 3.3.9 AMPK和mTOR磷酸化水平检测 |
| 3.3.10 RNAseq数据分析 |
| 3.3.11 动物实验 |
| 3.3.12 统计学分析 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 LFS-01对细胞形态的影响 |
| 3.4.2 LFS-01对细胞LDH释放水平影响 |
| 3.4.3 LFS-01诱导淋巴瘤细胞发生线粒体自噬 |
| 3.4.4 细胞自噬蛋白LC-3Ⅱ点状化分布及蛋白水平变化 |
| 3.4.5 线粒体和自噬小体的共定位检测 |
| 3.4.6 线粒体和溶酶体的共定位检测 |
| 3.4.7 细胞自噬促进淋巴瘤细胞死亡 |
| 3.4.8 LFS-01对淋巴瘤细胞株转录组的影响 |
| 3.4.9 LFS-01抑制Nrf2核输出进而增加p62蛋白表达 |
| 3.4.10 LFS-01可以激活细胞内AMPK-mTOR信号通路 |
| 3.4.11 抑制AMPK磷酸化能够抑制自噬发生 |
| 3.4.12 动物实验 |
| 3.5 本章小结 |
| 4 以LFS-01为先导化合物的CRM1抑制剂的设计和优化 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料与方法 |
| 4.2.1 受体和配体小分子的准备及对接 |
| 4.2.2 基于片段的药物设计(FBDD) |
| 4.2.3 虚拟筛选 |
| 4.2.4 分子动力学模拟 |
| 4.2.5 MM-PBSA结合自由能计算 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 CRM1抑制剂小分子库的构建 |
| 4.3.2 虚拟筛选得到LFS-25 |
| 4.3.3 能量分解比较LFS-01和LFS-25的差异 |
| 4.4 本章小结 |
| 5 LFS-25抑制大B细胞淋巴瘤增殖的机制研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验材料及设备 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 质粒的转化、扩增及提取 |
| 5.3.2 细胞培养及瞬转细胞株构建 |
| 5.3.3 细胞活性检测 |
| 5.3.4 CRM1货物蛋白的细胞核输出抑制实验 |
| 5.3.5 IκBα细胞核输出抑制 |
| 5.3.6 Western Blotting检测IκBα的磷酸化水平变化 |
| 5.3.7 IκBα和NF-κB的免疫共沉淀 |
| 5.3.8 双荧光素酶报告基因检测NF-κB转录活性 |
| 5.3.9 流式细胞术检测细胞周期抑制 |
| 5.3.10 流式细胞术检测细胞凋亡 |
| 5.3.11 Western Blotting检测凋亡通路蛋白变化 |
| 5.3.12 统计学分析 |
| 5.4 结果与讨论 |
| 5.4.1 质粒的核酸电泳检测 |
| 5.4.2 LFS-25对细胞生长的抑制 |
| 5.4.3 LFS-25抑制RanBP1和p53的细胞核输出 |
| 5.4.4 LFS-25抑制NES-GFP和Foxo1-GFP的蛋白核输出 |
| 5.4.5 LFS-25对CRM1的抑制依赖Cys528 |
| 5.4.6 IκBα细胞核输出抑制 |
| 5.4.7 Western Blotting检测IκBα的磷酸化水平变化 |
| 5.4.8 IκBα和NF-κB的免疫共沉淀 |
| 5.4.9 NF-κB磷酸化水平变化 |
| 5.4.10 荧光素酶报告基因检测NF-κB转录活性 |
| 5.4.11 流式细胞术检测细胞周期抑制 |
| 5.4.12 流式细胞术检测细胞凋亡 |
| 5.4.13 Western Blotting检测凋亡通路蛋白变化 |
| 5.5 本章小结 |
| 6 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 创新点 |
| 6.3 展望 |
| 参考文献 |
| 附录A LFS-01对Raji和JeKo-1细胞转录组的影响 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 攻读博士学位期间科研项目及科研成果 |
（2）食管鳞癌中survivin对Bad基因调控机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 食管鳞癌组织中survivin和 Bad的表达研究 |
| 引言 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.1.1 纳入、排除标准 |
| 1.1.2 病例资料 |
| 1.1.3 组织标本的取材及收集 |
| 1.2 内容与方法 |
| 1.2.1 主要试剂 |
| 1.2.2 主要仪器 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.3.1 组织总 RNA 抽提 |
| 1.3.2 引物设计 |
| 1.3.3 检测 RNA 浓度,纯度 |
| 1.3.4 逆转录成 cDNA |
| 1.3.5 RT-PRC 反应 |
| 1.4 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4.小结 |
| 第二部分 Survivin过表达载体和survivinshRNA载体对食管癌细胞株的影响 |
| 1.研究内容与方法 |
| 1.1 细胞株 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 细胞总RNA提取 |
| 1.6 蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB) |
| 1.7 GV142-survivin 过 表达 载体转染对食管鳞癌 KYSE450 、ECA109 细胞中 survivin、Bad 表达的影响 |
| 1.8 构建 LV3-survivin shRNA载体转染食管鳞癌 KYSE450、ECA109 细胞中survivin、Bad表达的影响 |
| 1.9 统计学处理 |
| 2.结果 |
| 3 讨论 |
| 4.小结 |
| 第三部分 survivin对 Bad调控位点的确认以及YM155与Dox和 VP-16 联合作用下调survivin表达的调控作用研究 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 细胞株 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 1.4 染色质免疫共沉淀实验 |
| 1.5 Survivin 抑制剂 YM155 对食管癌细胞活力和 survivin 等基因表达的影响 |
| 1.6 Survivin 抑制剂 YM155 与 Dox 和 VP-16 联合作用对食管癌细胞活力和survivin等基因表达的影响 |
| 1.7 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4.小结 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间获得的学术成果 |
| 个人简历 |
| 新疆医科大学博士研究生学位论文导师评阅表 |
（3）眼附属器MALT淋巴瘤Survivin及Caspase-3表达及意义（论文提纲范文）
| 1 对象与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 结果判定 |
| 1.4 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 HE染色 |
| 2.2 两种蛋白在各组织中的表达 |
| 2.3 两种蛋白表达与眼附属器MALT淋巴瘤临床病理特征的关系 |
| 2.4 两种蛋白在眼附属器MALT淋巴瘤组织中表达的关系 |
| 3 讨论 |
（4）Survivin及Caspase-3在眼附属器MALT淋巴瘤中的表达及意义（论文提纲范文）
| 英文缩略词 |
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一章 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 材料来源 |
| 1.1.2 主要试剂 |
| 1.1.3 所需仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 切片的制备 |
| 1.2.2 常规苏木精-伊红(HE)染色 |
| 1.2.3 免疫组织化学染色 |
| 1.2.4 结果判定 |
| 1.3 统计学处理 |
| 第二章 结果 |
| 2.1 HE染色结果 |
| 2.2 免疫组织化学染色结果 |
| 2.3 Survivin与Caspase-3在眼附属器MALT淋巴瘤中表达的关系 |
| 第三章 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 致谢 |
（5）Livin及Caspase-3在眼附属器淋巴组织增生病变中的表达（论文提纲范文）
| 0引言 |
| 1材料和方法 |
| 1. 1材料 |
| 1. 2方法 |
| 2结果 |
| 3讨论 |
（6）XIAP、Survivin、Bcl-2、Caspase-3和PCNA在B细胞非霍奇金淋巴瘤中的表达及意义（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 对象和方法 |
| 1 研究对象 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 主要试剂 |
| 2.2 主要仪器 |
| 2.3 主要溶液的配置 |
| 2.4 载玻片的处理 |
| 2.5 组织切片准备 |
| 2.6 免疫组织化学染色 |
| 2.7 免疫组化对照 |
| 2.8 结果判定 |
| 2.9 数据采集 |
| 2.10 统计学方法 |
| 结果 |
| 1 XIAP、Survivin、Bcl-2、Caspase-3和PCNA在B细胞非霍奇金淋巴瘤中的表达 |
| 1.1 XIAP在B细胞非霍奇金淋巴瘤和反应性增生淋巴结中的表达 |
| 1.2 Survivin在B细胞非霍奇金淋巴瘤和反应性增生淋巴结中的表达 |
| 1.3 Bcl-2在B细胞非霍奇金淋巴瘤和反应性增生淋巴结中的表达 |
| 1.4 Caspase-3在B细胞非霍奇金淋巴瘤和反应性增生淋巴结中的表达 |
| 1.5 PCNA在B细胞非霍奇金淋巴瘤和反应性增生淋巴结中的表达 |
| 2 XIAP、Survivin、Bcl-2 、Caspase-3和PCNA的表达与临床病理参数的关系 |
| 2.1 XIAP表达与B细胞非霍奇金淋巴瘤临床病理参数之间的关系 |
| 2.2 Survivin表达与B细胞非霍奇金淋巴瘤临床病理参数之间的关系 |
| 2.3 Bcl-2表达与B细胞非霍奇金淋巴瘤临床病理参数之间的关系 |
| 2.4 Caspase-3表达与B细胞非霍奇金淋巴瘤临床病理参数之间的关系 |
| 2.5 PCNA表达与B细胞非霍奇金淋巴瘤临床病理参数之间的关系 |
| 3 XIAP、Survivin、Bcl-2、Caspase-3 和PCNA在B细胞非霍奇金淋巴瘤中表达的相关性分析 |
| 讨论 |
| 1 细胞凋亡与肿瘤发生 |
| 2 XIAP、Survivin、Bcl-2 、Caspase-3和PCNA在B细胞非霍奇金淋巴瘤中的表达及意义 |
| 2.1 XIAP的表达及意义 |
| 2.2 Survivin的表达及意义 |
| 2.3 Bcl-2的表达及意义 |
| 2.4 Caspase-3的表达及意义 |
| 2.5 PCNA的表达及意义 |
| 3 XIAP、Survivin、Bcl-2、Caspase-3 和PCNA表达的相关性分析 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
（7）COX-2和Survivin在非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及相关性研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 结果判断 |
| 1.4 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 COX-2、Survivin蛋白表达与NHL组织学特征的关系 |
| 2.2 COX-2表达与Survivin蛋白表达的关系 |
| 3 讨论 |
（8）Survivin在非霍奇金淋巴瘤中的研究进展（论文提纲范文）
| 1 Survivin的结构及生物学特性 |
| 2 Survivin 的组织分布 |
| 3 Survivin的表达调控 |
| 4 Survivin在非霍奇金淋巴瘤中的表达 |
| 5 展望 |
（9）survivin在鼻型NK/T细胞淋巴瘤的表达及其与caspase-3、ki-67相关性的研究（论文提纲范文）
| 0 引 言 |
| 1 资料和方法 |
| 1.1 标本来源 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 方法 |
| 1.4 结果判定 |
| 1.4.1 survivin染色的判断标准 |
| 1.4.2 caspase-3染色的判断标准 |
| 1.4.3 ki-67增殖指数 |
| 1.5 统计学分析 |
| 2 结 果 |
| 2.1 survivin在鼻型NK/T细胞淋巴瘤和正常淋巴结组织中的表达 |
| 2.2 caspase-3在鼻型NK/T细胞淋巴瘤和正常淋巴结组织中的表达 |
| 2.3 鼻型NK/T细胞淋巴瘤中survivin和caspase-3表达的关系 |
| 2.4 survivin表达与ki-67增殖指数的关系 |
| 3 讨 论 |
（10）Survivin、P27及Ki-67在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其对淋巴瘤细胞凋亡和增殖的影响（论文提纲范文）
| 英文缩略词简表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 综述 |
四、Survivin、caspase-3在非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及意义（论文参考文献）
- [1]CRM1抑制剂的设计优化及抗淋巴瘤机制研究[D]. 王海娜. 大连理工大学, 2019(01)
- [2]食管鳞癌中survivin对Bad基因调控机制的研究[D]. 沙亚哈提·别尔克哈之. 新疆医科大学, 2017(05)
- [3]眼附属器MALT淋巴瘤Survivin及Caspase-3表达及意义[J]. 王芬,林红,赵桂秋,林静,胡丽婷,鲁军霞. 齐鲁医学杂志, 2016(03)
- [4]Survivin及Caspase-3在眼附属器MALT淋巴瘤中的表达及意义[D]. 王芬. 青岛大学, 2016(01)
- [5]Livin及Caspase-3在眼附属器淋巴组织增生病变中的表达[J]. 鲁军霞,林红,王芬,林静,张丽娜,赵桂秋. 国际眼科杂志, 2015(12)
- [6]XIAP、Survivin、Bcl-2、Caspase-3和PCNA在B细胞非霍奇金淋巴瘤中的表达及意义[D]. 张玉娜. 天津医科大学, 2012(02)
- [7]COX-2和Survivin在非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及相关性研究[J]. 李敏婕. 肿瘤基础与临床, 2009(05)
- [8]Survivin在非霍奇金淋巴瘤中的研究进展[J]. 杨顺娥,张国庆. 新疆医科大学学报, 2009(06)
- [9]survivin在鼻型NK/T细胞淋巴瘤的表达及其与caspase-3、ki-67相关性的研究[J]. 金永丽,王靖华,陈龙邦,周航波. 医学研究生学报, 2008(03)
- [10]Survivin、P27及Ki-67在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其对淋巴瘤细胞凋亡和增殖的影响[D]. 陈丽霞. 福建医科大学, 2008(01)
标签：非霍奇金淋巴瘤论文; caspase-3论文; 弥漫大b细胞淋巴瘤论文; 淋巴结反应性增生论文; 滤泡性淋巴瘤论文;